Знак л: Знак на букву «Л» – как я удивил инспектора ГИБДД и избежал штрафа за скорость

Содержание

Знак на букву «Л» – как я удивил инспектора ГИБДД и избежал штрафа за скорость


Редакция

Как известно, на автомобиле с шипованной резиной должен быть установлен знак «Шипы». Но если раньше его отсутствие практически ничем не грозило водителю, то теперь за это предусмотрен штраф в размере 500 р. Знак этот должен якобы предупреждать о том, что тормозной путь такого автомобиля значительно короче, нежели тормозной путь автомобиля без шипов. Бред, конечно же, потому как тормозной путь автомобиля, особенно современного, зависит не только от наличия или отсутствия шипов, но и еще от множества факторов.

Тем не менее наши горе-законодатели решили, что именно это, а не улучшение качества дорог, их своевременная уборка и так далее, существенным образом снизит аварийность на дорогах зимой. Раз так, подумал я, то и предупреждение о том, что у меня на машине стоит липучка, значительно снижает аварийность на дороге. Вот и вырезал себе со всеми требованиями ГОСТа знак, только в треугольнике у меня не «Ш», а «Л», типа «Липучка». Подложку белую и красный контур из световозвращающей пленки сделал. Букву «Л» — из черного винила матового. В общем, выглядит не хуже, а даже лучше фабричного. Видно издалека, читается даже ночью в искусственном освещении. И вот как-то раз, утром, когда еще темно, опаздываю я в аэропорт, друг попросил отвезти, и, каюсь, значительно превышаю скорость. На мою беду в этот день в месте, где обычно никогда не стояли, нарисовался патруль. Новый регламент видимо «обкатывают» на практике. Да не просто патруль, а с камерой видеофиксации. Тормозят, одним словом. Сижу и вижу по зеркалам, как сотрудник ДПС, идущий ко мне, проходя мимо багажника, как-то с недоумением на знак мой смотрит, он же светится в свете фар и фонарей. Подошел, представился, на удивление сразу же назвал причину остановки, а потом вдруг и говорит:

— А что это у вас за странный знак на заднем стекле?

Я ему, так, мол, и так, по мере возможности борюсь за снижение аварийности на дорогах и решил предупредить, что у меня на машине стоит фрикционная резина, а в простонародье липучка. Тормозной-то путь у меня намного короче, чем на летней, да и не всякая старая шипованная может так же хорошо на дороге держать. Вы согласны? И в глаза ему так многозначительно заглядываю.

— Но ведь такого требования в правилах нет, — говорит он мне, несколько опешив.
— Так и туфельку в треугольнике или ведьму в ступе, если за рулем женщина, вывешивать на заднее стекло правила не требуют, однако у многих они висят, и все понимают, что впереди автомобиль, от которого нужно держаться подальше. Причем даже дальше, чем от того, который на шипованной резине. Вы согласны?

— Ладно, — говорит, улыбаясь. — Боритесь, только помните, что безопасность — это не только шиповка и липучка, но и правильно выбранный скоростной режим, особенно там, где он ограничен требованиями правил или знаками, в том числе временными. Счастливого пути!

Вот так благодаря моему хендмейд-знаку я отделался лишь предупреждением, а ведь мог и на приличный штраф влететь. Кстати, в аэропорт я тогда успел, а вот если бы протокол начали составлять, то вряд ли.

Игорь Сергеев, Санкт-Петербург

Новогодний ажиотаж — это нечто… Кутерьма везде такая стоит, что аж голова кругом. С полок магазинов сметают буквально все, вне зависимости от того, продовольственный он или промтоварный. Не минула сия планида и наш автосалон. Так вот. Выдавали мы 31 декабря 2016 года под самое окончание рабочего дня два автомобиля. А так как хозяева попросили машины сразу с регистрацией, то оформили мы их в ГАИ сами. И нужно было так случиться, что номера отличались друг от друга всего одной цифрой. В итоге по запарке номера перепутали. Выдали, поздравили клиентов, вручили по бутылке шампанского и разбежались по домам встречать Новый год. И вот спустя два месяца один из автомобилей приезжает к нам на мелкий гарантийный ремонт, и приемщик замечает, что государственный номер не соответствует автомобилю, то есть отличается последней цифрой. Начинаем разбираться и вспоминаем, что выдавали мы эти две машины самыми последними 31 декабря. Номера мы, конечно, за свой счет клиенту в соответствующей организации на основании свидетельства переделали и в тот же день выдали правильные. Но вот что примечательно. За то время, что клиент ездил с неправильными номерами, его не раз останавливали инспекторы и подвоха не заметили. Но самое интересное, что другой клиент, видимо, так и ездит с «неправильными» номерами, потому как после того как оплошность была замечена, дозвониться мы до него не смогли. То ли номер телефона поменял, то ли еще что. Кстати, и штрафы на тот госномер этому хозяину за все прошедшее время ни разу не приходили. А говорят, новогодних чудес не существует.

Илья Карпов, Колпино

Редакция рекомендует:






Хочу получать самые интересные статьи

Л. Символы, знаки, эмблемы: Энциклопедия

Л

Л — буква, которая происходит от семитского слова lamed, обозначавшего изогнутую палку, которой погоняли скот. Греки переделали этот знак во что-то вроде перевернутой V и назвали эту букву «лямбда». Заимствуя эту букву из этрусского, римляне изменили угол буквы, придав ей современный вид. Графически похожая на английскую V, буква L, как и V, ассоциируется с любовью, лаской, нежностью. Также может восприниматься как источник мудрости. В русском языке буква Л иногда изображалась как пучок лучей, исходящих из центра, означая знак солнца.

Числовое значение двенадцатой буквы в русском, английском и еврейском алфавитах во всех алфавитах равно 30, а нумерологическое значение в Каббале — 3 — принцип духовного авторитета и баланса всех вещей в манифестированном мире. Согласно Каббале, буква Л соответствует принципу власти, так как входит составной частью в имя бога Лиммуд. Как часть слова «Ламед» (по-евр. — теленок) выступает символом порождающей силы в двух ее аспектах: космическом и земном.

Иероглифически изображается как простертая рука, а в алхимии обозначает разложение.

Источ.: Фоли Дж. Энциклопедия знаков и символов. М., 1997;

Энциклопедия символов, знаков, эмблем. М., 1999.

ЛАБИРИНТ — символ вселенского препятствия, который изображается в виде диска, семантически связываясь с подземным миром и небом. Души живых и умерших не могут выбраться из безвыходной ситуации лабиринта.

Лабиринт — это путешествие от смерти к рождению. Он охраняется неким царем лабиринта, живущим в самом центре сооружения и являющимся его владыкой и судьбой. Самый знаменитый лабиринт — Минотавра — находился на Крите. Туда должны были приносить жертвы человеку-быку. Однако, главное — не только добраться до сердцевины, но и выбраться, вернуться обратно к своему возрождению. Так, Тесей, убивший монстра, следуя за путеводной нитью Ариадны, нашел выход из лабиринта.

Лабиринт выступает не только символом трудного пути посвящения в тайну, но и надежной преградой, оберегающей сакральный центр от нежелательного проникновения. Не случайно изображение лабиринта на домах являлось знаком защиты.

Метафора леса на Руси также нередко связывалась с лабиринтом. С одной стороны, это задерживающая преграда, помогающая скрыться от врагов, которая, с другой стороны, требует определенных качеств, и прежде всего ориентации. Только пройдя через лес как через очистительное сито, герой приобретал силы для дальнейших испытаний.

Лабиринт имеет и другой символический смысл — как тема антидеятельности вроде сизифова труда. Истощая намеренно ложными путями и подобиями, лабиринт призван испытать настойчивость и терпение, заставляя совершать бесполезные попытки найти выход или сдаться.

Лабиринты бывают разных форм. Например, простой лабиринт образует эмблему княжеского дома Гонзага в Мантуе — иногда с изображением горы в середине и порой окруженного водой, так как палаццо династии Гонзага был построен на острове в болотистых местах около Мантуи.

Лабиринты были местом посвящения во многих древних мистериях. Одни лабиринты были просто сплетенными дорожками, обложенными камнями, другие находились под храмами в виде бесконечных подземных пещер, третьи были в горах и под горами. Византийские монастыри, окруженные стеной, назывались «лабра», откуда произошло славянское название «лавра». Благодаря орнаментальной пластике арабского алфавита, эмблема Банка Кувейта превратилась в лабиринтную структуру, сложенную в восьмиконечную звезду.

Источ.: Холл Дж. Словарь сюжетов и символов в искусстве. М., 1999;

Энциклопедия символов, знаков, эмблем. М., 1999.

ЛАБРИС — топор с двумя лезвиями — важнейший символ в религии древнего Крита, где двойные топоры с тонкими и искривленными лезвиями считались эмблемой Великой богини-матери. Название большого дворца критских царей в Кноссе — Лабиринт — расшифровывается как «Дом двойного топора». Использование двойного топора в качестве инструмента жертвоприношения можно проиллюстрировать примером древнегреческого ритуала, в ходе которого бык должен был приблизиться к алтарю «по своей собственной воле» и съесть зерно с алтаря. После этого убивший быка жрец удалялся в добровольное изгнание. Топор также объявляли «виновным» и бросали в море.

Символика двойного топора обнаруживается и в других культурах. Например, черепа с выжженным клеймом двойного топора были найдены на кладбищах эпохи нового каменного века во Франции. Тот же знак высечен на камнях Стоунхенджа.

Источ.: Энциклопедия мистических терминов. М., 1998.

ЛАВР — символ триумфа, победы и успеха. Лавр служит эмблемой Аполлона — греческого бога солнца, поэзии и музыки. Преследуемая влюбленным Аполлоном нимфа Дафна превращается в лавровый куст — в объятиях бога оказалось деревце, ветвями которого он украсил свою голову и лиру. На играх в честь Аполлона, включавших соревнования, как в атлетике, так и в искусствах, победителей венчали лавровыми венками.

Эпитет «поэт-лауреат» восходит к древнему поверию, что лавр способен вдохновить. В портретной живописи лавровый куст или ветвь указывает на то, что модель имеет отношение к литературе или искусству.

Римляне распространили традицию награждения лавровым венком и на воинов-победителей. Так, Юлий Цезарь надевал лавровый венок на все официальные церемонии, а на английских монетах Карл I, Георг I и Георг II, через некоторое время и Елизавета II также изображались с лавровыми венками. Как символ превосходства лавр включался в эмблемы таких автомобильных компаний, как «Альфа-Ромео», «Фиат» и «Мерседес».

Будучи вечнозеленым деревом, лавр также символизирует бессмертие. В этом качестве лавровая роща растет на вершине Парнаса — обиталища муз. Лавровый куст был эмблемой Лоренцо Медичи (1448–1492) с девизом «Такая добродетель», подчеркивая, что добродетель не увядает, как вечнозеленый лавр.

Лавр в античности считался предохраняющим растением, а лавровая ветвь использовалась в качестве кропила в римских жертвенных обрядах.

Источ.: Фоли Дж. Энциклопедия знаков и символов. М., 1997;

Холл Дж. Словарь сюжетов и символов в искусстве. М., 1999;

Шейнина Е. Я. Энциклопедия символов. М., 2001.

ЛАДАН — ароматическая смола, используемая для воскурения фимиама богам. Собиралась из надрезов коры дерева босвелия (семейство бурзеровых), растущего в Восточной Африке и на юго-западе Аравийского полуострова. При сжигании ладан дает специфический ароматный дым. Издревле использовался в различных культурах для выкуривания злых духов и приношения добрым. В христианстве применяется во время богослужения.

Астрологически ладан подчинен Солнцу. Его стихией является огонь, поэтому он имеет теплую ауру. Ассоциируется со многими божествами, в частности с Ра и Ваалом. Используется в практической магии, так как способствует осуществлению медитации. Считается, что он вызывает видения, усиливает концентрацию. Ладан помещался в различные талисманы. К нему обращались в специальном заговоре: «Ладаном в церкви кадят, дома им болезнь правят, под Рождество на него гадают. Ладан, ладан, было бы ладно тобой погадать, всю правду узнать, как ты, ладан-батюшка, чист, свят и честен, так и сон мой будь правдив. Аминь». В чернокнижии указывался рецепт изготовления смеси, называемой «колдовской ладан».

Источ.: Тайна черной и белой магии. Минск, 1998.

ЛАМЕДВОВНИКИ — тридцать шесть праведников на земле, чье назначение — оправдывать мир перед Богом. Они не знают друг друга и очень бедны. Если человек узнает, что он ламедвовник, он тут же умирает и его место занимает другой, хотя бы и на другом краю планеты. Сами того не ведая, ламедвовники являются тайными столпами, поддерживающими наш мир. Не будь их, Бог уничтожил бы род человеческий. Они наши спасители и сами того не знают. Это мистическое поверье можно найти в произведениях Макса Брода. Отдаленные его корни, возможно, находятся в 18-й главе Книги Бытия, где есть такой стих: «Господь сказал: если Я найду в городе Содоме пятьдесят праведников, то Я ради них пощажу место сие». Мусульмане видят аналогичный образ в кутбе.

Источ.: Борхес X. Л. Бестиарий: Книга вымышленных существ. М., 2000.

ЛАМИЯ — в греческой мифологии чудовище, некогда бывшее возлюбленной Зевса. После того как ревнивая Гера убила детей Л амии, та была вынуждена укрыться в пещере и превратилась в кровавое чудовище, похищавшее и пожиравшее детей. Так как Гера лишила ее сна, она бродит по ночам. Сжалившийся над ней Зевс даровал ей возможность вынимать свои глаза и лишь тогда становиться безвредной.

Ламия

Ламиями также назывались ночные привидения, соблазняющие юношей и высасывающие из них кровь. Ламия ассоциировалась с ночным кошмаром — Марой. У южных славян ламия — чудовище с телом змеи и собачьей головой, которое темной тучей опускается на поля и сады, пожирая плоды трудов земледельцев.

В низшей мифологии народов Европы ламией также считается злой дух, змея с головой и грудью красивой женщины, образ которой восходит к греческой Ламии. По мнению римских и греческих классиков, ламии обитали в Африке. Они лишены способности говорить, однако умеют издавать мелодичный свист и, завлекая им путников в пустыне, пожирают их. Происхождения они божественного: являются потомками одной из многих любовных связей Зевса.

Образ ламии нашел свое воплощение в мировой литературе. Роберт Бертон в «Анатомии меланхолии» (1621) ссылался на отрывок из четвертой книги Филострата «О жизни Аполлония», в котором некий молодой человек встретил в предместьях Коринфа подобное призрачное существо в облике прекрасной молодой женщины, которая, выдав себя за финикиянку, уговорила юношу жениться на ней. Но на свадьбу среди других гостей явился Аполлоний, который по некоторым признакам обнаружил, что эта женщина — ламия, чье существо — одна мнимость. Незадолго перед смертью английский поэт-романтик Джон Ките под впечатлением рассказа Бертона сочинил пространную поэму «Ламия».

Источ.: Борхес X. Л. Бестиарий: Книга вымышленных существ. М., 2000;

Женщина в мифах и легендах: Энциклопедический справочник. Ташкент, 1992.

ЛАМПА — символ света и поиска истины. Философ-киник Диоген (IV в. до н. э.), живший в Афинах и Коринфе, блуждал по рыночной площади с высоко поднятым зажженным светильником, как символом поиска истины и добродетели. Светильники присутствует в качестве атрибутов персидской Сивиллы, персонифицированных Бдительности и Ночи.

Луций Апулей (II в.) в «Метаморфозах» повествует о любви Купидона к Психее, которую он привел в свой дворец. Посещая ее только ночью, Купидон запрещал смотреть на него. Любопытство и уговоры двух завистливых сестер побудили Психею взять ночью лампу и посмотреть на бога любви. Но она неосторожно капнула на него горячим маслом, и разгневанный Купидон покинул ее.

Вместе с глазами, лежащими на блюде, лампа служит атрибутом девы-мученицы Люцции из Сиракуз, умершей около 304, отказавшейся отречься от своей веры и после долгих мучений убитой ударом меча в горло. Первоначально глаза и лампа были даны просто в качестве ассоциации с ее именем, которое означает «свет».

Источ.: Холл Дж. Словарь сюжетов и символов в искусстве. М., 1999.

ЛАСТОЧКА — символ весны и восхода солнца, добра и счастья, надежды и возрождения. Ласточка символизирует приход весны и новую жизнь, поскольку считалось, что зиму она проводит в спячке и возвращается к жизни весной. Согласно скандинавским легендам, это птица утешения: ласточка летала над распятием с криками: «Утешься! Утешься!» Символ ласточки присутствует также на Благовещении и Рождестве.

Геральдическая ласточка, носящая название «мартлет», чаще всего изображается без ног, так как, согласно средневековому представлению, всегда живет в небе и никогда не спускается на землю; хотя в геральдике иногда встречаются и натуральные ласточки. Из них наиболее известны шесть ласточек на гербе семейства Арундел, как намек на то, что их фамилия произошла от названия ласточки по-французски — hirondelle.

Источ.: Фоли Дж. Энциклопедия знаков и символов. М., 1997;

Шейнина Е. Я. Энциклопедия символов. М., 2001.

ЛАТИНСКИЙ КРЕСТ (от лат. crux imissa) — символизирует человека с распростертыми руками и является прямым образом Страстей Христовых. Однако этот крест символизировал богов в Греции и Китае еще до появления христианства.

Четырехконечный крест является наиболее употребительным на католическом Западе, хотя и на православном Востоке употребляется как форма креста, равнозначная всем другим. Он прослеживается в римских катакомбах начиная с III в. Принятый Вселенской Церковью «Канон Честному Кресту» (Григорий Синаит) воспевал Божественную четвероконечную силу креста. Сильным побуждением для почитания прямого креста, а не монограммного было обретение Животворящего Креста матерью Константина равноапостольною Еленою.

В архитектуре Западной Европы с периода раннего Средневековья планировка в виде неравноконечного креста — горизонтальная ось относится к вертикальной, как один к трем — характерна для церковных построек, базилик. При этом перекладину креста образует трансепт, алтарная часть расположена в обращенной на восток короткой вершине креста, а главный вход — в его более длинном основании.

Источ.: Аполлон. Изобразительное и декоративное искусство. Архитектура: Терминологический словарь. М., 1997;

К. В. П. История развития формы креста. Краткий курс православной ставрографии. М., 1997;

Фоли Дж. Энциклопедия знаков и символов. М., 1997;

Шейнина Е. Я. Энциклопедия символов. М., 2001.

ЛЕБЕДИНЫЕ ОТМЕТКИ — знаки, которые вырезались на клювах лебедей в Англии, где лебеди считались королевскими птицами, по крайней мере, с XII в. Кроме королевской семьи, никто не имел права быть владельцем лебедей, хотя с XV в. иногда такое право предоставлялось дворцовым фаворитам и даже отдельным корпорациям, как, например, «Ливери компаниз» в Лондоне. К правлению королевы Елизаветы I существовало уже 900 лебединых выводков, у каждого из которых был свой знак, вырезаемый на верхнем клюве птицы. В наши дни только две компании продолжают держаться за привилегию иметь своих лебедей на Темзе: «Дайерз», которой она была дарована в 1473, и «Уоршипфул компани оф Винтнерз», получившей это право примерно в то же время. У обеих компаний есть специальные смотрители, которые в июле вместе с ассистентами, «подъемщиками лебедей», выманивают птиц из воды для клеймения. Принадлежность лебедей можно легко определить: «Дайерз» ставит одну насечку, а «Винтнерз» — две. Королевских же лебедей в настоящее время не метят: все неклейменые лебеди считаются принадлежащими Короне.

Источ.: Фоли Дж. Энциклопедия знаков и символов. М., 1997.

ЛЕБЕДЬ — символ верной и чистой любви, грации, совершенства, чистоты и невинности. Пара лебедей стала расхожим символом верности и неразлучности.

Символика лебедя практически одинакова у большинства народов мира. В Древней Греции он обозначал Зевса, который превращался в лебедя, сочетаясь в браке с Немесидой и Ледой. С этим образом связываются также изящество и поэзия. Не случайно Вергилия называли «мантуанским лебедем», Мартина Опица — «боберфельдским», а Василия Жуковского — «царскосельским».

Лебедь иногда выступает символом тайны. Так, Царевна-лебедь покидает своего супруга, когда тому удается подсмотреть, как она сбрасывает перья. «Рыцарь Лебедя» Лоэнгрин улетает от своей жены на серебряной повозке, запряженной семью лебедями, когда ей удастся узнать о его происхождении.

Античные легенды гласят, что лебедь поет только перед смертью (отсюда выражение «лебединая песня»), и потому он символизирует конец жизни. Возможно, по этой причине он ассоциировался с Аполлоном и через него с некоторыми музами, например Эрато и Клио.

Благодаря своей красоте, лебедь стал атрибутом Венеры: пара лебедей везет ее колесницу. Греческий миф повествует о том, как в жену спартанского царя Тиндарея Леду влюбился Зевс, приплывший к ней по реке в образе лебедя. В лебедя превратился друг погибшего Фаэтона Кик. Эти птицы, олицетворявшие мистерии, были символами чистоты инициированных. В этом смысле трактуется аллегория воплощения богов (секретная мудрость) в тело лебедя (инициированный).

В христианской символике лебедь служит знаком Девы Марии. Вполне сопоставим с традиционной христианской символикой известный образ славянского фольклора — Царевна-лебедь.

Но лебедь и символ лицемерия, поскольку его белоснежное оперение скрывает черное тело. Популярный на вывесках пабов «лебедь с двумя шеями» служит также символом подкупа, развращенности и продажности. «Гуси-лебеди» из русской народной сказки — верные прислужники Бабы-Яги — похищают для нее маленького мальчика, хотя этот случай довольно редок в «лебединой» символике, тем более что в похожей украинской сказке гуси-лебеди не похищают, а, наоборот, спасают героя от ведьмы.

Источ.: Фоли Дж. Энциклопедия знаков и символов. М., 1997; Холл Дж. Словарь сюжетов и символов в искусстве. М., 1999; Шейнина Е. Я. Энциклопедия символов. М., 2001; Энциклопедия символов, знаков, эмблем. М., 1999.

ЛЕВ — царь зверей, один из самых часто встречающихся символов храбрости, быстроты, стойкости, силы и величия на протяжении тысяч лет. Львиные фигуры изображаются на царских тронах в Индии и на львиных вратах в Микенах. Каменные изваяния львов встречаются у входа в буддийские храмы в Китае. В Древнем Египте даже ключи от храмов были сделаны в форме льва. Трон царя Соломона был украшен золотым львами, да и сам он был уподоблен царю зверей с ключом мудрости в зубах.

Символика льва вскрывает древнюю мистерию жертвы и законы воздаяния. Лев является светоносным символом огня и солнца. Не случайно в Египте, где его шкура была атрибутом солнца, фараона обычно изображали в виде льва. В Древней Греции лев считался проводником солнца. Изображения льва как символа духа часто появлялись на амулетах и талисманах.

Лев как знак солнца нередко ассоциируется с идеей всепожирающего времени. Непобедимый лев означает непобедимость времени. Кронос Митры — божество, олицетворяющее бесконечное время, — имеет фигуру человека с головой льва или изображается человеком с головой льва на груди. Цербер, охраняющий в подземном царстве реку Стикс, имел три головы: посредине голову льва, а по краям — волка и собаки. Это были знаки трех аспектов времени: непобедимый лев отражал настоящее, волк изображал прошлое, которое охотится за воспоминаниями, а преданная собака указывала на будущее. Лев в виде змея с головой льва, как знак настоящего времени, помещался у ног Аполлона, выступающего повелителем небесных сфер и времени.

Тем не менее каждая традиционная культура преломляла этот символ по-своему. В Египте лев был связан с богами Ра, Осирисом и Гором, а также выступал воплощением богинь Тефнут и Хатор. Древнеегипетская богиня Бастет, олицетворяющая жизнь и плодородие, изображалась в виде женщины с головой львицы или кошки. Амт — лев с головой крокодила — пожирал грешников. Священные коровы — проекции Исиды, — разгневавшись, также превращались в львиц. Сирийская богиня Аллат в городе Пальмира была представлена львом, держащим в когтях ягненка. В Греции лев был календарной эмблемой: весной Дионис мог являться в образе льва.

В Индии лев был воплощением хранителя мирового порядка Вишну, а человек-лев (нарасимха) — олицетворение силы и мужества — означал веру в Вишну. Дурга — жена Шивы — как женский аспект духовной мощи изображалась сидящей на льве. В странах с буддийской традицией лев означал храбрость и благородство. Он также символизировал Север, с которым связан приход Будды и его царствование. В Китае Будда почитался «львом среди людей», а львиный рык связывался с голосом Будды. В исламе святой Али — «царь святых» — именовался «львом Аллаха».

У славянского племени лютичей лев был символом бога войны Радогоста, который почитался как третье воплощение Даждьбога. Главный храм лютичей — Ретры — был украшен многочисленными изображениями львов.

В Ветхом Завете со львом сравниваются Иуда, Дан, Саул и Даниил. Лев — один из четырех явленных Иезекиилю животных. Пророчество Исайи дает библейскую символику льва, мирно покоящегося рядом с овцой, что означает человека, трансформировавшего свою необузданную волю в мужество, силу и любовь. В Новом Завете крылатый лев стал символом святого Марка и соответственно с XII в. — Венеции, покровителем которой считается святой Марк. Он — знак отшельничества и одиночества, ввиду чего соотносится со многими христианскими святыми. Согласно популярной притче, Иероним вынул занозу из лапы льва, который с тех пор стал его преданным другом. Лев как символ силы духа изображается у ног святого Адриана — покровителя солдат и мясников, защитника от чумы. Лев является атрибутом великомучениц Евфимии и Феклы, брошенных на съедение львам, пощадившим их. Лев ассоциируется и с Христом, называемым в Откровении Иоанна Богослова «Львом от колена Иудина».

На раннехристианских погребениях льва изображали как символ Воскресения. В Средние века существовало представление, что львята рождаются бездыханными и оживают только через три дня, после того как лев-отец возвращал их к жизни посредством своего дыхания. Именно это поверье сделало льва символом Воскресения.

Поскольку в античные и Средние века верили, что лев спит с открытыми глазами, он стал символизировать бдительность, и превратился в идеального стража на дверях церквей, на могилах, монументах и мостах. Статуи львов охраняют двери дворцов и усыпальниц по всему свету, а голова льва с кольцом, вдетым в ноздри, часто является формой дверных ручек. В греческой и римской архитектуре изображения львов использовали как ксенофилаксы — охранители источников.

Лев символизирует красоту и совершенство. Выражение «светский лев» означает человека безупречных светских манер. Верность льва известна по легенде о благородном льве, умирающем на могиле своего хозяина Андрокла.

Лев, со многими приписываемыми ему значениями, является традиционным символическим животным в религиозном и светском искусстве. Шкура льва является атрибутом Геркулеса и потому иногда — персонифицированной Храбрости. Также лев символизирует одну из персонифицированных сторон света — Африку, выступает атрибутом гордыни, гнева и холерического темперамента. В христианском искусстве лев, борющийся с драконом, обозначает борьбу со злом.

Но с другой стороны, лев, держащий человека или ягненка, служит символом зла. В негативном плане лев служит эмблемой Антихриста, который должен родиться от колена Дана. В Псалтири победа над князем тьмы интерпретировалась как победа над львом и драконом. Для К. Г. Юнга дикий лев является символом диких страстей и может указывать на опасность бытия, поглощаемого бессознательным.

Воображение Египта породило Сфинкса — существо с телом льва, головой и верхней частью женщины, хвостом быка и крыльями орла. В стране гипербореев, согласно греческим мифам, грифоны — чудовищные птицы с орлиным клювом и телом льва — стерегли золото. Изображения грифонов встречаются на вавилонских стенах. Грифон, подобно дракону, охраняет путь к спасению. Он — знак взаимосвязи психических сил и космической энергии. В христианской символике грифон сочетает орла Иоанна и льва Марка — символы мужества и славы.

В масонстве лев олицетворяет мощь и славу, вершину Королевской Арки — Небесной Дуги, куда возвращается солнце во время летнего солнцестояния.

В алхимии он служит символом сырой необработанной материи и знаком золота. Зеленый лев ассоциируется с мышьяком и свинцом, а красный — с герметическим золотом. Лев — земной противник небесного орла, хозяин природы, выразитель силы и носитель мужского принципа. Он символизирует непрерывную борьбу, солнечный свет, утро, королевский сан, победу. Крылатый лев выражает элемент огня — «философский огонь».

В антропософии лев выступает как «страж порога», встречающий каждого, желающего постигнуть сверхчувственный мир. Охранительные функции льва в эзотеризме получают дополнение в виде посвятительного смысла. Так, крылатая Артемида иногда изображается держащей за ноги укрощенных львов в окружении изображений восьми «печатей сокрытых» как символа магической власти над циклом времени.

Как наиболее популярный зверь в геральдике, лев встречается в гербах многих фамилий, муниципалитетов и государств. В геральдических системах он обозначает благоразумие, твердость и стойкость. На его солнечный символизм указывает лишь золотой цвет. Основная геральдическая форма — лев на задних лапах в профиль. При этом обозначаются один глаз и одно ухо, а из пасти виднеется окровавленный язык. Различаются и другие варианты изображения: лев вооруженный (его атрибутами могут быть лук со стрелами, сабля, меч, секира, алебарда и т. п.), коронованный, смирный (без зубов, когтей и высунутого языка), бесхвостый или с хвостом дракона. Рождающимся называется лев, когда видна только верхняя половина его тела, а выходящим — если видны голова, плечи, передние лапы и хвост.

На эмблематическом уровне лев — знак отваги, силы, храбрости, великодушия и милости. Он изображен на государственных гербах Швеции, Великобритании, Нидерландов, Чехословакии, Болгарии, Индии, Ирана, Канады и Испании. Со времен Ричарда I (1157–1199), которого за храбрость называли Львиное Сердце, три льва являются эмблемой английских монархов. С другой стороны, символ британского суверена может также означать и тиранию: к примеру, на реверсе печати штата Пенсильвания, принятой в 1787, изображена фигура Свободы, попирающей льва, с надписью: «Жить может только один». На эмблематическом уровне символ льва часто разыгрывался в различных сочетаниях с другими знаками и атрибутами: например, лев, держащий в зубах крест.

Из-за обилия положительных качеств лев стал наиболее часто используемым символом в европейской торговле и промышленности. Он олицетворяет мощь железных изделий во французской фирме «Пежо» (с девизом: «Лев идет от мощи к мощи») или бдительность в Британском совете по птицеводству и производству яиц, который после 20-летнего перерыва восстановил символ — «маленький лев», служащий знаком качества и удостоверяющий, что яйцо соответствует необходимым стандартам гигиены.

Одним из самых загадочных примеров символизма с фигурами животных является рекламный знак «лев и осы», который шотландский бизнесмен Абрам Лиль выбрал для изобретенного им в 1883 «Золотого сиропа», основываясь на библейской истории про льва, убитого Самсоном, и ос, сделавших из сот гробницу вокруг сгнившего зверя.

Источ.: Фоли Дж. Энциклопедия знаков и символов. М., 1997;

Холл Дж. Словарь сюжетов и символов в искусстве. М., 1999;

Шейнина Е. Я. Энциклопедия символов. М., 2001;

Энциклопедия символов, знаков, эмблем. М., 1999.

ЛЕВ, ЗНАК ЗОДИАКА — пятый знак Зодиака, название которого восходит к латинскому leo — «лев». Считается, что этот символ происходит от изображения греческой буквы лямбды, поскольку греки называли созвездие Leon. Существует и другая версия, что современный знак Зодиака — упрощенное средневековое изображение созвездия, представляющее собой гриву льва и его хвост.

Лев, знак Зодиака

Как знак августа (23 июля — 22 августа) символизирует стихию огня и является постоянным знаком. Знак Льва — наиболее отчетливое проявление мужского начала, а также символ всевидящего и всемогущего Бога Отца, источника жизни и жизненной силы. Как символу космоса ему соответствуют власть наиболее сильной из планет — Солнца — и чистый свет. Солнечный символизм Льва определяется главным образом тем, что он является домом Солнца. Поэтому знак, отличающийся светоносным качеством, освещает своим светом всех, кто с ним соприкасается. Лев означает также неукротимость солнечной силы, перед которой склоняются все животные других знаков Зодиака. Властность в нем иногда достигает крайностей и порой может переходить в жестокость. Но, как правило, это открытый, великодушный характер.

В человеке знак Льва соответствует прежде всего сердцу, воздействуя, кроме того, на легкие и печень. Знак связан с чувствами и эмоциями. Те, кто рожден под знаком Льва, как правило, отважны, сильны, великодушны, но полагаются только на себя. Они добросердечны и чувствительны. Это — созидатели с чувством собственного достоинства, люди, которые быстро вдохновляются на свершения, с бьющими через край чувствами. Рожденные под этим знаком очень гостеприимны, но также самовлюбленны, тщеславны, нетерпимы к недостаткам других, порывисты, догматичны, самоуверенны, воинственны и склонны к показухе. Имя Наполеона в переводе означает «великий лев пустыни». Согласно Трояновскому, на эзотерической карте неба лев соответствует Иуде, которому была предсказана славная участь, благодаря его неустрашимости и силе воли.

Это знак, наиболее определяемый планетарными влияниями. Области его владения: Халдея, Турция, Италия, Франция, Богемия, Арктика и Антарктида. Его города: Рим, Дамаск, Бристоль, Прага, Филадельфия и др. Его цвета — пурпурный, золотой, оранжевый, алый и черный. Типичный представитель знака Льва — Ричард Львиное Сердце. Его зодиакальные камни: алмаз, янтарь, золотой топаз, рубин, оникс и хризолит. Его цветы — пионы, ноготки, гладиолусы и хризантемы. Счастливый день для рожденных под знаком Льва — воскресенье, а неудачный — суббота.

Источ.: Фоли Дж. Энциклопедия знаков и символов. М., 1997;

Шейнина Е. Л.; Энциклопедия символов, знаков, эмблем. М., 1999.

ЛЕВИАФАН — вымышленное, огромных размеров чудовище, олицетворявшее негативные аспекты морской стихии. В христианстве Левиафан стал символом дьявола, а приблизительно с XII в. вход в ад изображался в виде разверзшихся челюстей морского монстра, внутри которого иногда стоял котел. Книга Иова представила наиболее развернутое описание Левиафана: «нет столь отважного, который бы осмелился потревожить его… круг зубов его — ужас; от его чихания показывается свет, глаза у него — как ресницы зари… дыхание его раскаляет угли, из пасти его выходит пламя; он кипятит пучину, как котел, и море претворяет в кипящую мазь;…он царь над всеми сынами гордости».

Чаще всего Левиафан изображался в виде гигантского крокодила, а также дракона или змея. Являлся антиподом бегемота. В Левиафана обратился Сет во время своей борьбы с Гором. В угаритской мифологии семиголовый Левиафан в праисторические времена сражается против Балу и Анат и оказывается побежденным. Изоморфен вавилонской Тламат, рассеченной пополам при разделении верхних и нижних вод богом Мардуком. Левиафан символизировал враждебный Демиургу первородный Хаос. При разделении мира, слитые первоначально воедино, Левиафан и бегемот выступили его ипостасями.

Согласно христианской традиции, мясо Левиафана праведники будут есть на пиру после победы Мессии. В демонологии Левиафан — один из ангельских князей, ушедших вместе с Люцифером. Он олицетворял порок зависти и покровительствовал еретичеству. В геополитическом символизме выступает эмблемой таласократии — власти моря. Интерпретируется рядом геополитиков как символ атлантизма — цивилизационных принципов государственной политики Карфагена, Великобритании и США.

Источ.: Багдасарян В. Э. Демонологическая парадигма христианской конспирологии // Армагеддон. 1999. № 3;

Дугин А. Г. Основы геополитики. Геополитическое будущее России. М., 1997;

Мифологический словарь. М., 1991;

Холл Дж. Словарь сюжетов и символов в искусстве. М., 1999;

Шейнина Е. Я. Энциклопедия символов. М., 2001.

ЛЕМУРЫ — злые духи. Древние полагали, что души людей после смерти блуждают по земле, смущая покой ее обитателей. Добрых духов они называли Lares familiares (семейными ларами), а злые носили название Lemures (лемуры). Злые духи устрашали людей добродетельных и неустанно терзали порочных и нечестивых.

У римлян был обычай в мае устраивать в честь этих духов празднества, называвшиеся «лемурии» или «лемуралии».

Лeмyp

По легенде, впервые эти празднества были учреждены Ромулом, дабы умиротворить дух его брата Рема, по имени которого они были названы «ремуриями» или в искаженном варианте «лемуриями». Торжества длились трое суток, в течение которых храмы богов были закрыты и свадьбы запрещены. Существовал обычай бросать на могилы усопших черные бобы или сжигать их, так как считалось, что лемуры не выносят этого дыма. Произносили также магические слова и били в котлы и барабаны, веря, что злые духи удалятся и больше не станут тревожить людей на земле.

Источ.: Борхес X. Л. Бестиарий: Книга вымышленных существ. М., 2000.

ЛЕРНЕЙСКАЯ ГИДРА — мифическое чудовище, порожденное безобразным Тифоном и Ехидной, которая была наполовину прекрасная женщина, наполовину змея. У гидры, согласно Диодору, было сто голов, согласно Симониду — 50, и согласно наиболее признанному мнению Аполлодора — девять. Но самым ужасным в этой твари было то, что, стоило отрубить одну голову, как на ее месте вырастали две другие. Легенда гласит, что головы были человеческими, а средняя из них была бессмертной. Дыхание гидры отравляло воду и сжигало посевы. Даже когда она спала, ядовитый воздух вокруг нее был смертелен для людей.

Этот многоглавый монстр — водяная змея — опустошал Лернейскую страну, находившуюся недалеко от Аргоса. Логово чудовища находилось среди болот, близ озера Лерны. Когда туда явились Геракл и Иолай, то первый отсек головы, а второй приложил к кровоточащим ранам раскаленное железо, ибо только огонь мог помешать вырасти новым головам. Последнюю голову, которая была бессмертна, Геракл похоронил под огромным утесом, где она, согласно мифу, пребывает до наших дней: то пышет ненавистью, то спит. Совершая дальнейшие подвиги с другими зверями, Геракл наносил им смертельные раны стрелами, смоченными желчью гидры.

Христианская традиция несколько изменила символический образ гидры. Раннеренессансная гидра часто напоминает средневекового крылатого дракона — одноглавого и огнедышащего, персонифицирующего Сатану.

Источ.: Борхес X. Л. Бестиарий: Книга вымышленных существ. М., 2000; Холл Дж. Словарь сюжетов и символов в искусстве. М., 1999.

ЛЕС — символ земли, связанный с женским началом, противопоставляемый власти солнца. В мифологии друидов лес и солнце вступают в брачные отношения. «Леса Альбиона» составляют дубовые рощи друидов, простирающиеся от Лондонского камня по всей земле.

Лес — место всевозможной опасности, подвластное духам и демонам, традиционное место, где можно заблудиться. Затерявшимися в лесу оказываются маленькие герои многих волшебных сказок, которым предстоит пройти много испытаний на пути к инициации.

В лесу увидел самого себя Данте, пройдя половину жизни. У английского поэта и художника Уильяма Блейка лес полон мертвых деревьев, что выступает знаком социальных и умственных заблуждений. Именно под властью разума человек пребывает в «лесах ночи», а также в «вечных лесах», образующих земли, «кружащиеся в кругах пространства».

Источ.: Энциклопедия символов, знаков, эмблем. М., 1999.

ЛЕСТНИЦА — символ связи между верхом и низом, между небом и землей, олицетворение постепенного подъема вверх.

Амулеты в виде лестниц обнаружены в египетских захоронениях. Широко известна «лестница Иакова». Третьему из великих патриархов Иакову по пути в Харран приснилась лестница, доходившая до самого неба, по которой вниз и вверх сновали ангелы. Очевидно, мусульманское представление о том, что правоверные поднимаются в рай по лестнице, возникло не без влияния этой легенды. Бенедиктианскому монаху святому Ромуальду (ок. 952— 1027), подобно Иакову, приснилась доходившая до неба лестница, вверх по которой взбирались одетые во все белое монахи его ордена. Считается, что лестница стала реминисценцией лестницы к вавилонскому «Зиггурату», простиравшейся от основания башни до храма на самой вершине, где пребывал Бог.

В христианской традиции лестница является эмблемой святого Алексия. Лестница Иоанна Лествичника стала символом восхождения от одной добродетели к другой, символом борьбы со страстями. Лестница является одним из инструментов Страстей Христовых и фигурирует в Поднятии Креста и в Снятии с Креста. В раннем итальянском Возрождении Христос поднимается по лестнице либо находится уже возле креста, а палачи, поднявшиеся по лестницам, прибивают к поперечинам креста руки Спасителя.

На эмблематическом уровне лестница, ведущая вверх, символизирует храбрость и смелость, а ведущая вниз связана с отрицательными характеристиками. Кроме того, лестница рассматривается как символ иерархии. Отсюда утвердилось выражение «продвигаться вверх по служебной лестнице». Натуралисты XVIII в. строили иерархичную картину мира, определяя «лестницу подчиненности, значимости и первенства в развитии способностей существ». Эскалатор является современным вариантом лестницы и соответственно карьеры. От человека только требуется попасть на нужный эскалатор, а все остальное сделает «служебная машина».

Источ.: Холл Дж. Словарь сюжетов и символов в искусстве. М., 1999;

Энциклопедия символов, знаков, эмблем. М., 1999.

ЛЕТО — символ страдающей, «вечно милой» и «самой кроткой» матери. В греческой мифологии Лето — дочь титанов Коя и Фебы, родившая от Зевса Аполлона и Артемиду. Чаще всего имя Лето сближали с корнем, указывающим на «ночь» и «забвение», тем более что мать ее Феба была луной, а сестра Астерия — звездой. Однако, вероятнее всего, Лето была божеством догреческого происхождения, так как мифы о Лето восходят к малоазийским корням, а имя ее связано с ликийскими словами «жена» и «мать». Возможно, этим негреческим происхождением богини объясняется ее незаконная связь с Зевсом и преследование ее Герой.

В мифах Лето изображается и прославляется как мать и жена. Девять дней мучается Лето в тяжелых родовых схватках, так как злобная Гера задержала богиню родов Илифию под облаками на Олимпе. Опасаясь Геры, все отвергали Лето, и только остров Делос приютил богиню. Там под пальмами она и родила своих детей.

Ренессанс, возродивший античную традицию изображать времена года в виде античных богов, ассоциировал Лето с богиней плодородия Церерой (греческой Деметрой). В живописи XV–XVII вв. персонифицированное время года — Лето — изображается в виде молодой женщины с серпом и колосьями или со снопами. Может изображаться также в виде обнаженной женщины со злаками или фруктами.

Источ.: Женщина в мифах и легендах: Энциклопедический справочник. Ташкент, 1992;

Холл Дж. Словарь сюжетов и символов в искусстве. М., 1999.

ЛЕТУЧАЯ МЫШЬ — ночное млекопитающее, олицетворяющее слепоту и являющееся атрибутом персонифицированной Ночи. Как птица дьявола, ассоциируется также с черной магией и ведьмами.

Хотя существуют и противоположные аналогии. Иногда летучая мышь символизирует зрение, надежду и удачу. В китайской символике она приносит счастье, поскольку это слово обозначается тем же словом «фу». По традиции пять летучих мышей обозначают пять благословений: здоровье, благосостояние, долгую жизнь, целомудренную любовь и естественную смерть.

Источ.: Фоли Дж. Энциклопедия знаков и символов. М., 1997;

Холл Дж. Словарь сюжетов и символов в искусстве. М., 1999.

ЛИГАТУРА (от лат. ligatura — связь) — буква или знак фонетической транскрипции, представляющий собой комбинацию двух или более знаков, а также соединенное написание двух и больше букв, передающих один звук. В полиграфии лигатурой называется слитное начертание двух или нескольких письменных знаков, а в типографском наборе — двойная буква, отлитая в одну литеру.

В музыке знак лигатуры означает увеличение длительности ноты посредством объединения ее лигой с длительностью соседней ноты той же высоты. В металлургии лигатурой называются вспомогательные сплавы, применяемые для введения в жидкий металл легирующих элементов с целью придания ему определенных свойств.

Источ.: Фоли Дж. Энциклопедия знаков и символов. М., 1994.

ЛИЛИТ — злой дух, в иудейской демонологии обычно женского рода. Имя восходит к именам трех шумерских демонов: Лилиту, Лилу и Ардат Лили. Первый из них — суккуб, а второй — инкуб, что предполагает андрогинную природу Лилит. Но в европейской традиции Лилит чаще всего выступает в роли суккуба. Она овладевает мужчинами против их воли с целью родить от них детей, поэтому Талмуд не рекомендует мужчинам ночевать дома одним.

Согласно одному преданию, появившемуся из одного темного места в 1-й главе Книги Бытия («Ибо до Евы была Лилит»), Лилит была первой женой Адама, сотворенной ему из глины. Но у Адама с Лилит сразу возник спор. Лилит, не сумев убедить Адама в том, что они равны, так как оба сделаны из глины, улетела от него. В Красном море ее настигли посланные богом три ангела, но Лилит отказалась вернуться, заявив, что создана, чтобы вредить новорожденным. Ангелы взяли с нее клятву, что она не войдет в дом, в котором увидит их самих или их имена. Кроме того, она приняла на себя наказание, заключавшееся в том, что отныне ежедневно должно умирать сто ее детей.

Другая легенда гласила, что Адам вступил в связь с Лилит только после изгнания из рая, в результате чего мир наводнился демонами. В переводах Септуагинты имя Лилит выпало, потому что созданная Творцом равной Адаму, она не соответствовала концепции древнеиудейского брака, где бунт женщины был невозможен. В иудейском быту волосатая и крылатая Лилит особенно известна как вредительница деторождения. Считалось, что она не только наводит порчу на младенцев, но и похищает их, пьет кровь новорожденных, высасывает мозг из костей и подменяет их. Ей также приписывалась порча рожениц и бесплодие женщин. Амулеты и заговоры для роженицы против Лилит должны содержать не только имена трех ангелов, пытавшихся возвратить ее, но и некоторые имена самой Лилит: Батна (чрево), Одем (краснота) или Аморфо (не имеющая формы).

В Средние века легенда несколько изменилась: Лилит стала уже не змеей, а духом ночи. Иногда она предстает в виде ангела, ведающего рождением людей, иногда — демоном, осаждающим спящих в одиночку или одиноко бредущих по дороге. В народном воображении она предстает в виде высокой молчаливой женщины с длинными черными распущенными волосами.

Согласно каббалистической книге «Зогар», Лилит стала женой Самаэля (Сатаны) и матерью демонов. В зазеркалье, где Сатана играет роль бога, Лилит становится отражением женского аспекта Бога, Шехины, поэтому жители долины Содом, предположительно оставшиеся в живых дети Адама и Лилит, поклонялись Лилит, как Великой матери, одаривающей их земным огнем.

Благодаря большому интересу к Каббале, в Европе эпохи Возрождения предание о Лилит как первой жене Адама стало известно литературе, где она обрела облик прекрасной, соблазнительной женщины. Подобное представление о Лилит появляется и в средневековой еврейской литературе, хотя в еврейской традиции красивая внешность Лилит связана с ее способностью менять свой облик. Легенда о ней вдохновила английского поэта Данте Габриэля Россетти (1828–1882) на написание поэмы «Райская обитель», в которой Лилит-змея стала первой женой Адама, а Еву Бог создал потом. Чтобы отомстить Еве, Лилит уговорила ее отведать запретный плод и зачать Каина, брата и убийцу Авеля. Такова первоначальная форма мифа, которую развил Россетти.

Образ Лилит многократно и по-разному обыгран в мировой литературе. Так, у Гете Фауст видит красавицу и получает предупреждение, что это первая жена Адама и что прикоснуться к ее волосам — значит уйти навеки. У Анатоля Франса «Дочь Лилит» — привидение с зелеными глазами и черными волосами. Кого она касалась ими, того ждало забвение. У русского писателя-символиста Федора Сологуба в сборнике «Пламенный круг» это не мрачный образ, а кусочек лунного света. Романтическую окраску Лилит получила и в поэме А. Исаакина «Лилит», где прекрасная, неземная, сделанная из огня Лилит противопоставляется обыденной Еве. Такое же противопоставление Лилит Еве находим в стихотворении Марины Цветаевой «Попытка ревности».

Символические предания старины распространились и на сферу астрологии, где существует фиктивная планета Лилит (другое ее, метафорическое название — Черная Луна), изображаемая овалом с поперечиной посередине. Она имеет первоначальное значение в каждой судьбе, отмечая собой ту точку Зодиака, где свершается предначертанное. Лилит в соединении с солнцем и луной приносит славу, которая связана с предельными качествами — либо гений, либо преступник. Дополняя Сатурн, Черная Луна подчеркивает любовь к безмерному риску, свойственную игрокам, которые не в состоянии оплатить проигрыш. Поэтому в этом знаке скрыта черная тайна проигрывающего.

Источ.: Борхес X. Л. Бестиарий: Книга вымышленных существ. М., 2000;

Женщина в мифах и легендах: Энциклопедический справочник. Ташкент, 1992;

Энциклопедия символов, знаков, эмблем. М., 1999.

ЛИЛИЯ — символ чистоты, величия и невинности. В классической мифологии восходит к изображению молока, льющегося из груди супруги Зевса Геры. Христиане считали, что лилия проросла из слез Евы, когда она покидала рай.

Хотя в противоположность розе лилия означает мужское начало, она не только является эмблемой Девы Марии под названием «мадонны лилии», но также ассоциируется со святыми Екатериной Сиенской, Кларой и Евфимией. Как королевский атрибут лилия появляется на коронах и скипетрах святых (Доминика, Франциска, Людовика, Антония из Падуи, Иосифа) и принадлежит Богородице, как Небесной Царице. Кроме того, она фигурирует в Благовещении — в вазе или в руках архангела Гавриила — и потому с эпохи Возрождения стала его атрибутом. В Библии «лилии полей» упоминаются как символ преданного служения Богу.

Праймер битумный универсальный Знак Равенства 20 л

Профсоюзная, 63, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Орджоникидзе, 29, Тюменская область, Боровский

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Бурлаки, 2а к1, Тюменская область, Московский

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Федюнинского, 60, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Широтная, 100 к5, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Константина Посьета, 16, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Михаила Сперанского, 17, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Полевая, 109, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Салманова, 12, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

50 лет Октября, 57в, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Пермякова, 83 к2, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Широтная, 193, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Малыгина, 57, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

2-я Луговая, 22 к1, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Станционная, 24 к1/4, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Олимпийская , 31, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Авторемонтная, 49, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Минская, 11, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Владимира Бахарева, 1, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

2-я Дачная, 80, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Кремлевская, 112 к4, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Ямская, 92, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Самарцева, 3, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Моторостроителей, 5, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Холодильная, 120а, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Ватутина, 12/1, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Дамбовская, 10 ст19, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

Круглосуточно

70 лет Победы, 15, Нижняя Тавда

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Титова, 5, Богандинский

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Московский тракт, 125б, Успенка

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Первооткрывателей, 14, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Виктора Тимофеева, 9, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Сергея Джанбровского, 4, Дударева

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 1 шт

8:00 — 21:03

Садовая, 3а, Ожогина

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 2 шт

Круглосуточно

Сеченова, 161в, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 2 шт

8:00 — 21:03

Тимофея Чаркова, 81, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 2 шт

8:00 — 21:03

Пермякова, 2 ст1, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 2 шт

7:00 — 21:00

Заводоуковская, 12а, Березняки

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 2 шт

8:00 — 21:03

Мельникайте, 2 к2, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 2 шт

8:00 — 21:03

Тульская, 7, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 2 шт

8:00 — 21:03

Магистральная, 14, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 2 шт

8:00 — 21:03

Губернская, 42, Комарово

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 3 шт

8:00 — 21:03

Панфиловцев, 86, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 3 шт

Круглосуточно

Федюнинского, 79, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 3 шт

7:00 — 21:00

Клары Цеткин, 2а, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 3 шт

7:00 — 21:00

50 лет Октября, 109, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 3 шт

7:00 — 21:00

Жуковского, 84 ст1, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 3 шт

Круглосуточно

Щербакова, 99а, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 3 шт

Круглосуточно

Московский тракт, 130, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 3 шт

7:00 — 21:00

Мельникайте, 123 ст1, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 3 шт

Круглосуточно

Строителей, 6б, Червишево

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 3 шт

8:00 — 21:03

Республики, 252к, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 3 шт

Круглосуточно

Щербакова, 172, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 4 шт

8:00 — 21:03

Ставропольская, 120 к2, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 6 шт

Круглосуточно

Старый Тобольский тракт 4 км, 48, Тюмень

Магазин «Строительный двор»

В наличии: 11 шт

8:00 — 21:03

В КубГТУ откроют памятный знак Б.Л. Розингу – Новости – КубГТУ

В КубГТУ откроют памятный знак Б.Л. Розингу

26 сентября в Кубанском государственном технологическом университете состоится открытие памятного знака выдающемуся ученому-физику Борису Львовичу Розингу.

Б.Л. Розинг — автор более 25 патентов и свыше 50 научных публикаций. Он стоит у истоков эры мирового телевидения и высшего образования Кубани, основав первый в ее истории вуз — Кубанский политехнический институт (ныне КубГТУ).

«Своими исследованиями Б.Л. Розинг опередил иностранную научную мысль, навсегда утвердил приоритет России в величайшем техническом завоевании человечества — открытии электронного телевидения. Первый в мире сеанс телевизионной передачи Борис Львович осуществил 9 мая 1911 года — эту дату можно по праву считать началом эры телевидения. В поисках новых путей решений задач ученый обращался к тем новейшим достижениям, которыми обогатилась физика на рубеже XIX-XX веков. Самоотдача и достижения Б.Л. Розинга должны быть увековечены», — отметил врио ректора КубГТУ профессор Михаил Барышев.

Коллектив Кубанского государственного технологического университета выступил с инициативой создания памятного знака. Идею поддержал глава г. Краснодара Евгений Первышов совместно с депутатами городской Думы. Об этом стало известно 22 апреля 2021 года на двенадцатом очередном заседании.

В одной руке Б.Л. Розинг держит лист с изображением схем, послуживших началом эры мирового электронного телевидения, а жест его левой руки символизирует дар своих открытий человечеству — таким известного ученого изобразили в своем эскизе победители конкурса КубГТУ на лучший проект памятного знака. Ими стали кубанские скульпторы Владимир Золотухин, Серафима Золотухина и архитектор Виктор Багин. Конкурс состоялся в вузе в начале августа под председательством Веры Галушко — председателя городской Думы Краснодара.

«Являясь выдающимся ученым, профессор Борис Львович Розинг был достаточно скромным человеком. Это мы и старались положить в основу памятного знака. Никаких лишних деталей», — рассказал В. Золотухин.

Напомним, в Кубанском государственном технологическом университете установлены памятная доска и стела в честь Б.Л. Розинга, в 2019 году открыт бюст Бориса Львовича в честь его 150-летия. Вклад ученого-физика в науку и образование ценят не только в вузе — его память увековечена и в краевом центре: в прошлом году в городе появилась улица имени Б.Л. Розинга.

Место: г. Краснодар, ул. Красная, 135.
Начало мероприятия: 10:00.

Приглашаем всех желающих принять участие в торжественной церемонии открытия памятного знака!

22 сентября 2021 в 16:28

Разделительный мягкий знак — правописание и правила

Мягкий знак— это буква, которая указывает на мягкость согласного звука, но сама звука не имеет. Например, в словах сосулька, восемь, банька мягкий знак на письме обозначает, что согласные звуки [л′], [м′], [н′] будут мягкими. 

Разделительный мягкий знак называется так потому, что отделяет при произношении согласный звук от следующего за ним гласного. Прочитайте вслух пары слов и обратите внимание, как произносятся выделенные слоги: 

  • нюанс — Нью-Йорк; 
  • тяпка — статья;
  • поле — колье
  • линия — ульи
  • Лёша — жильё

В этих парах слогов одинаковые согласные и одинаковые гласные, но наличие разделительного мягкого знака влияет на их произношение. Слоги без мягкого знака произносятся более слитно. Все дело в том, что гласные после разделительного мягкого знака обозначают по два звука вместо одного: 

  • [н′уанс] — [н′й′у й′орк]; 
  • [т′апка] — [стат′й′а]; 
  • [пол′э] — [кал′й′э]; 
  • [л′иний′а] — [ул′й′и]; 
  • [л′оша] — [жыл′й′о].

Разделительный мягкий знак встречается не перед любыми гласными, а только перед е, ё, ю, я, и. Также в виде исключения он может встречаться в заимствованных словах перед буквой о: бульон, почтальон. 

В какой части слова пишется разделительный мягкий знак

В слове разделительный мягкий знак может находиться в корне или после него, но никогда — после приставки. 

После приставки, которая оканчивается на согласный, и перед гласными е, ё, ю, я пишется разделительный твердый знак

Приведем примеры слов с разделительным мягким знаком в разных частях слова:

1. В корне слова:


2. Между корнем и суффиксом:


3. Между корнем и окончанием слова:


4. Между суффиксом и окончанием


Русский язык в онлайн-школе Skysmart — это увлекательные уроки на интерактивной платформе с примерами из современных текстов.

Слова-исключения с разделительным мягким знаком 

В исконно русских слова разделительный мягкий знак встречается только перед гласными е, ё, ю, я, и. Но в иноязычных словах (особенно французских) он может стоять перед буквой о:

Запоминаем!

При переносе разделительный мягкий знак остается на предыдущей строке: обезь-яна, курь-ёзный.

Как избежать ошибки в слове с разделительным мягким знаком

Чтобы писать слова с разделительным мягким знаком правильно, нужно уметь разбирать слово по составу и знать слова-исключения. Запомните простой порядок действий, чтобы определить, когда писать мягкий, а когда твердый разделительный знак. 

  1. Посмотрите, какая гласная стоит после согласной. Разделительный мягкий знак встречается только перед гласными е, ё, ю, я, и. А также перед о в заимствованных словах-исключениях. 

  2. Разберите слово по составу. Если приставка оканчивается на согласную букву, а за ней следует е, ё, ю, я — пишем твердый знак. В корне и после него — мягкий. 



Ł — Латинская заглавная буква «L» со штрихом, символ Лайткоина: U+0141 Lstrok

Значение символа

Латинская заглавная буква «L» со штрихом, символ Лайткоина. Расширенная латиница — A.

Символ «Латинская заглавная буква «L» со штрихом, символ Лайткоина» был утвержден как часть Юникода версии 1.1 в 1993 г.

Свойства

Версия 1.1
Блок Расширенная латиница — A
Тип парной зеркальной скобки (bidi) Нет
Композиционное исключение Нет
Изменение регистра 0142
Простое изменение регистра 0142

Похожие символы

Кодировка

Кодировка hex dec (bytes) dec binary
UTF-8 C5 81 197 129 50561 11000101 10000001
UTF-16BE 01 41 1 65 321 00000001 01000001
UTF-16LE 41 01 65 1 16641 01000001 00000001
UTF-32BE 00 00 01 41 0 0 1 65 321 00000000 00000000 00000001 01000001
UTF-32LE 41 01 00 00 65 1 0 0 1090584576 01000001 00000001 00000000 00000000

Знак «Сделано в России» в формате ЕПС

Графический элемент (знак) «Сделано в России» является произведением дизайна, охраняемым российским и международным законодательством.

Студия Артемия Лебедева, обладающая исключительными правами на графический элемент «Сделано в России», предоставляет любому лицу, скачавшему графический элемент с данной страницы сайта, право использовать его для любых целей на основании открытой лицензии в понимании статьи 1286.1 Гражданского кодекса РФ.

С момента получения доступа к скачиванию файла графического элемента «Сделано в России», пользователь (далее — Лицензиат) в полном объеме принимает условия настоящей неисключительной лицензии в форме публичной оферты, а именно:

— Лицензиат имеет право бесплатно использовать графический элемент для популяризации товаров, производимых на территории Российской Федерации, любым из следующих способов: воспроизводить графический элемент на любых материальных носителях, производить публичный показ графического элемента, импортировать товары с нанесенным на них графическим элементом, сообщать графический элемент в эфир, сообщать графический элемент по кабелю, доводить графический элемент до всеобщего сведения.

— При использовании графического элемента не допускается его переработка, в том числе изменение пропорций графического элемента, использование части графического элемента. Изменение цвета логотипа допускается.

— Лицензиат имеет право на использование графического элемента в течение всего срока охраны авторских прав на графический элемент (минимум ближайшие 70 лет).

— При использовании графического элемента Лицензиат вправе не указывать имя авторов графического элемента (анонимное использование).

— Настоящая оферта распространяется на территорию всего мира.

— Настоящая оферта не будет отозвана Студией Артемия Лебедева в течение всего срока охраны авторских прав на графический элемент.

— Включение графического элемента, а равно его частей и элементов в средства индивидуализации (товарные знаки, НМПТ, ГУ) или промышленные образцы (объект патентного права как это закреплено в международном законодательстве и Гражданском кодексе РФ) допускается исключительно на основании письма-согласия Студии Артемия Лебедева.

— Воспроизведение графического элемента либо иное его использование в деятельности Лицензиата предоставляет Студии Артемия Лебедева право на информационное освещение указанного факта с правом размещения информации о Лицензиате, его средствах индивидуализации и производимых товарах/работах/услугах, включая, но не ограничиваясь сайтами по адресу www.artlebedev.ru либо www.artlebedev.com. При указанном информационном освещении допускается использование изображений продукции и товаров с нанесенным на них графическим элементом.

L-SIGN (CD 209L) представляет собой специфичный для печени рецептор захвата вируса гепатита С

Abstract

Вирус гепатита С (HCV) поражает почти 3% населения мира и является основной причиной заболевания печени. Однако механизм, с помощью которого вирус нацеливается на печень для инфицирования, остается неизвестным, поскольку ни один из предполагаемых клеточных рецепторов ВГС не экспрессируется специфически в печени и не способен связывать гликопротеины оболочки ВГС. Интегрин, захватывающий межклеточную молекулу адгезии, специфичную для печени/лимфатических узлов (L-SIGN), представляет собой кальций-зависимый лектин, экспрессируемый на эндотелиальных клетках печени и лимфатических узлов.Специфичная для дендритных клеток молекула межклеточной адгезии-3, захватывающая нонинтегрин (DC-SIGN), гомологичная молекула, экспрессируемая на дендритных клетках, связывает ВИЧ и способствует инфицированию. Используя анализ связывания вируса, мы демонстрируем, что L-SIGN и DC-SIGN специфически связывают встречающийся в природе HCV, присутствующий в сыворотке инфицированных людей. Дальнейшие исследования показывают, что связывание опосредуется гликопротеином Е2 оболочки ВГС и блокируется специфическими ингибиторами, включая маннан, хелаторы кальция и антитела, к лектиновому домену молекул SIGN.Таким образом, L-SIGN представляет собой специфичный для печени рецептор ВГС, а L-SIGN и DC-SIGN могут играть важную роль в инфекции ВГС и иммунитете.

По оценкам, 170 миллионов человек во всем мире инфицированы вирусом гепатита С (ВГС), оболочечным РНК-содержащим вирусом, который часто вызывает хроническую инфекцию, приводящую к циррозу печени и гепатоцеллюлярной карциноме (1). Геном ВГС кодирует один полипротеин, который процессируется вирусными и клеточными протеазами в структурные и неструктурные белки (1).Структурные белки ВГС включают оболочечные гликопротеины Е1 и Е2, которые опосредуют связывание вируса и его проникновение в клетки-хозяева. E1 и E2 образуют гетеродимеры и подвергаются обширной посттрансляционной модификации с помощью N-связанных гликанов (1).

Фундаментальная загадка ВГС заключается в том, как вирус нацеливается на печень для заражения. Тканевой и клеточный тропизм вирусов часто регулируется одним или несколькими рецепторами-хозяевами, которые опосредуют различные функции, такие как прикрепление вируса, интернализация, слияние и перенос (2, 3).CD81 и рецептор липопротеинов низкой плотности (LDL-R) были идентифицированы как предполагаемые рецепторы присоединения и входа для HCV (4, 5). CD81 связывается с гликопротеином E2 оболочки HCV in vitro , но его широкое распространение в тканях не может объяснить тропизм HCV. Хотя паттерн экспрессии LDL-R согласуется с тропизмом HCV, прямое связывание гликопротеинов оболочки не было продемонстрировано. Скорее, LDL-R связывает и интернализует вирусоподобные частицы в комплексе с LDL. Ни CD81, ни LDL-R не опосредуют слияние и проникновение вируса.Недавно было показано, что широко экспрессируемый липопротеин-связывающий рецептор, человеческий очистительный рецептор класса B типа I, связывается с белком E2 in vitro , но связывание с вирусом не было продемонстрировано (6).

Неинтегрин, захватывающий молекулу межклеточной адгезии-3 (ICAM-3), захватывающую дендритные клетки (DC), (DC-SIGN; CD209) представляет собой интегральный мембранный белок типа II с молекулярной массой 44 кДа с коротким амино-концевым цитоплазматическим доменом и карбоксильной -концевой лектиновый домен С-типа (кальций-зависимый). Мембранно-проксимальная внеклеточная область гептадных повторов способствует олигомеризации DC-SIGN посредством нового спирального мотива.DC-SIGN экспрессируется на высоких уровнях на ДК миелоидного происхождения в тканях, где он взаимодействует с ICAM-3 на Т-клетках как часть иммунологического синапса активации Т-клеток (7). DC-SIGN функционирует как специфический фактор прикрепления для ВИЧ и других лентивирусов, а связывание опосредуется вирусным поверхностным гликопротеином gp120 (7). DC-SIGN не опосредует проникновение ВИЧ напрямую, а скорее усиливает инфицирование восприимчивых клеток-мишеней в транс (8). ДК могут связывать ВИЧ через DC-SIGN в месте воздействия на слизистую оболочку и переносить вирус к клеткам-мишеням внутри дренирующего лимфатического узла, тем самым способствуя установлению инфекции (8).DC-SIGN также связывает другие патогены, включая вирус Эбола, цитомегаловирус и Leishmania (9–11).

Интегрин, захватывающий ICAM-3, специфичный для печени/лимфатических узлов (L-SIGN) или связанный с DC-SIGN (CD209L), имеет 77% идентичность аминокислотной последовательности с DC-SIGN и имеет функциональное сходство в своих взаимодействиях с ICAM-3 и ВИЧ-1 (12, 13). L-SIGN обильно экспрессируется на эндотелиальных клетках печени и лимфатических узлов, но не на ДК (12, 13).

Здесь мы сообщаем, что частицы ВГС специфически связываются с L-SIGN и DC-SIGN и что это взаимодействие опосредовано вирусным гликопротеином HCV-E2, функциональным эквивалентом gp120 ВИЧ, который также содержит большое количество олигосахаридов с высоким содержанием маннозы.Таким образом, L-SIGN и DC-SIGN функционируют как рецепторы захвата HCV и могут играть решающую роль в вирусном патогенезе и тропизме тканей.

Методы

Антитела и рекомбинантные белки.

Конформационно-специфические mAb против E2 h41, h43, h54, h58, H50, H52, H53, H54, H60 и H61 были любезно предоставлены J. Dubuisson (Institut Pasteur de Lille, Лилль, Франция) (14, 15 ). mAb 4F6/2 (Austral Biological) реагирует с линейным эпитопом в E2. mAb к лектинсвязывающему домену DC-SIGN (mAb 507D) и L-SIGN (mAb 604L) или к обоим лектинам (mAb 612X) были получены от R&D Systems.mAb DC6 и DC28 (Программа исследований и эталонных реагентов AIDS, Rockville, MD) распознают повторяющиеся области DC-SIGN (DC6) или DC-SIGN и L-SIGN (DC28). Для установления фоновых уровней связывания использовали контрольный мышиный IgG, соответствующий изотипу (mIgG; Калтаг, Южный Сан-Франциско, Калифорния). Рекомбинантный белок Е2 (Accurate Chemicals) экспрессировался в секретируемой форме в клетках яичника китайского хомячка и включал аминокислоты 384–665 полипротеина ВГС. Рекомбинантные ICAM-2 и ICAM-3 использовали в качестве растворимых слитых белков Fc (R&D Systems).

Плазмиды и клеточные линии.

Плазмиды, связанные с pcDNA3-DC-SIGN и pcDNA3-DC-SIGN (программа исследований и эталонных реагентов по СПИДу), трансфицировали в клетки HeLa с использованием Effectene (Qiagen, Valencia, CA). Клетки обрабатывали стандартной средой для выращивания, включающей DMEM с 10% термоинактивированной FBS (HyClone), пенициллином/стрептомицином (Life Technologies, Карлсбад, Калифорния) и L-глютамином (Life Technologies) с добавлением 600 мкг/мл генетицина (Life Technologies). ). Через 2 недели выжившие колонии отбирали, размножали и подвергали скринингу на экспрессию с помощью проточной цитометрии.Высокоэкспрессоры клонировали и пассировали в ростовой среде с генетицином (600 мкг/мл).

Сортировщик флуоресцентно-активированных клеток (FACS) Анализ экспрессии DC-SIGN и L-SIGN.

Экспрессию DC-SIGN и L-SIGN на клеточной поверхности в трансфицированных клеточных линиях измеряли с помощью проточной цитометрии. Клетки собирали с помощью раствора для диссоциации клеток (Sigma) и проводили анализ FACS, как описано (16).

Анализ связывания HCV-E2.

Анализ представляет собой модификацию анализа, описанного для связывания gp120 (8).Вкратце, клетки HeLa удаляли из культуры, как описано ранее, и трижды промывали буфером для адгезии [AB; 20 мМ Tris⋅HCl (pH 8,0)/150 мМ NaCl/1 мМ CaCl 2 /2 мМ MgCl 2 /0,5% БСА]. Клетки (5 × 10 5 ) предварительно инкубировали с маннаном (20 мкг/мл; Sigma), АТ (20 мкг/мл), ЭДТА (5 мМ) или ЭГТА (5 мМ) в течение 10 мин при комнатной температуре. Флуоресцентные шарики, покрытые HCV-E2, готовили с указанным mAb против E2 и добавляли к клеткам (20 шариков на ячейку) на 30 минут при 37°C.Связывание определяли с помощью проточной цитометрии.

Анализ связывания вирусов.

Связывание вируса с клеткой. Клеточные линии

HeLa культивировали в течение ночи в среде DMEM, содержащей 10% FBS, в 96-луночном планшете в количестве 1 × 10 4 клеток на лунку. Клетки блокировали АБ, содержащим 10% термоинактивированной козьей сыворотки, в течение 20 мин при 37°С. Клетки однократно промывали АБ и добавляли маннан (20 мкг/мл) на 15 мин в АБ при комнатной температуре. После промывки сыворотки (10–20 мкл) от РНК ВГС + (вирус-положительные) или РНК ВГС-сыворотка (вирус-отрицательные) доноров (все ВИЧ-серонегативные) разводили в АВ и оставляли для связывания с клетками в течение 1 ч при 37°С при осторожном встряхивании каждые 15 мин, после чего клетки пятикратно промывали АБ.

Экстракция РНК.

Вирусную РНК экстрагировали из клеток с использованием набора QIAmp Viral RNA Mini Spin (Qiagen) с модификациями. Вкратце, РНК экстрагировали лизисным буфером с последующим связыванием со спин-колонками, а ДНК удаляли обработкой ДНКазой, не содержащей РНКазы (Qiagen). РНК промывали и элюировали буфером для элюции.

Саузерн-блот.

РНК ВГС амплифицировали с помощью ОТ-ПЦР, как описано (17) с модификациями. Праймер KY78 (5′-CTCGCAAGCACCCTATCAGGCAGT-3′, 0,5 нмоль, нуклеотиды 276–299) комбинировали с 0.5 мкл выделенной РНК в конечном объеме 6 мкл предварительно нагревают с последующим добавлением буфера для синтеза кДНК, 10 мМ ДТТ, 5 мМ dNTP и 7,5 единиц ThermoScript (Invitrogen), инкубируют при 58°С в течение 50 мин, затем при 85°С. С в течение 5 мин до охлаждения до 4°С. Из этой RT-реакции 5 мкл использовали в качестве матрицы для ПЦР в 50-мкл реакции, содержащей 1× буфер High-Fidelity PCR, 2 мМ MgSO 4 , 2 мМ dNTP, 50 пмоль праймеров KY80 (5′-GCAGAAAGCGTCTAGCCATGGCGT -3′; нуклеотиды 56–79) и KY78, и 1,25 единицы высокоточной ДНК-полимеразы Platinum Taq (Invitrogen).Продукт амплификации разделяли на 1% агарозном геле и наносили на нитроцеллюлозную мембрану (Bio-Rad).

Для выявления блот инкубировали в течение 4 ч при 63°C в предгибридизационном растворе {5× Denhardt’s [0,2% (вес/объем) БСА, не содержащего жирных кислот (JRH Biosciences, Lenexa, KS)/0,2% (вес. /об.) поливинилпирролидонполивинил (Sigma)/0,2% (мас./об.) фиколла-400 (Sigma)]; 6× SSC (0,9 М NaCl/90 мМ цитрата натрия, рН 7,4), 0,5% (вес/объем) SDS (Promega) и 0,1 мг/мл ДНК спермы сельди (Invitrogen)}.После инкубации в предгибридизационный раствор добавляли 1 пмоль/мл праймера RJD-6 (5′-биотин-GGAGAGCCATAGTGGTCTGCGGAA C-3′; нуклеотиды 120–144) или KY88 (5′-биотин-GTTGGGTCGCGAAAGGCCTTGTGGT-3′; нуклеотиды 251–275). и инкубировали в течение ночи при 63°С. После обширной промывки в условиях высокой строгости блот инкубировали со стрептавидин-пероксидазой хрена (Pierce), промывали и проявляли с использованием Western Lightening Plus (NEN/Perkin-Elmer). Примером сигнала РНК HCV + является специфическая полоса из 243 п.н.

ПЦР в реальном времени.

Анализ HCV Quantasure Plus использовался в LabCorp (Research Triangle Park, NC) и показал свою чувствительность, специфичность к HCV и линейный динамический диапазон 10–100 000 000 единиц/мл в сравнительных исследованиях с 228 Roche COBAS Amplicor. проба. § Вкратце, аликвоту 4 мкл экстрагированной РНК добавляли к реакционной смеси для одностадийной ОТ-ПЦР, содержащей смысловые и антисмысловые праймеры, специфичные для ВГС, и зонд TaqMan (запатентованные последовательности; LabCorp).Цикл, при котором график амплификации пересекал пороговое значение, определяли как пороговый цикл (C T ) и предсказывали количество копий РНК HCV в образце. Стандартную кривую рассчитывали для количественного определения с использованием серийных 10-кратных разведений эталонного образца ВГС (РНК + ).

Результаты

Привязка HCV-E2 к L-SIGN и DC-SIGN.

Сначала мы создали клетки HeLa, которые стабильно экспрессируют L-SIGN и DC-SIGN на клеточной поверхности, как определено с помощью проточной цитометрии с использованием панели mAb (рис.). Поскольку эти mAb распознают конформационные эпитопы (18, 19), их связывание указывает на то, что L-SIGN и DC-SIGN экспрессируются в нативной форме на трансфектантах HeLa.

Экспрессия L-SIGN и DC-SIGN на клеточной поверхности в стабильно трансфицированных клеточных линиях HeLa. Проточную цитометрию выполняли с использованием перекрестно-реактивного mAb 612X (линия), которое связывается с обеими линиями трансфицированных клеток, L-SIGN-специфического mAb 614L (пунктирная линия) и DC-SIGN-специфического mAb 507D (пунктирная линия). которые связываются только с трансфектантами HeLa-L-SIGN или HeLa-DC-SIGN соответственно.Связывание соответствующего изотипа контрольного mAb показано заполненной гистограммой, и показан один репрезентативный результат из трех независимых анализов.

Для исследования связывания HCV-E2 с L-SIGN и DC-SIGN мы использовали проточный цитометрический анализ адгезии, аналогичный описанному для gp120 ВИЧ-1 (8). Очищенный белок HCV-E2 захватывали на флуоресцентных гранулах с использованием панели анти-E2 и контрольных mAb. Покрытые Е2 шарики эффективно связывались с трансфектантами HeLa, но не с исходными HeLa (рис.). Фоновые уровни связывания наблюдались для Е2 и mAb соответствующего изотипа с нерелевантной специфичностью, а также для mAb против E2 в отсутствие E2 (данные не показаны). Уровни связывания зависели от mAb против E2, используемого для покрытия шариков (рис. ), что может отражать различия в эффективности захвата E2 mAb или в их маскировании/презентации эпитопов, распознаваемых L-SIGN и DC-SIGN. . L-SIGN и DC-SIGN показали сходные модели реактивности для различных комбинаций E2-mAb.

Трансфектанты L-SIGN и DC-SIGN связывают HCV-E2.Клетки L-SIGN ( сверху ), DC-SIGN ( посередине ) и контрольные клетки HeLa ( снизу ) инкубировали с гранулами, покрытыми HCV-E2, приготовленными с использованием панели моноклональных антител против E2. Адгезию количественно определяли с помощью флуоресцентно-активированного клеточного сортировщика в присутствии адгезионного буфера (закрашенные столбцы) и блокировали маннаном (незакрашенные столбцы). Различные mAb против E2 указаны на оси ×, а ось × представляет процент клеток, которые имеют связанные гранулы.Показан один репрезентативный эксперимент из трех.

Связывание Е2 с обеими молекулами SIGN эффективно ингибировалось маннаном (рис. 1), который связывается с лектиновым доменом L-SIGN и DC-SIGN. Связывание также отменяется ЭДТА и ЭГТА (данные не показаны), которые являются хелаторами для ионов кальция, необходимых для структурной целостности и свойств связывания углеводов лектинов С-типа.

Мы также протестировали группу моноклональных антител против L-SIGN и против DC-SIGN на предмет их влияния на связывание Е2 (рис.). mAb к лектиновому домену молекул SIGN опосредовали аналогичные уровни ингибирования по сравнению с маннаном, тогда как mAb к проксимальной к мембране области гептадных повторов были менее эффективны. Паттерны ингибирования связывания E2 этими mAb в значительной степени аналогичны наблюдаемым для ингибирования связывания gp120 ВИЧ (16).

Влияние моноклональных антител или растворимых ICAM на адгезию HCV-E2 к L-SIGN или DC-SIGN. Клетки HeLa, экспрессирующие L-SIGN (закрашенные столбцы) или DC-SIGN (незаштрихованные столбцы), инкубировали с отдельными mAb, которые связывают повторяющуюся область (DC6 и DC28) или лектин-связывающий домен (612X, 604L и 507D), или с растворимым ICAM. -Fc конъюгаты, как описано.Связывание гранул Е2 количественно оценивали по флуоресценции с помощью аппарата FACScan, и результаты нормализовали по уровням изотипического контроля (mIgG). Показан один репрезентативный набор данных из трех экспериментов.

Растворимые слитые белки ICAM-2 и ICAM-3 Fc мало влияли на связывание Е2 с любой молекулой SIGN (рис. ). Исследования показали различия в распознавании gp120 и ICAM-3 с помощью DC-SIGN (19, 20), и аналогичная ситуация может быть применима к HCV. Точно так же mAb против E2 не ингибировали связывание шариков E2 ни с одной из молекул SIGN (данные не показаны).Это открытие согласуется с распознаванием лектинами гликанов, распределенных по поверхности E2, и сопутствующими трудностями блокирования таких взаимодействий с моноспецифическими агентами. Сходным образом, связывание gp120 с DC-SIGN не блокируется ни mAb против gp120, ни мутацией отдельных N-связанных сайтов гликозилирования на gp120 (21).

Вирус ВГС Связывание с L-SIGN и DC-SIGN.

Затем мы сравнили молекулы SIGN по их способности связывать вирионы ВГС. В отсутствие метода культивирования HCV in vitro мы разработали тест для измерения взаимодействия молекул SIGN с вирионами HCV, присутствующими в сыворотке инфицированных людей.Ранее не сообщалось о связывании встречающихся в природе вирусов ни с L-SIGN, ни с DC-SIGN.

В нашем анализе связывания вируса сыворотки, положительные или отрицательные по РНК ВГС, объединяли в течение 1 часа с клетками HeLa, экспрессирующими L-SIGN, DC-SIGN или не экспрессирующими рецептор. После удаления несвязавшегося вируса и экстракции РНК геномы ВГС выявляли с помощью ПЦР в реальном времени (TaqMan) или ОТ-ПЦР с последующим качественным саузерн-блоттингом.

Трансфектанты L-SIGN специфически связывались с тремя из трех HCV-положительных сывороток, что определялось анализом TaqMan, тогда как DC-SIGN опосредовало специфическое связывание с одной из трех сывороток.Уровни связывания вируса с L-SIGN в 4-7 раз превышали фоновые уровни, наблюдаемые для родительского HeLa (фиг. A и B ). Связывание HCV с L-SIGN прекращалось на >90% после обработки маннаном (фиг. C и D ). В целом, наблюдалась хорошая согласованность результатов, полученных в тестах гибридизации и TaqMan, хотя последний был более количественным и чувствительным для обнаружения низких уровней связывания (рис. 1).

L-SIGN и DC-SIGN связываются с вирионами ВГС от инфицированных пациентов.Трансфектанты HeLa или контрольные клетки инкубировали с сыворотками трех пациентов с РНК HCV + . Титры РНК ВГС в сыворотке (копий на мл) отсутствовали. 1 850 000; нет. 2 242 000; и нет. 3, 161 000 по анализу COBAS MONITOR (Roche Molecular Systems). После промывки клетки лизировали и выделяли РНК. РНК ВГС измеряли с помощью качественной ОТ-ПЦР и Саузерн-блоттинга ( A ) или количественного анализа ПЦР в реальном времени ( B ). Данные представлены как кратное увеличение связывания контрольных клеток HeLa для каждой совпадающей сыворотки, а абсолютные значения (единицы/мл) показаны для каждого образца.Связывание с L-SIGN ингибировалось маннаном. Клетки предварительно инкубировали с маннаном перед добавлением сыворотки 2, как описано ранее. Связанную РНК HCV экстрагировали и анализировали с помощью Саузерн-блоттинга ( C ) или количественной ПЦР в реальном времени ( D ).

Во время естественной инфекции титры ВГС в сыворотке демонстрируют значительные различия между пациентами (1). Для дальнейшего исследования широты и надежности связывания ВГС с L-SIGN и DC-SIGN мы повторили анализ, используя сыворотку пациентов с более высокой вирусной нагрузкой.Для них как L-, так и DC-SIGN опосредовали специфическое связывание, ингибирующее маннан, для трех из трех сывороток (рис. 1), причем сыворотки с самым высоким титром демонстрируют 129- и 58-кратное усиление связывания с L-SIGN и DC-SIGN. ячеек соответственно. Для HCV-отрицательных сывороток наблюдались только фоновые сигналы. В общей сложности L-SIGN специфически связывал HCV с шестью из шести донорских сывороток независимо от вирусной нагрузки, тогда как DC-SIGN опосредовал связывание в четырех из шести случаев со смещением в сторону сывороток с высоким титром.

Ингибирование связывания вириона ВГС с L-SIGN и DC-SIGN маннаном.Клетки инкубировали с сывороткой от трех пациентов с РНК HCV+, как описано на фиг. Титры РНК ВГС в сыворотке (копий на мл) отсутствовали. 4, 2,15 миллиона; нет. 5, 1,86 миллиона; и нет. 6, 1,16 млн. Каждую сыворотку инкубировали с клетками, предварительно обработанными буфером для адгезии (закрашенные столбцы) или маннаном (незакрашенные столбцы), и связанную РНК анализировали с помощью ПЦР в реальном времени, как описано. На графике показано кратное увеличение связывания клеток HeLa, а абсолютные уровни (единицы/мл) показаны (, вставка ).

Кроме того, mAb к лектиновым доменам молекул SIGN ингибировали связывание вируса с L-SIGN и DC-SIGN на 78% и 91% соответственно. Напротив, mAb к E2 не влияли на связывание вируса (данные не показаны). Эффекты маннана, mAb против SIGN и mAb против E2 на связывание нативного вириона с SIGN согласуются с эффектами, наблюдаемыми для очищенного белка E2, и, таким образом, подтверждают мнение о том, что E2 играет важную роль в опосредовании связывания ВГС с молекулами SIGN. .

Обсуждение

Наши результаты показывают, что ВГС взаимодействует специфически с L-SIGN и DC-SIGN, и что это взаимодействие, по крайней мере, частично опосредовано E2.Связывание блокировалось соответствующими ингибиторами, включая маннан, хелаторы кальция и моноклональные антитела к L-SIGN и DC-SIGN. Интересно, что L-SIGN был несколько более эффективным, чем DC-SIGN, при захвате вирионов при низкой вирусной нагрузке.

Взаимодействия HCV с L-SIGN и DC-SIGN в печени и лимфатических узлах могут иметь важные последствия для жизненного цикла вируса. L-SIGN экспрессируется на синусоидальных эндотелиальных клетках печени (LSEC), которые образуют сосуды, отделяющие печеночный кровоток от гепатоцитов.LSEC обеспечивают диффузионный барьер для вирусов, но также опосредуют трансцитоз в процессе, управляемом рецептором (22). Помимо регуляции транспорта, LSEC представляют собой немиелоидные профессиональные антигенпрезентирующие клетки, которые могут вносить вклад в печеночный иммунный надзор в ассоциации с резидентными макрофагами, которые прикрепляются к LSEC (23). Хотя LSEC и DC используют сходные механизмы перекрестной презентации антигенов CD8 + Т-лимфоцитам, презентация LSEC приводит скорее к толерантности, чем к иммунитету (24).

Исследования с другим гепатотропным вирусом, вирусом гепатита В (HBV), показывают, что надзорные функции LSEC могут быть нарушены патогенами. Рецептор-опосредованный трансцитоз HBV приводит к эффективной доставке вируса из кровотока в популяцию клеток-мишеней (23, 25), но идентичность трансцитозирующего рецептора не установлена. Если этот процесс происходит в условиях естественной инфекции, он может способствовать установлению как начальной, так и хронической инфекции.По аналогии со способностью DC-SIGN способствовать инфицированию ВИЧ-1 у трансгендеров, возможно также, что L-SIGN способствует инфицированию соседних гепатоцитов после трансцитоза вируса.

Паттерны связывания и ингибирования ВГС предполагают, что взаимодействие опосредовано гликанами с высоким содержанием маннозы на ВГС и Е2. То есть связывание с лектиновым доменом молекул SIGN конкурентно ингибировалось маннаном и mAb. E1 и другие молекулы на нативной оболочке вириона могут способствовать связыванию, но отсутствие специфических реагентов не позволило провести анализ в этом исследовании.Связывание также было отменено хелаторами ионов кальция, которые необходимы для этих лектинов С-типа. Однако связывание не ингибировалось mAb с другими областями молекул SIGN или mAb против E2, по крайней мере, при индивидуальном использовании. Подобные модели ингибирования наблюдались для gp120 ВИЧ-1, связывание которого с DC-SIGN, как недавно было показано, опосредовано сахарами с высоким содержанием маннозы (21). Существуют потенциальные конформационные различия между очищенными гликопротеинами (E2 или gp120) и олигомерами, связанными с вирионами, которые следует учитывать; однако зависимость связывания ВИЧ и ВГС с L-SIGN и DC-SIGN от гликана может привести к тому, что взаимодействия будут менее зависеть от конформации белка.

Хотя ВГС и ВИЧ-1 взаимодействуют с молекулами SIGN качественно подобным образом, важные различия в жизненных циклах вирусов могут незначительно влиять на эти взаимодействия. В то время как белки оболочки HCV и почкующийся вирус, как правило, считаются локализованными в компартментах ER и/или цис-Гольджи (26), частицы ВИЧ-1 собираются и отпочковываются на клеточной поверхности (27). Таким образом, в отличие от gp120 ВИЧ-1, вирион-ассоциированный Е2 вряд ли сталкивается с полным путем процессинга N-связанного белкового гликозилирования, который начинается с переноса предварительно синтезированного Glu-3Man 9 GlcNAc 2 из долихилидфосфата в канонический N- связанные сайты гликозилирования вновь синтезированного пептида.Концевые остатки глюкозы удаляются в эндоплазматическом ретикулуме перед переносом белка в цис-Гольджи, где остатки с высоким содержанием маннозы обрезаются α-маннозидазами. Дальнейшее удаление остатков маннозы и добавление сложных гликанов происходит в медиальном и транс-Гольджи (28). Конечным результатом будет снижение процента структур с высоким содержанием маннозы на ВИЧ-1 по сравнению с ВГС. Этот дифференциальный процессинг гликанов вирусной оболочки может влиять на их взаимодействие с L-SIGN и/или DC-SIGN, чье избирательное распознавание модельных олигосахаридов было сопоставлено со специфическими аминокислотными различиями в их лектиновых доменах (29, 30).

Важно определить молекулярные события, происходящие после связывания ВГС с L-SIGN и DC-SIGN. Хотя модельные лиганды направляются к поздним эндосомам/лизосомам для деградации после связывания с DC-SIGN (31), ВИЧ, связанный с DC-SIGN, сохраняет инфекционность в течение длительных периодов времени (8). Примечательно, что интернализация имеет решающее значение для повышения инфекционности, тогда как простого привязывания вируса недостаточно (32). Способность DC-SIGN сопровождать эндоцитированный вирус, проходящий через лизосомальный путь, может быть центральной для его функции в качестве захватного рецептора для ВИЧ, и аналогичные принципы могут применяться к HCV.Ясно, что очищающий рецептор, который нацеливается на вирус для деградации, будет способствовать элиминации, а не инфицированию. Такие соображения могут привести к тому, что рецепторы со сходной специфичностью связывания будут оказывать различные эффекты на инфекционность вируса.

Нарушения иммунной системы, такие как криоглобулинемия, являются главными внепеченочными осложнениями HCV-инфекции (33), и считается, что взаимодействие Е2 с CD81 на В-клетках является способствующим фактором (34). Транскрипты ВГС обнаруживались на низких уровнях в ДК и других лимфоидных клетках (35, 36), но они, по-видимому, не представляют собой значительных резервуаров ВГС.Однако взаимодействие L-SIGN и DC-SIGN может способствовать нарушению регуляции иммунитета, включая нарушение функции DC, наблюдаемое при хронической инфекции HCV (37–39). Мигрирующие ДК также могут способствовать переносу ВГС в печень и другие органы, а связывание вируса с DC-SIGN или L-SIGN может модулировать иммунитет к ВГС, способствуя поддержанию хронической инфекции.

События и рецепторы, участвующие в проникновении ВГС, остаются неясными, а прогресс сдерживается отсутствием надежных средств культивирования ВГС in vitro .Хотя DC-SIGN не является необходимым рецептором для слияния с ВИЧ, экспрессия DC-SIGN увеличивает восприимчивость клеток к ВИЧ за счет снижения порогового уровня экспрессии рецептора слияния, тем самым делая клетки, в противном случае недопустимые, восприимчивыми к ВИЧ-инфекции (40). Точно так же DC-SIGN и L-SIGN придают пермиссивность клеткам, которые в остальном невосприимчивы к заражению псевдовирусами Эбола и цитомегаловируса (9, 11).

Маловероятно, что L-SIGN является единственным фактором, определяющим тропность ВГС к печени, поскольку рецептор также экспрессируется в лимфатических узлах и не экспрессируется на гепатоцитах.Таким образом, дополнительные факторы, специфичные для печени, вероятно, играют критическую роль в инфицировании ВГС. Альтернативно, HCV, связанный с L-SIGN, может подвергаться дифференцированному процессингу в печени и лимфатических узлах. Коэкспрессия L-SIGN и DC-SIGN в доношенной плаценте также может способствовать вертикальной передаче ВГС (1).

ВГС является одним из растущего числа человеческих патогенов, взаимодействующих с L-SIGN и/или DC-SIGN. Однако специфичность этих взаимодействий подчеркивается наблюдением, что некоторые вирусы имеют оболочки, которые гликозилированы, но при этом проявляют небольшую авидность или отсутствие авидности к DC-SIGN и L-SIGN (11, 21).Выводы в этом отчете показывают, что HCV кооптировал пути гликозилирования хозяина таким образом, что это способствует связыванию с L-SIGN и DC-SIGN.

В заключение мы продемонстрировали, что ВГС специфически взаимодействует с L-SIGN и DC-SIGN, и это взаимодействие опосредовано, по крайней мере частично, гликопротеином оболочки вируса E2. Таким образом, L-SIGN представляет собой специфичный для печени рецептор, который жадно связывается с оболочкой HCV. Эти результаты подтверждают гипотезу о том, что взаимодействие ВГС с этими молекулами в печени и лимфатических узлах может иметь важные последствия для инфекции ВГС и иммунитета.

Гомозиготный L-SIGN (CLEC4M) играет защитную роль при коронавирусной инфекции SARS

Набор субъектов для исследования генетической ассоциации случай-контроль.

От субъектов, сдающих кровь, было получено подписанное информированное согласие с предварительным одобрением соответствующих институциональных наблюдательных советов. Пациенты с атипичной пневмонией были набраны из четырех крупных больниц, которые лечили пациентов с атипичной пневмонией в Гонконге во время вспышки 2003 года: а именно, больницы королевы Марии, больницы Памелы Юде Незерсол, больницы принцессы Маргарет и объединенной христианской больницы.Все 285 пациентов с атипичной пневмонией, отобранных для исследования, не были связаны между собой и были подтверждены серологическим исследованием и/или количественным анализом ОТ-ПЦР. Из них 67 были медицинскими работниками, а остальные 218 были представителями сообщества. Контрольная группа включала (i) случайную контрольную группу, состоящую из 380 здоровых доноров крови, случайно набранных перед вспышкой службой переливания крови Красного Креста Гонконга; (ii) 290 пациентов, не затронутых атипичной пневмонией, посещающих общие амбулаторные клиники и набранных по крайней мере через два месяца после вспышки; и (iii) 172 медицинских работника, которые работали в палатах с атипичной пневмонией, но остались здоровыми и были подтверждены как серонегативные на атипичную пневмонию.Серологию на SARS проводили, как описано ранее 35 . Геномную ДНК выделяли из цельной крови.

CLEC4M Тандемные повторы из 69 нуклеотидов в экзоне 4.

Поскольку последовательности генов CD209 и CLEC4M очень похожи, особое внимание было уделено разработке праймеров, которые специфически амплифицируют экзон 4 из L-SIGN -Ex4-F и L-SIGN -Ex4-R (дополнительная таблица 2 онлайн). ПЦР проводили с использованием ДНК-полимеразы High Fidelity Platinum Taq (Invitrogen), которая способствовала амплификации длинных и коротких аллелей с одинаковой эффективностью.20 мкл ПЦР состояла из 1× ПЦР-буфера, 1,5 мМ MgCl 2 , 200 мкМ dNTP, 150 нМ каждого праймера, 1 единицы (U) ДНК-полимеразы High Fidelity Platinum Taq и 50 нг геномной ДНК. Реакцию проводили при 95 °С в течение 5 мин, 40 циклов при 95 °С в течение 20 с, 59 °С в течение 30 с и 72 °С в течение 60 с и окончательное удлинение при 72 °С в течение 5 мин. Амплифицированные продукты разделяли электрофорезом в 2% агарозном геле на широкой дорожке (лунки шириной 6 мм, в каждую загружено 20 мкл продуктов ПЦР) для обеспечения хорошей визуализации аллелей.Генотип каждого случая проверяли (вслепую) тремя отдельными лицами. Некоторые репрезентативные случаи были подтверждены анализом блотов ДНК, а также прямым секвенированием. Генотипирование также было проведено у 58 неродственных европейцев из эталонных семей CEPH.

Статистический анализ.

Генетическая связь для сравнения генотипов гетерозигот и гомозигот оценивалась с помощью двустороннего критерия χ 2 с использованием программного обеспечения SPSS (версия 11.0) и отношения шансов и 95% c.я. использовались для измерения силы ассоциации в исследовании ассоциации генетического риска. Критерий Мантеля-Генцеля для стратифицированного анализа также проводили с использованием SPSS. Сравнение частот аллелей или частот генотипов проводили с использованием программы CLUMP. Точный критерий Харди-Вайнберга был рассчитан методом цепи Маркова, принимая P <0,05 в качестве порога для оценки значимости. (параметры цепи Маркова: количество разучивания = 1000, количество пакетов = 100, количество итераций в пакете = 1000).Для всех исследований in vitro статистическую значимость рассчитывали с использованием двустороннего критерия Стьюдента t .

Получение нуклеокапсидного антитела против SARS-CoV. Мышей

BALB/c иммунизировали внутрибрюшинно 0,1 мл убитого нагреванием коронавируса SARS HK39849 (10 7 TCID50 мл -1 ). Инъекции аналогичных доз повторялись еженедельно в течение 2 месяцев. Через четыре дня после последней ревакцинации 10 8 клеток селезенки иммунизированной мыши сливали с 10 7 клеток миеломы NSI с полиэтиленгликолем (ПЭГ, M.W. 4000, BDH, Poole) в качестве плавящего агента. Гибридомы подвергали скринингу на продукцию антител против коронавируса SARS (HK39849) с помощью ELISA. Те, которые продуцировали специфические антитела, дважды клонировали путем предельного разведения. Затем очищенные гибридомы инъецировали внутрибрюшинно мышам, обработанным минеральным маслом, для получения асцитической жидкости. Моноклональные антитела обогащали из асцитической жидкости путем преципитации 50% сульфатом аммония. Антитела специфически реагировали с белком нуклеокапсида с помощью белкового блоттинга (данные не показаны).

Иммуногистохимия для нуклеокапсидного антигена SARS,

гибридизация in situ для L-SIGN и FISH для ACE2.

Иммуногистохимию проводили на парафиновых срезах размером 5 мкм фиксированных формалином образцов тканей легких восьми взрослых, перенесших резекцию легкого (лобэктомию) по поводу рака легкого. Части здоровых тканей легкого были вырезаны с одобрения Институционального наблюдательного совета Университета Гонконга. Срезы тканей легкого и тонкой кишки, взятые после вскрытия у пяти пациентов, смертельно инфицированных атипичной пневмонией, также были извлечены для исследования.Образцы сначала депарафинизировали и регидратировали. После микроволнового нагрева мышиные антитела против нуклеокапсида SARS-CoV (1:2000) применяли в качестве первичных антител при 4 °C в течение ночи, а затем срезы инкубировали с полимером универсальной иммунощелочной фосфатазы против мыши (Nichirei Corporation, готово к использованию). в течение 2 ч при комнатной температуре. Впоследствии цвет был разработан с помощью системы красных субстратов (Sigma). FISH и гибридизацию in situ проводили, как описано ранее 36 , на тех же срезах с использованием смеси зонда кРНК ACE2, меченного FITC, который соответствует полноразмерной кДНК ACE2, и зонда кРНК L-SIGN, меченного дигоксигенином, который соответствует нуклеотидам 109–168.Затем срезы заливали средой для флуоресценции с DAPI (Vector Laboratories). Электронные изображения иммуногистохимического окрашивания и флуоресценции FISH, визуализированные под флуоресцентным микроскопом (Nikon eclipse E600), сохраняли на ПК. Затем срезы дополнительно инкубировали с Fab-фрагментом щелочной фосфатазы овец против дигоксигенина (1:200, Roche) в течение 2 ч при комнатной температуре. Наконец, цвет для гибридизации L-SIGN in situ был разработан с использованием субстратной системы NBT/BCIP (Roche), а срезы были смонтированы в водной монтажной среде (DakoCytomation).Те же поля, что и при иммуногистохимии и флуоресцентных изображениях FISH, впоследствии были выбраны и визуализированы под тем же микроскопом, а также сохранены в виде электронных изображений для сравнения и анализа колокализации. Антисмысловой и смысловой FITC-меченый зонд кРНК ACE2 или меченный дигоксигенином L-SIGN-специфический зонд кРНК получали с помощью набора для мечения нерадиоактивной РНК с флуоресцеин-12-UTP или дигоксигенин-11-UTP, соответственно (Roche), в соответствии с инструкцией производителя. инструкции.

Конструирование вектора экспрессии N5 L-SIGN.

Весь экзон 4 (фрагмент B), содержащий пять тандемных повторов, был амплифицирован из геномной ДНК носителя аллеля N5 с использованием экзона 4-F и экзона 4-R (дополнительная таблица 2). 5′-конец (от экзона 1 до частичного экзона 4 (фрагмент A)) и 3′-конец (от частичного экзона 4 до стоп-кодона в экзоне 7 (фрагмент C)) транскрипта гена CLEC4M амплифицировали из pcDNA3-L. -SIGN (получен из Программы исследований и эталонных реагентов по СПИДу Национального института здравоохранения США (NIH)) с использованием двух наборов праймеров: exon1/BamHI-F и exon4/partial-R; и экзон4/частичный-F и экзон7/стоп-R (дополнительная таблица 2).Фрагменты A и B, которые перекрываются на 62 п.н. последовательности (5′-конец экзона 4), смешивали и удлиняли в реакции первых десяти термоциклов с использованием системы ПЦР Expand High Fidelity Plus (Roche Diagnostics) без праймеров. После начального удлинения в реакцию добавляли экзон1/BamHI-F и экзон4-R для получения полной длины фрагмента от экзона 1 до экзона 4 в дополнительных 25 тепловых циклах. Затем амплифицированный продукт (фрагмент A/B) подвергали гель-очистке. Фрагменты A/B и C, содержащие перекрывающиеся последовательности длиной 38 п.н. (3′-конец экзона 4), смешивали и выполняли аналогичную процедуру, используя экзон1/BamHI-F и экзон7/stop-R для получения полной длины N5 L. -SIGN, который впоследствии был клонирован в вектор pGEM-T Easy (Promega).Плазмиду экстрагировали и подвергали секвенированию ДНК, чтобы убедиться, что в последовательность N5 L-SIGN не внесена ошибка. Затем N5 L-SIGN в pGEM-T субклонировали в Bam HI- и Not I-расщепленный вектор pcDNA3.1/Hygro(+) (Invitrogen). Последовательность и рамка считывания N5 L-SIGN в векторе впоследствии подтверждались секвенированием ДНК.

Плазмиды и клеточные линии.

Плазмида pcDNA3-L-SIGN, экспрессирующая L-SIGN с семью тандемными повторами (N7) в экзоне 4, была получена из Программы исследований СПИДа, NIH.L-SIGN N5 клонировали, как описано выше. Клетки CHO и Vero E6 поддерживали в среде DMEM с добавлением 10% FBS, 10 единиц мл -1 пенициллина и 10 мкг мл -1 стрептомицина, если не указано иное. Плазмиду N7 L-SIGN, плазмиду N5 L-SIGN или смесь плазмид N7+N5 (в соотношении 1:1) трансфицировали в клетки СНО или клетки Vero E6 с использованием липофектамина 2000 (Invitrogen) в соответствии с инструкцией производителя. Экспрессию L-SIGN подтверждали иммуноокрашиванием специфическими антителами к L-SIGN (клон 120604, Программа исследований СПИДа, NIH) через 48 ч после трансфекции, и клетки сразу же использовали для экспериментов.Стабильные клоны клеток СНО, экспрессирующие варианты L-SIGN N5 или N7/5, получали путем лимитирующего разведения клеток СНО, трансфицированных L-SIGN, и отбирали с использованием 1 мг мл -1 G418 и/или 0,5 мг мл -1 гигромицина. Б на 2-3 недели. Гомозиготность и гетерозиготность L-SIGN в стабильных клонах подтверждали с помощью ОТ-ПЦР путем амплификации домена шеи L-SIGN. Стабильные клоны содержали в полных средах, содержащих селекционные антибиотики.

ОТ-ПЦР для количественного определения ORF-1b и числа копий нуклеокапсида.

Тотальную РНК из культивируемых клеток экстрагировали с помощью набора RNeasy RNA Mini Kit (Qiagen), а вирусную РНК из культурального супернатанта экстрагировали отдельно с помощью набора QIAmp Viral RNA Kit (Qiagen). РНК ресуспендировали в 30 мкл воды, свободной от РНКазы. Общее количество копий вирусной РНК определяли с помощью количественной ОТ-ПЦР, амплифицирующей последовательность ORF-1b SARS-CoV, как описано ранее 24 . ПЦР для последовательности нуклеокапсида (N) SARS-CoV проводили с использованием 250 нмоль л -1 прямого и обратного праймера (дополнительная таблица 2) при следующих условиях: 5 мин при 95 °C, затем 50 циклов при 95 °C. в течение 15 с, 57 °С в течение 15 с и 72 °С в течение 15 с.Реакции проводили с использованием детектора последовательностей ABI PRISM 7700 (Applied Biosystems). Сигналы флуоресценции анализировали с использованием программного обеспечения SDS 1.9.1 (Applied Biosystems) и рассчитывали общее число копий относительно стандарта с известным количеством плазмиды, содержащей соответствующий ген.

Анализ связывания SARS-CoV с трансфектантами L-SIGN и лечение ингибиторами протеасом.

Трансфектанты N7, N5 и N7/5 L-SIGN и ложно трансфицированные клетки СНО подвергали импульсной обработке 1 БОЕ/клетку SARS-CoV в бессывороточной среде DMEM на 2-й день после трансфекции.После 1 ч инкубации при 4°С клетки промывали для удаления несвязавшихся вирусов и немедленно лизировали для получения РНК для анализа в момент времени 1 ч. Некоторые клетки дополнительно инкубировали в трех повторностях по 2,5 × 10 4 на лунку в 96-луночном планшете в полной среде в течение 24 ч и 48 ч при 37 °C для определения вирусной ORF-1b или последовательности нуклеокапсида, как описано в индивидуальные эксперименты. В экспериментах с использованием ингибиторов протеасом клетки N7 L-SIGN/CHO или ложно-трансфицированные клетки CHO подвергали импульсной обработке 1 БОЕ/клетку SARS-CoV в бессывороточной среде DMEM в течение 1 часа при 37 °C на 2-й день после трансфекции.После промывки собирали 2,5 × 10 4 клеток в момент времени 1 час. Остальные клетки высевали по 2,5 × 10 4 клеток на лунку в 96-луночный планшет в трех повторностях и культивировали в полной среде DMEM в присутствии 10 мкМ MG-132, как описано 37 , или протеасомного ингибитора I. (оба от Calbiochem) в течение 4 ч в соответствии с инструкцией производителя. В качестве контроля носителя использовали ДМСО (0,1%).

Транс--инфекция SARS-CoV клетками CHO, трансфицированными L-SIGN.

Клетки СНО, трансфицированные N7, N5 и N7/5 L-SIGN, и ложно-трансфицированные клетки СНО высевали в количестве 1 × 10 4 на лунку в 96-луночный планшет на 2-й день после трансфекции и импульсно добавляли 0,01 или 1 БОЕ/клеточный CoV при 37 °C в среде DMEM без сыворотки в течение 1 часа. После промывки в каждую лунку добавляли 1 × 10 4 клеток Vero E6 и далее культивировали в течение 24 ч и 48 ч. Тотальную РНК экстрагировали из лунок и определяли количество копий ORF-1b.

Цис- инфекция SARS-CoV в клетках Vero E6, трансфицированных L-SIGN N7 и N7/N5.

Клетки Vero E6 трансфицировали N7 или N7/N5 L-SIGN аналогично трансфекции клеток CHO, как описано выше. На 2-й день после трансфекции клетки подвергали воздействию 0,01 БОЕ/клетку в течение 1 ч при 37°С. После промывки клетки дополнительно инкубировали при 1×10 4 клеток на лунку в 96-луночном планшете в трех экземплярах. Определение ORF-1b или последовательности нуклеокапсида через 24 часа и 48 часов проводили из клеточных лизатов или супернатантов или из обоих, как указано в отдельных экспериментах.В некоторых экспериментах EGTA (Sigma) или PBS (в качестве контроля EGTA) добавляли в каждую лунку в конечной концентрации 5 мМ в конце 48-часового культивирования и клетки дополнительно инкубировали при 37 °C в течение 1 часа. Затем отдельно собирали супернатанты и клеточную РНК и определяли количество копий вирусной РНК.

Блокирование экспериментов с использованием антител против L-SIGN.

2,5 × 10 4 Клетки СНО, трансфицированные N7, N5 и N7/N5 L-SIGN, высевали в 96-луночный планшет и инкубировали с бессывороточной средой DMEM, содержащей либо коктейль антител к L-SIGN (смесь клонов 120526 и 120612 по 10 мкг/мл) или контрольные антитела изотипа IgG2a мыши (20 мкг/мл) при комнатной температуре в течение 40 мин.Затем к культурам добавляли 1 БОЕ/клетку SARS-CoV и клетки дополнительно инкубировали при 4°С в течение 1 ч в постоянном присутствии антител. Затем клетки тщательно промывали и собирали для количественного определения транскриптов ORF-1b. В отдельных экспериментах 1 × 10 4 клеток Vero E6, трансфицированных N7 L-SIGN, высевали в 96-луночные планшеты и инкубировали с бессывороточной средой DMEM, содержащей либо коктейль антител против коктейля L-SIGN, либо мышиные контрольные антитела изотипа IgG2a. (20 мкг/мл), как описано выше.Затем к культурам добавляли 0,01 БОЕ/клетку SARS-CoV и клетки дополнительно инкубировали при 37°С в течение 1 ч в постоянном присутствии антител. Затем клетки тщательно промывали и инкубировали в полной среде DMEM в течение 24 ч и 48 ч после пополнения антител против L-SIGN и контрольного антитела изотипа. Определение последовательности ORF-1b через 24 ч и 48 ч проводили из клеточных лизатов или супернатантов, как указано в отдельных экспериментах.

Заражение культур Vero E6 и стабильных трансфектантов L-SIGN/CHO без промывки в закрытой системе.

Клетки Vero E6 (1 × 10 5 ) сначала гомогенно смешивали с 1 × 10 5 или 1 × 10 4 стабильных трансфектантов клеток N5, N7/N5 L-SIGN/CHO и родительских клеток CHO в 200 мкл DMEM без сыворотки, а затем инфицировали SARS-CoV в количестве 0,01 БОЕ на клетку Vero E6 в суспензии при 37 °C в течение 1 часа. Не отмывая вирус, 20 мкл этой суспензии инфицированных клеток, которая содержала суспензию 1×10 4 клеток Vero E6 и 1×10 4 L-SIGN/CHO (соотношение 1:1) или суспензия 1 × 10 4 клеток Vero E6 с 1 × 10 3 L-SIGN/CHO (соотношение 1:0.1) помещали в 96-луночный планшет в трех повторностях. После добавления 180 мкл полной среды в каждую лунку до конечного объема 200 мкл клетки затем инкубировали. Через 24 ч и 48 ч клетки в лунках лизировали и собирали вместе с супернатантом для измерения общей ORF-1b и числа копий нуклеокапсида.

Коды доступа.

GenBank: полноразмерная кДНК ACE2, AB046569; Зонд кРНК L-SIGN, нуклеотиды 109–168: AF290887.

URL.

Программа CLUMP, http://www.mds.qmw.ac.uk/statgen/dcurtis/software.html; Точный тест Харди-Вайнберга, http://wbiomed.curtin.edu.au/genepop/.

Примечание: Дополнительная информация доступен на веб-сайте Nature Genetics .

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка браузера на прием файлов cookie

Существует множество причин, по которым файл cookie не может быть установлен правильно.Ниже приведены наиболее распространенные причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы принять файлы cookie, или спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файл cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Попробуйте другой браузер, если вы подозреваете это.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом.Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы это исправить, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу.Предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой вами страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в файле cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта.Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, если вы не решите ввести его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступ к остальной части вашего компьютера, и только сайт, создавший файл cookie, может его прочитать.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка браузера на прием файлов cookie

Существует множество причин, по которым файл cookie не может быть установлен правильно.Ниже приведены наиболее распространенные причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы принять файлы cookie, или спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файл cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Попробуйте другой браузер, если вы подозреваете это.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом.Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы это исправить, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу.Предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой вами страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в файле cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта.Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, если вы не решите ввести его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступ к остальной части вашего компьютера, и только сайт, создавший файл cookie, может его прочитать.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка браузера на прием файлов cookie

Существует множество причин, по которым файл cookie не может быть установлен правильно.Ниже приведены наиболее распространенные причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы принять файлы cookie, или спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файл cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Попробуйте другой браузер, если вы подозреваете это.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом.Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы это исправить, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу.Предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой вами страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в файле cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта.Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, если вы не решите ввести его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступ к остальной части вашего компьютера, и только сайт, создавший файл cookie, может его прочитать.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка браузера на прием файлов cookie

Существует множество причин, по которым файл cookie не может быть установлен правильно.Ниже приведены наиболее распространенные причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы принять файлы cookie, или спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файл cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Попробуйте другой браузер, если вы подозреваете это.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом.Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы это исправить, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу.Предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой вами страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в файле cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта.Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, если вы не решите ввести его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступ к остальной части вашего компьютера, и только сайт, создавший файл cookie, может его прочитать.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка браузера на прием файлов cookie

Существует множество причин, по которым файл cookie не может быть установлен правильно.Ниже приведены наиболее распространенные причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы принять файлы cookie, или спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файл cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Попробуйте другой браузер, если вы подозреваете это.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом.Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы это исправить, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу.Предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой вами страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в файле cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.