Длина х рей лада: Размеры Lada XRAY (габариты кузова, вместительность салона и багажника)

Содержание

высота, ширина и длина Лада XRAY, габаритные размеры и описание на сайте Autospot.ru

Технические характеристики модельного ряда автомобиля LADA. Характеристики и описание комплектаций, габариты LADA: от 1570 x 1764 x 4165 до 1645 x 1810 x 4171, вес автомобиля: 1650 кг, а также характеристики трансмиссии, двигателя и других показателей авто. Подробная информация о машинах на сайте Autospot.

Размеры LADA XRAY 2015 – н.в., I, хэтчбек

КомплектацияГабариты, мм
Classic4165x1764x1570
Classic Air conditioner4165x1764x1570
Classic / Air conditioner
4165x1764x1570
Club4165x1764x1570
Club EnjoY4165x1764x1570
Club Multimedia4165x1764x1570
Comfort4165x1764x1570
Comfort Light4165x1764x1570
Exclusive
4165x1764x1570
Luxe4165x1764x1570
Luxe Prestige4165x1764x1570
Optima4165x1764x1570
Optima / Air conditioner4165x1764x1570
Optima Аdvanced4165x1764x1570
Standard4165x1764x1570
Top4165x1764x1570
Top Prestige4165x1764x1570
Смотреть 13 авто

Размеры LADA XRAY 2015 – н. в., I, хэтчбек

КомплектацияГабариты, мм
Black4171x1810x1645
Classic4171x1810x1645
Classic Optima Optima4171x1810x1645
Comfort4171x1810x1645
Instinct4171x1810x1645
Luxe4171x1810x1645
Luxe Prestige4171x1810x1645
Luxe Prestige Prestige4171x1810x1645
Смотреть 11 авто

Другие характеристики LADA XRAY

Похожие модели

Lada X-Ray крупнее, чем ожидалось | 59.

ruВсе новости

«Большинство русских женщин — как мужики, но я нашел другую»: как парень из Ирака влюбился в сибирячку с тремя детьми

Из Перми направили гуманитарную помощь добровольцам батальона «Молот»

За продажу шпионской камеры пермяку вынесли приговор

Если каждый день выпивать по стопке водки. Врач — о том, что будет с вашим организмом

Лев из риса и пирог-собака: мама создает шедевры из завтраков для сына, который плохо ест, — только посмотрите на эту красоту

Как живут простые люди под обстрелами — кадры из Белгорода и его окрестностей, граничащих с Украиной

Записи с камер в пермском транспорте будут получать в режиме онлайн

«Боюсь говорить, откуда мы»: россияне — об отдыхе в Европе в разгар международного конфликта

Фасад и крышу пермского «Муравейника» отреставрируют

Отрасль складывается как карточный дом. Что значит продажа завода Hyundai для российского автопрома

Просто снять стресс или стать настоящим художником. Где в Перми научиться рисовать взрослому: обзор студий и школ

Секс-игрушка, кедровые орехи, кофе, тату-машинки, купальник: что берут с собой россияне, переезжающие в другую страну

В «Деловой России» сообщили, что ни один пермский предприниматель не был мобилизован

По этим красавчикам в 90-е сходили с ума все женщины. Смотрите, как они выглядят сейчас

«Больше туда не хочется»: история пермяка, вернувшегося домой из Елани из-за проблем со здоровьем

«Топиться в Черном море пока рано». Эксперты — о том, что будет в Крыму после введения режима среднего реагирования

Пермяки выпустили настольную игру о родном городе 1960–70-х годов. Где в нее поиграть?

Кремль ответил на предложение увеличить срок службы в армии: новости вокруг СВО за 21 октября

Яркие листья припорошило: в Перми и городах края прошел первый снегопад. Фото

В более чем 70 домах Перми не будет холодной воды в конце октября. Адреса и карта

В Перми на неделю закрыли движение по части улицы Голева

В Москве пройдет форум классных руководителей

«Показывали алфавит»: 2-летняя девочка умеет читать и писать на уровне второклашки — как ее родителям это удалось

Прогулка по Перми с Принцессой-Феминисткой и Королем-Прокрастинатором: Театр-Театр создал новый аудиоспектакль

В эти выходные в Перми пройдут рейды ГИБДД по выявлению пьяных за рулем

В Перми на два дня изменят автобусный маршрут № 3 из-за перекрытия Сибирской. Карта

Пока не наступила зима. Смотрим на завораживающие фотографии золотой осени в Перми

«Но люди решили, что Брехач нужен здесь». История мобилизованного врача, которого смогли вернуть в пермскую больницу

В Перми скончалась третья пострадавшая в ДТП, где машина врезалась в остановку

Роспотребнадзор изменил коронавирусные правила въезда в страну. Какие теперь нужны документы

Экс-депутаты Госдумы от Прикамья и Дмитрий Рыболовлев (вместе с бывшей женой) попали под санкции Украины

На Новый год и выпить нечего будет? Исчезнет ли с полок иностранный алкоголь — разбираемся с экспертами

На Украине погиб врач суксунского курорта «Ключи» Сергей Башкирцев. У него осталось четверо детей и должен родиться пятый

«Отец с большой буквы, счастливый дед»: В ЛНР погиб 48-летний Владимир Пирогов из Прикамья

«Броников нет, а патронов — хоть ведрами набирай»: монолог контрактника, приехавшего со спецоперации в отпуск

Около 10 тысяч ошибочно мобилизованных россиян вернули домой

«В чатах местных паника была»: что изменилось в Сочи после введения среднего уровня реагирования

Учителям школ Прикамья разослали «методички» о том, как отвечать на вопросы детей об их политических правах

Пермячка хочет взыскать с Пермского порохового завода 10 миллионов за смерть матери на производстве

Все новости

Поделиться

Новый хетчбэк повышенной проходимости Lada X-Ray построен на платформе Renault Sandero Stepway, однако, по сообщению сайта «Автосреда», его размеры крупнее, чем у донора. Так, длина X-Ray составляет 4164 мм против 4080 мм у Sandero Stepway. Получается, что по размерам кузова новинка «Лады» не так и далека от автомобилей вроде SKODA Yeti, длина которого составляет 4222 мм. Кроме того, X-Ray шире и ниже аналогичной модели Renault. Объем багажника X-Ray сравним с таковым у Sandero – 324 л против 320 л. Запуск автомобиля в серию состоится в декабре 2015 года.

Фото: Фото Артема Краснова

Виталий Щеглов

LadaАВТОВАЗ

  • ЛАЙК0
  • СМЕХ0
  • УДИВЛЕНИЕ0
  • ГНЕВ0
  • ПЕЧАЛЬ0

Увидели опечатку? Выделите фрагмент и нажмите Ctrl+Enter

КОММЕНТАРИИ20

Читать все комментарии

регистрация

Что я смогу, если авторизуюсь?

ПРАВИЛА КОММЕНТИРОВАНИЯ

0 / 1400

Этот сайт защищен reCAPTCHA и Google. Применяются Политика конфиденциальности и Условия использования.

Новости СМИ2

Новости СМИ2

Lada X-Ray крупнее, чем ожидалось | 45.

ruВсе новости

«Большинство русских женщин — как мужики, но я нашел другую»: как парень из Ирака влюбился в сибирячку с тремя детьми

Прокуратура области контролирует расследование дела о ДТП с четырьмя погибшими в Зауралье

Зачем курганцы копят мусор и сортируют вторсырье? Спросили у самих участников экологической акции

Если каждый день выпивать по стопке водки. Врач — о том, что будет с вашим организмом

«От удара автомобиль полностью выгорел»: в ДТП на трассе «Иртыш» погибли четыре человека

Лев из риса и пирог-собака: мама создает шедевры из завтраков для сына, который плохо ест, — только посмотрите на эту красоту

Скончался врач-хирург Куртамышской ЦРБ Василий Кочергин

Как живут простые люди под обстрелами — кадры из Белгорода и его окрестностей, граничащих с Украиной

«Боюсь говорить, откуда мы»: россияне — об отдыхе в Европе в разгар международного конфликта

Таможенники сосредоточились на вывозе товаров из России в Казахстан

Отрасль складывается как карточный дом. Что значит продажа завода Hyundai для российского автопрома

В Курганской области прогнозируют минусовые температуры и дождь со снегом

Трассу в Тюмень заволокло дымом от горящих торфяников в Белозерском районе

Биоматериал погибших косуль отправили в Челябинск. Исследования в Свердловской лаборатории результатов не дали

Секс-игрушка, кедровые орехи, кофе, тату-машинки, купальник: что берут с собой россияне, переезжающие в другую страну

По щучьему веленью, или Особенности курганской охоты и рыбалки век назад

По этим красавчикам в 90-е сходили с ума все женщины. Смотрите, как они выглядят сейчас

В Кургане возбудили уголовное дело о жестоком обращении с животными из-за расстрелянного из арбалета пса

«Топиться в Черном море пока рано». Эксперты — о том, что будет в Крыму после введения режима среднего реагирования

Кремль ответил на предложение увеличить срок службы в армии: новости вокруг СВО за 21 октября

В Москве пройдет форум классных руководителей

«Показывали алфавит»: 2-летняя девочка умеет читать и писать на уровне второклашки — как ее родителям это удалось

Глава города Елена Ситникова показала, чем украсят центральную площадь Кургана

Роспотребнадзор изменил коронавирусные правила въезда в страну. Какие теперь нужны документы

На Новый год и выпить нечего будет? Исчезнет ли с полок иностранный алкоголь — разбираемся с экспертами

«Броников нет, а патронов — хоть ведрами набирай»: монолог контрактника, приехавшего со спецоперации в отпуск

Около 10 тысяч ошибочно мобилизованных россиян вернули домой

Брендовую одежду, задержанную на границе, могут передать в соцучреждения Курганской области

«В чатах местных паника была»: что изменилось в Сочи после введения среднего уровня реагирования

Эксперт Федерального центра охраны здоровья животных приедет посмотреть больных косуль в Зауралье

«Страшно было так долго, что уже всё равно». Как теперь выглядит граница между Доном и Донбассом

В Кургане в выходные будут ловить пьяных водителей

Таможенники в Кургане приняли рекордное количество спецтехники за последние 8 лет

Сколько будут длиться военное положение и особые режимы в России? Изучаем закон

«Я не считаю себя предателем». История филолога, который 3 года бегал от повесток и уехал в Казахстан

Ни снять, ни толком заплатить: что сейчас нельзя сделать с валютой в России

Путин приехал на полигон к мобилизованным и пострелял из снайперской винтовки: новости СВО за 20 октября

В Курганской области 33 косули погибли, больны — 11. Видео странного поведения животных

Таможенники в Кургане открестились от продажи конфискованных товаров в магазинах

Все новости

Поделиться

Новый хетчбэк повышенной проходимости Lada X-Ray построен на платформе Renault Sandero Stepway, однако, по сообщению сайта «Автосреда», его размеры крупнее, чем у донора. Так, длина X-Ray составляет 4164 мм против 4080 мм у Sandero Stepway. Получается, что по размерам кузова новинка «Лады» не так и далека от автомобилей вроде SKODA Yeti, длина которого составляет 4222 мм. Кроме того, X-Ray шире и ниже аналогичной модели Renault. Объем багажника X-Ray сравним с таковым у Sandero – 324 л против 320 л. Запуск автомобиля в серию состоится в декабре 2015 года.

Фото: Фото Артема Краснова

Виталий Щеглов

LadaАВТОВАЗ

  • ЛАЙК0
  • СМЕХ0
  • УДИВЛЕНИЕ0
  • ГНЕВ0
  • ПЕЧАЛЬ0

Увидели опечатку? Выделите фрагмент и нажмите Ctrl+Enter

КОММЕНТАРИИ20

Читать все комментарии

регистрация

Что я смогу, если авторизуюсь?

ПРАВИЛА КОММЕНТИРОВАНИЯ

0 / 1400

Этот сайт защищен reCAPTCHA и Google. Применяются Политика конфиденциальности и Условия использования.

Новости СМИ2

Новости СМИ2

Гриф X-Ray Vision Challenge

Вы ЗАТЕРЯЕТЕСЬ на грифе?


Вы когда-нибудь играли песню в зоне, но потом натыкались не на ту ноту?
БОЛЬШЕ НЕТ!
Знакомство с…

Этот 5-этапный метод – самый эффективный, но простой способ увидеть гриф более четко, как если бы у вас было РЕНТГЕНОВСКОЕ ЗРЕНИЕ – попрощайтесь с моментами «упс»!

Эта задача была опробована музыкантами разного уровня подготовки, и было доказано, что она дает ЭФФЕКТИВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ.

Позвольте мне показать вам, почему вы должны присоединиться к ним…

Нажмите, чтобы получить рентгеновское изображение грифа сейчас

Подождите… Что такое Рентгеновское зрение?

Для кого этот курс?


Этот курс был специально разработан для людей, которые играют на гитаре, басу, укулеле, банджо и мандолине  и хотят запомнить каждую ноту на грифе. 0027 легкий .

Это для любителей ладов, которые в настоящее время:

  • Перемещаются по номерам ладов
  • Устали от  рисования пробела  каждый раз, когда они смотрят на гриф
  • Раньше пытались выучить ноты на грифе, но сочли это скучным
  • Хотите иметь возможность смотреть на гриф и мгновенно определять каждую ноту на грифе
  • Играть только на 1 или 2 инструментах с грифом, упомянутых выше, и интересоваться, как устроены остальные
  • Готовы выучить гриф в РАБОТАЮЩИМ способом — за МЕНЬШЕ ВРЕМЕНИ, чем вы думаете!
Воспроизведение песен с точностью

Проверенный метод мгновенного поиска каждой ноты на грифе!

Поднимите свое одиночное мастерство до
следующего уровня

Используйте свое новое рентгеновское зрение , чтобы задействовать свою творческую сторону.

Молниеносно осваивайте новые музыкальные навыки!

Вы сможете гораздо быстрее осваивать новые навыки, такие как гаммы и аккорды.

Открывает дверь в

больше удовольствия!

После того, как вы запомнили, вы можете повеселиться, сосредоточившись на тоне и выражении — работает!

Почему этот курс РАБОТАЕТ!

Во всяком случае, это сработало для меня и моих учеников.

А как насчет тебя?

Когда вы будете слушать вводное видео внутри, вы узнаете, как мне удалось вычислить формулу с помощью моего школьного дневника .

Звучит слишком просто, правда? Что ж, в этом случае вам не нужно тратить годы после первого открытия, возясь с грифом с наставником за наставником, которые качают вам головой, как это произошло со мной.

Я нашел время, чтобы исправить ошибки для вас.

Я проведу вас через простой и увлекательный пошаговый процесс  что вам нужно сделать, чтобы навигация по грифу была не только легкой, но и приятной!

«Я могу сыграть несколько аккордов и риффов, но если бы вы спросили меня, где на грифе находится си-бемоль, я бы понятия не имел!»

Вы обратились по адресу.

САМОЕ БОЛЬШОЕ препятствие для начинающего музыканта – это  n не знать, где находятся правильные ноты.

Некоторые номера ладов и положения пальцев работают, но рано или поздно новая песня или музыкант споткнутся в незнакомой области на грифе.

Я ЗДЕСЬ


Позвольте мне представиться: меня зовут Crafty в музыкальной индустрии, и я мультиинструменталист, работающий полный рабочий день, с более чем 20-летним опытом во многих областях музыкального образования и исполнения.

Отсюда и название «Ловкие музыкальные советы».

Как гитарист, я играю более 25 лет,  и за это время я заметил, что некоторые учителя музыки излишне усложняют вещи, когда дело доходит до обучения их учеников.  Это может привести к негативному отношению к гитаре, а не к приятному.

Не бойся!

Внутри Fretboard X-Ray Vision Challenge не будет никаких вопросов или предположений, вам будет показано, что именно вам нужно сделать, чтобы установить ваш Fretboard X-Ray Vision  .

«Правильное попадание нот и правильная техника гораздо важнее скорости.»

— Джо Сатриани

Сколько это стоит?

Если бы вы были моим учеником один на один, то для прохождения всего материала с нуля потребовалось бы как минимум 6 получасовых уроков.

(35 австралийских долларов каждый = 210 долларов США)

Сегодня вы можете получить круглосуточный доступ ко всему содержанию курса за 97 австралийских долларов.

Из-за границы? Проверьте конвертер валют, потенциально он может выйти для вас намного дешевле!

Чего ты ждешь?!  

Получите рентгеновское зрение прямо сейчас! >>>
Гриф X-Ray Vision Challenge
97,00 австралийских долларов

Часто задаваемые вопросы

Я ДЕЙСТВИТЕЛЬНО получу X-Ray Vision?

Чем этот курс лучше других?

Нужна ли мне классическая или джазовая подготовка для прохождения этого курса?

Какой уровень опыта мне нужен?

Сколько длится курс?

Могу ли я скачать файлы из курса?

Какие-нибудь советы для успеха с этим курсом?

Джесс

«Спасибо, Крафти, ты каким-то образом сделал изучение потенциально скучного предмета довольно увлекательным».

Роб

«Это была отличная инвестиция! Теперь, когда я могу найти ноты на грифе, я могу проводить больше времени на частных уроках, изучая другие вещи».

Фредди

«Этот курс ответил на вопросы, которые я боялся задать, именно то, что мне было нужно!»

Получите результаты через 30 дней или верните деньги!

30 дней после регистрации, Я гарантирую возврат денег без вопросов.

Все люди разные, так что без обид! Я желаю вам только самого лучшего в вашем музыкальном путешествии.

Таким образом, вы знаете, что можете зарегистрироваться без какого-либо давления. Просто попробуйте в течение 30 дней, и если это не сработает,

вы ничего не потеряли!   И я буду признателен за любой ваш отзыв.

Гриф X-Ray Vision Challenge
97,00 австралийских долларов

Сравнение кристаллографии, ЯМР и ЭМ

Сравнение кристаллографии, ЯМР и ЭМ

Запрос

Структурная биология включает методы и принципы молекулярной биологии, биохимии и биофизики в качестве средства выяснения молекулярной структуры и динамики биологически значимых молекул. Недавний прогресс в приборостроении способствовал новому развитию структурной биологии, поскольку сложные биологические молекулы теперь можно анализировать с беспрецедентной легкостью и эффективностью. Трехмерная структура белков и белковых комплексов позволяет лучше понять законы жизнедеятельности и механизмы заболеваний, тем самым позволяя рационально разрабатывать новые диагностические и терапевтические средства. В структурной биологии существует три основных метода исследования: дифракция рентгеновских лучей на монокристаллах (SC-XRD), ядерный магнитный резонанс (ЯМР) и криоэлектронная микроскопия (Крио-ЭМ). Однако не существует «универсального» метода, поскольку все три из них предлагают уникальные преимущества, а также ограничения.

Рис.1. Три основных метода исследования структурной биологии. Согласно статистике PDB (https://www.rcsb.org/), с помощью SC-XRD разрешено более 120 000 белковых структур, что составляет почти 90% от общего числа. С помощью ЯМР получено около 12 000 белковых структур. Хотя общее количество белковых структур, разрешенных с помощью крио-ЭМ, несопоставимо с первыми двумя методами, взрывной рост структур с помощью этого метода в последние годы примечателен.

1.

Монокристаллическая рентгеновская дифракция

  • Основы теории

Рентгеновская кристаллография использует рентгеновские лучи для определения положения и расположения атомов в кристалле. Наиболее классическим методом рентгеновской кристаллографии является дифракция рентгеновских лучей на монокристалле, при которой атомы кристалла заставляют падающий рентгеновский луч создавать рассеянные лучи. Когда рассеянные лучи попадают на детектор, эти лучи создают спекл-дифракционную картину. По мере постепенного вращения кристалла можно измерить угол и интенсивность этих дифрагированных лучей, а затем создать трехмерное изображение электронной плотности внутри кристалла. На основе этой электронной плотности можно определить среднее положение атомов в кристалле, химические связи, кристаллические барьеры и различную информацию. Для монокристалла достаточной чистоты, однородности и регулярности данные рентгеноструктурного анализа позволяют определить средний угол и длину химической связи с точностью до нескольких десятых градуса и до нескольких тысячных ангстрема соответственно.

Рис.2. Физико-математические основы рентгеновской кристаллографии для решения структуры

  • История и актуальность

Метод дифракции рентгеновских лучей на монокристаллах был предложен и разработан в 1912 году и стал наиболее важным и полезным инструментом для определения структуры белка, так как структура белка миоглобина была впервые определена в 1958 году. В настоящее время известно более 140 000 белковых структур. были депонированы в банке белковых данных (https://www.rcsb.org/), почти 90% из которых разрешены с помощью метода рентгеновской дифракции монокристаллов, что свидетельствует о его преимуществах при изучении структуры кристаллов биологических макромолекул.

  • Процедуры

Процесс метода рентгеновской дифракции монокристалла можно условно разделить на четыре этапа. Первым этапом является получение качественных монокристаллов целевого белка, который называется кристаллизацией белка. Когда раствор солюбилизированного белка достигает пересыщения, он способствует агрегации белка и зародышеобразованию. В конце концов, отдельные белковые молекулы выстраиваются в повторяющийся ряд элементарных ячеек, принимая однородную ориентацию. Квалифицированные кристаллы должны быть достаточного размера (обычно более 50 мкм по всем измерениям) и качества (правильной структуры, без трещин или двойников). Получение монокристаллов высокого качества является ограничивающим шагом для решения структуры с помощью этого метода.

После получения монокристалла необходим дифракционный эксперимент. Кристалл иммобилизуют в интенсивном рентгеновском луче, создавая дифракционную картину, которая регистрируется как данные дифракции (угол и интенсивность дифрагированных рентгеновских лучей). По мере постепенного вращения кристалла прежние отражения исчезают и появляются новые. Интенсивность дифракции в каждом пятне регистрируют с каждого направления кристалла.

Затем дифракционные данные, полученные из дифракционной картины, объединяются с различными методами структурного анализа и подгонки данных для анализа распределения электронной плотности в трехмерном пространстве внутри элементарной ячейки.

На последнем этапе на основе карты электронной плотности можно создать и уточнить модель расположения атомов в кристалле.

Рис.3. Процесс рентгеноструктурного анализа монокристаллов

  • Преимущества

Этот метод может обеспечивать высокое атомное разрешение и не ограничивается молекулярной массой образца. Он подходит для водорастворимых белков, мембранных белков, а также макромолекулярных комплексов. При правильном манипулировании он становится мощным инструментом для предоставления надежных структурных данных биологических макромолекул и определения положения и структуры активного центра, а также помогает понять, как белок распознает и связывает молекулы лиганда на атомном уровне.

  • Недостатки

Однако метод дифракции рентгеновских лучей на монокристаллах также имеет ряд недостатков. Во-первых, образец должен быть кристаллизуемым, но кристаллизация биологических макромолекул с большой молекулярной массой может быть затруднена, в частности, мембранные белки сложнее кристаллизовать из-за их большого размера и плохой солюбилизации. Во-вторых, необходимо получить организованный монокристалл, чтобы обеспечить соответствующую дифракцию. Наконец, полученная трехмерная структура биологического образца представляет собой лишь статическую форму тестируемой молекулы (одна из многих возможностей), а не динамическую.

2. Ядерный магнитный резонанс (ЯМР)

  • Основы теории

Второй метод — ядерно-магнитный резонанс (ЯМР). Ядра представляют собой заряженные, быстро вращающиеся частицы, подобные внешним электронам. Гиромагнитные отношения различных атомных ядер различны и поэтому имеют разные резонансные частоты. Движение ядра не изолировано — оно взаимодействует с окружающими атомами как внутри-, так и межмолекулярно. Следовательно, с помощью спектроскопии ядерного магнитного резонанса можно получить информацию о структуре данной молекулы. Взяв в качестве примера белок, его вторичная структура, такая как α-спираль, β-лист, поворот, кольцо и завиток, отражает различное расположение атомов основной цепи белковых молекул в трехмерном пространстве. Расстояние между атомными ядрами в различных вторичных доменах, взаимодействие между ядрами и динамические характеристики полипептидных сегментов напрямую отражают трехмерную структуру белков. Все эти ядерные особенности вносят вклад в спектроскопическое поведение анализируемого образца, обеспечивая, таким образом, характерные сигналы ЯМР. Интерпретация этих сигналов компьютерными методами приводит к расшифровке трехмерной структуры.

Рис.4. Ядерный спин

  • История и действительность

С момента первого наблюдения сигналов ЯМР в конденсированном состоянии в 1946 году технология ЯМР претерпела быстрое развитие в течение более 70 лет, и ее применение было расширено из области физики, такой как определение магнитного момента ядра, в химию, медицину, материаловедение, науки о жизни и многие другие. Примечательно, что в 1980-х годах технология ЯМР творчески применялась в структурном анализе белка, что способствовало применению ЯМР в биологической области. Хотя количество данных о трехмерной структуре белков, полученных с помощью технологии ЯМР, несопоставимо с данными, полученными с помощью рентгеновской дифракции монокристаллов, уникальные преимущества технологии ЯМР широко известны: ЯМР может предоставить информацию на кинетической основе, таким образом, можно решить внутреннее движение белков в нескольких временных масштабах и механизм их связывания с лигандами.

  • Процедуры

ЯМР-эксперимент состоит из четырех основных этапов: подготовка образца, сбор данных, спектральная обработка и структурный анализ. ЯМР-анализ проводят на водных образцах белка высокой чистоты, высокой стабильности и высокой концентрации. Объем образца от 300 до 600 мкл с диапазоном концентраций 0,1-3 мМ. Использование стабильных изотопов 15N, 13C и 2H для мечения белков может эффективно увеличить интенсивность сигнала и разрешение. Избирательное мечение определенных аминокислот или химических групп белков может значительно уменьшить перекрытие сигналов. Многомерные эксперименты ЯМР используются для получения информации о белке. Затем проводят спектральную обработку для определения атомов белка, соответствующих каждому спектральному пику на разных спектрах ЯМР. Наконец, ряд пространственно структурированной информации, такой как константы связи NOE и J, используется для расчета пространственной структуры с использованием методов дистанционной геометрии или молекулярной динамики.

Рис.5. Процесс технологии ядерного магнитного резонанса

  • Преимущества

Важнейшей особенностью метода ЯМР является то, что трехмерная структура макромолекул в естественном состоянии может быть измерена непосредственно в растворе, а ЯМР может предоставить уникальную информацию о динамике и межмолекулярных взаимодействиях. Разрешение макромолекулярной трехмерной структуры может быть всего субнанометровым.

  • Недостатки

Однако спектр ЯМР биомолекул с большой молекулярной массой очень сложен и труден для интерпретации, что ограничивает применение ЯМР для анализа больших биомолекул. Кроме того, этот метод требует относительно большого количества чистых образцов (порядка нескольких мг) для достижения разумного отношения сигнал-шум.

3. Криоэлектронная микроскопия (Крио-ЭМ)

  • Основы теории

Третий подход — это метод криоэлектронной микроскопии (Крио-ЭМ), который включает в себя три разных метода: анализ отдельных частиц, электронную томографию и электронную кристаллографию. Основным механизмом крио-ЭМ является рассеяние электронов. Основной принцип описывается следующим образом. Образцы готовят путем криоконсервации перед анализом. Когерентные электроны используются в качестве источника света для измерения образца. После прохождения электронного луча через образец и близлежащий слой льда система линз преобразует рассеянный сигнал в увеличенное изображение, регистрируемое на детекторе. И выполняется обработка сигнала для получения трехмерной структуры образца.

  • История и действительность

Технология трехмерной реконструкции с помощью электронной микроскопии была впервые открыта в 1968 году. Трехмерная структура хвоста фага Т4 была реконструирована с помощью электронных микрофотографий. И тогда были предложены общая концепция и методы трехмерной реконструкции электронной микроскопии. Для уменьшения лучевого поражения в 1974 году была создана криогенная электронная микроскопия. После более чем 30-летнего развития Крио-ЭМ стала мощным инструментом для изучения структуры биологических макромолекул. В последние годы технология Cryo-EM сделала революционный прогресс, особенно в анализе одиночных частиц. С 2013 года, благодаря огромному прогрессу в области электронных детекторов и обработки изображений, крио-ЭМ анализ отдельных частиц развивался так быстро, что разрешение крио-ЭМ теперь сравнимо с рентгеновской дифракцией монокристаллов. В настоящее время Крио-ЭМ становится мощным инструментом для определения структуры биологических макромолекул с высоким разрешением.

  • Процедуры

Прежде чем использовать крио-ЭМ для наблюдения за образцом, можно использовать ЭМ с отрицательным окрашиванием для быстрого скрининга гомогенного образца. Метод крио-ЭМ анализа отдельных частиц начинается с витрификации образца. Во время этого процесса белковый раствор мгновенно охлаждается, благодаря чему молекулы воды не кристаллизуются, образуя аморфное твердое вещество. Затем замороженный образец подвергается скринингу, и данные собираются в системе. В этот период можно сделать серию двумерных изображений. Затем, на основе большого количества полученных двумерных изображений, выполняется выравнивание и классификация частиц. В конце данные обрабатываются программным обеспечением реконструкции для создания трехмерной структурной модели.

Рис.6. Процесс крио-ЭМ метода анализа отдельных частиц

  • Преимущества

По сравнению с рентгеновской дифракцией монокристалла, обработка образца быстрым замораживанием сохраняет его состояние, близкое к исходному. Кроме того, для этого метода требуется лишь небольшое количество образца (около 0,1 мг), он более прост в отношении чистоты образца и не требует кристаллизации белка.

  • Недостатки

Основной недостаток этого метода заключается в том, что частицы обнаруживаются в неизвестной ориентации. Высокий уровень шума из-за использования ограниченных доз электронов для минимизации радиационного повреждения, особенно при высоком разрешении, имеет тенденцию усложнять определение этих ориентаций, и это особенно касается более мелких частиц. Следовательно, определение структуры биологических макромолекул с помощью крио-ЭМ в последние несколько лет ограничивалось большими комплексами или моделями с низким разрешением.

Рис.7. Криоэлектронная микроскопия

4. Резюме

  • Основы теории

Таким образом, каждая технология имеет свои преимущества в определенных приложениях, так что один метод может широко использоваться в одних случаях и редко в других. Таким образом, понимание природы анализа является ключом к выбору метода. Мало того, что неправильный выбор метода приведет к сомнительным результатам, он также может привести к значительным задержкам проекта и привести к финансовым потерям. Для получения дополнительной информации см. Таблицу 1.

  Advantages Disadvantages Objects Resolution
X-ray Crystallography • Хорошо разработан
• Высокое разрешение
• Широкий диапазон молекулярной массы
• Простота построения модели		 • Трудно кристаллизуется
• Трудно для дифракции
• Предпочтительна твердая структура
• Структура в статическом кристаллическом состоянии		 • Кристаллизуемые образцы
• Растворимые белки, мембранные белки, рибосомы, ДНК/РНК и белковые комплексы		 Высокая
ЯМР • Высокое разрешение
• Трехмерная структура в растворе
• Подходит для динамического исследования		 • Необходимость высокой чистоты пробы
• Сложность пробоподготовки
• Сложность вычислительного моделирования		 • Молекулярная масса ниже 40–50 кДа
• Водорастворимые образцы		 Высокая
Крио-ЭМ • Простая пробоподготовка
• Структура в естественном состоянии
• Небольшой размер выборки		 • Относительно низкое разрешение
• Применимо только к образцам с высокой молекулярной массой
• Сильно зависит от методов ЭМ
• Дорогостоящее оборудование ЭМ		 • >150 кДа
• Вирионы, мембранные белки, большие белки, рибосомы, комплексные соединения		 Относительно низкий (

Таблица 1 Сравнение рентгеновской кристаллографии, ЯМР и крио-ЭМ

Каталожные номера

  1. Ван, HW; Ван В. Как криоэлектронная микроскопия и рентгеновская кристаллография дополняют друг друга. Наука о белках 2017, 26(1): 32-39.
  2. Ранкин, Н .; и др. . Появление метаболомики протонного ядерного магнитного резонанса в сердечно-сосудистой арене с клинической точки зрения. Атеросклероз 2014, 237(1): 287-300.
  3. Каррони М., Сайбил Р. Криоэлектронная микроскопия для определения структуры макромолекулярных комплексов. Методы 2016, 95: 78-85.
  4. Каллауэй, Э. Революция не выкристаллизуется: новый метод пронизывает структурную биологию. Новости природы 2015 525(7568): 172.

Связанные разделы

Высокопроизводительная кристаллизация

Мембранная кристаллизация белков

Кристаллография белков