Виды атп: Типы автотранспортных предприятий

Типы автотранспортных предприятий

Категория:

   Техническое обслуживание автомобилей

Публикация:

   Типы автотранспортных предприятий

Читать далее:

Типы автотранспортных предприятий

Предприятия автомобильного транспорта подразделяются на автотранспортные, автообслуживающие и авторемонтные.

Автотранспортные предприятия осуществляют перевозку грузов или пассажиров, а также все производственные функции по техническому обслуживанию, ремонту, хранению и снабжению подвижного состава.

По своему назначению АТП делятся на грузовые, пассажирские (легковые и автобусные), смешанные и специальные (скорой медицинской помощи, пожарные, коммунального обслуживания и т. п.).

Рекламные предложения на основе ваших интересов:

По организации производственной деятельности АТП подразделяются на: комплексные, осуществляющие транспортную работу, все виды технического обслуживания (ТО), текущего ремонта (TP) и хранение подвижного состава; кооперированные, деятельность которых осуществляется с учетом централизации транспортной работы, а также централизации (частичной или полной) работ ТО и ТР.

Такие кооперированные предприятия — автокомбинаты на 700— 1600 единиц подвижного состава— состоят из основного предприятия и нескольких филиалов (на 150—200 единиц и более), расположенных на других территориях,—в районе обслуживания перевозками.

На основном предприятии выполняются наиболее трудоемкие и сложные виды технического обслуживания: второе техническое обслуживание (ТО-2), диагностирование и текущий ремонт (TP) всего подвижного состава, а также все виды технического обслуживания (ТО), TP и хранение той части подвижного состава, который базируется на основном предприятии. В филиалах, помимо хранения подвижного состава, выполняются техническое обслуживание в объеме ежедневного технического обслуживания (ЕО), первого технического обслуживания (ТО-1) и несложный текущий ремонт.

Размещение подобных кооперированных предприятий с филиалами способствуют приближению подвижного состава к потребителям, сокращению нулевых пробегов, а также ликвидации малоэффективных мелких предприятий.

К автообслуживающим предприятиям относятся базы централизованного обслуживания, станции технического обслуживания, гаражи-стоянки (гостиницы для автотуристов—мотели, кемпинги), пассажирские автостанции и автовокзалы, грузовые автостанции и топливозаправочные станции.

Базы централизованного технического обслуживания (БЦТО) предназначены для централизованного выполнения сложного вида технического обслуживания и крупного текущего ремонта подвижного состава, эксплуатируемого небольшими некомплексными АТП, расположенными вблизи БЦТО.

Размеры базы измеряются числом приписанных к ней автомобилей, которое должно примерно составлять 1000—2000 автомобилей. В зависимости от типа приписанного подвижного состава базы могут быть предназначены для грузовых автомобилей, автобусов и легковых автомобилей.

Станции технического обслуживания предназначены для обслуживания автомобилей индивидуальных владельцев, выполнения отдельных работ и всего объема (по видам) ТО и ремонта автомобилей, а также снабжения их запасными частями, принадлежностями и эксплуатационными материалами.

Они подразделяются на городские и придорожные.

Гаражи-стоянки (ГС) являются предприятиями для хранения автомобилей. Иногда на них выполняют техническое обслуживание автомобилей индивидуальных владельцев. К этому типу предприятий относятся автогостиницы (мотели) и кемпинги — гаражи-стоянки для временного хранения автомобилей туристов.

Пассажирские автостанции и автовокзалы предназначены для обслуживания междугородных и межрайонных автобусных и таксомоторных сообщений. Автостанции сооружают в городах, населенных пунктах, а также на отдельных участках дорог с относительно малой интенсивностью движения автобусов. Автовокзалы, как правило, сооружаются в крупных городах, где концентрируются конечные пункты междугородных автобусных сообщений.

Автовокзал представляет собой комплекс сооружений, обеспечивающих обслуживание пассажиров и автобусных бригад. Для пассажиров устраивают посадочные площадки, залы ожидания, билетные кассы, камеры хранения, буфеты, гостиницы, рестораны, комнаты матери и ребенка и другие бытовые помещения. Для автобусных бригад предусматривают комнаты отдыха и служебные помещения. На автовокзалах обслуживают и транзитных пассажиров по смешанным перевозкам (автобусы — железная дорога — водный транспорт). Автовокзалы делятся на классы в зависимости от их пропускной способности.

Грузовые автостанции предназначаются для сбора, хранения, комплектования и экспедирования грузов. Размер станций определяется грузооборотом и вместимостью складов.

Автозаправочные станции являются предприятиями по снабжению автомобилей эксплуатационными материалами, преимущественно топливом, а также маслами, консистентными смазками, антифризом, водой и иногда воздухом для шин.

АЗС подразделяют на городские и придорожные. Обычно АЗС специализируются по роду топлива: бензиновые, дизельные, газобаллонные.

Авторемонтные предприятия являются также специализированными предприятиями, производящими ремонт (восстановление) автомобилей и агрегатов. К ним относятся авторемонтные и агрегатно-ремонтные заводы, авторемонтные мастерские, шиноремонтные мастерские или заводы, аккумуляторные зарядно-ре-монтные станции и специализированные цехи.

Специализированные цехи и мастерские выполняют ремонт узлов и механизмов автомобиля, а также окрасочные, кузовные и другие работы, обслуживая автоэксплуатационные предприятия в централизованном порядке.

Рекламные предложения:

Читать далее: Структура пассажирских и грузовых автотранспортных предприятий

Категория: — Техническое обслуживание автомобилей

Главная → Справочник → Статьи → Форум

Руководство по организации технологического процесса работы службы технического контроля АТП и объединений – РТС-тендер

Наименование	Модель, тип, ГОСТ или ТУ	Краткая техническая характеристика	Разработчик конструкции	Завод-изготовитель
1. Оборудование и приборы, инструмент для проверки технического состояния автомобиля при выпуске и приемки с линии
1.1. Прибор для проверки рулевых управлений	K-187	Переносной, ручной пределы измерения динамометра 0-800Н (0-80кгс) угломера 0-15°	НИИАТ	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
1.2. Манометр шинный	ГОСТ 9921-81	Ручной ц.д. 0,2кгс/см2 Предел измерения давления 0,3-0,9 МПа (3,0÷9,0кгс/см 2)		Завод «Автоэлектроприбор» г. Рига
1.3. Молоток с длинной ручкой	ГОСТ 2310-70	Масса 500 г, длина ручки 600 мм		Минавтопром СССР
1.4.Секундомер	СМ-60 ГОСТ 5072-79	Ц.д. 0,1 сек. 60 с, 60 мин.		2-й часовой з-д г. Москва
1.5. Линейка для замера топлива	—	Длина 500 мм ц. д. 1,0 мм		Собственного изготовления
1.6. Штангенциркуль	ШЦ-1-125-0.1 ГОСТ 166-80	Предел измерений 0-125мм ц.д. 1,0 мм.		з-д «Красный инструментальщик» г. Киров
1.7. Манометр шинный	МД-14-39122001	Предел измерений давления 0,05÷0,3МПа (0,5÷3кгс/см2) ц.д. 0,01МПа	Входит в комплект инструмента ав-ля	Минавтопром СССР ЛиАЗ
1. 8. Линейка измерительная металлическая	300 ГОСТ 427-75	Цена деления 1,0 мм предел измерения 0-300 мм		Ленинградское объединение «Комплекс»
2. Оборудование и приборы используемые после TO-1
2.1. Подъемник канавный передвижной	П-227	Грузоподъемностью 10 кН передвижной, гидравлический, одноплунжерный с ручным приводом	Грозненский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
2. 2. Подъемник канавный передвижной	П-113	Гидравлический, одноплунжерный с ручным приводом, грузоподъемностью 40 кН	Грозненский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
2.3. Прибор для проверки рулевых управлений	К-187	Переносной, ручной	НИИАТ	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
2.4. Деселерометр	1155M	Ручной, инерционного действия маятниковый. Предел измерения 0-6 м/сек2	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Новгородское ПО «Автоспецоборудование»
2.5. Прибор для определения люфтов трансмиссий	К-428А	Переносной с замером окружных люфтов, масса 2,8 кг	Ленфилиал НИИАТ	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
2.6. Манометр шинный	ГОСТ 9921-81	Ручной ц. д. 0,2 кгс/см2 Предел измерения давления 0,3-0,9 МПа (3,0÷9,0 кгс/см2)		З-д «Автоэлектроприбор» г.Рига
2.7. Манометр шинный	МД-14-3912200-Г	Предел измерения давления 0,5÷0,3МПа (0,5÷3 кгс/см2) ц.д. 0,01 МПа	Входит в комплект инструмента ав-ля	Минавтопром СССР ЛиАЗ
2.8. Линейка измерительная металлическая	300 ГОСТ 427-75	Ц. д. 1,0 мм предел измерения 0-300 мм		Ленинградское объединение «Комплекс»
2.9. Молоток с длинной ручкой	ГОСТ 2310-70	Масса 500 г длина ручки 600 мм
2.10. Уровнемерная трубка (из комплекта приборов Э-401)	—	Стеклянная Ø=5мм l=200 мм	Новгородское п/о «Автоспецоборудование»
2. 11. Штангенциркуль	ШЦ-1-125-0,1 ГОСТ 166-80	Предел измерения 0-125 мм ц.д. 1,0 мм		3-д «Красный инструментальщик» г.Киров
2.12. Кружка с мыльной эмульсией, кисть				Покупное
3. Оборудование и приборы, используемые после ТО-2
3. 1. Комплект ключей динамометрических	К-468	Комплект состоит: из трех ключей: — с максимальным крутящим моментом 150 Н.м (15 кгс.м) — с максимальным крутящим моментом 300 Н.м (30 кгс.м) — ключа для настройки; В комплект входят также семь сменных головок	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
3.2. Haбор щупов №2	ГОСТ 882-75	Предел толщины 0,02÷0,5мм Количество щупов 17.
3.3. Компрессометр для карбюраторных двигателей регистрирующий	К-181	Переносной, с фиксацией максимального давления на бумажном бланке, степень точности показаний 0,035 МПа (0,35 кгс/см2)	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
3.4. Прибор для проверки натяжения приводных ремней	К-403	Переносной, диапазон измерения: силы, прикладываемой к ремню 20-40Н (2-4 кгс) прогиба ремня до 30 мм	НИИАТ	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
3. 5. Прибор для определения люфтов трансмиссий	К-428А	Переносной с замером окружных люфтов, масса 2,8 кг	Ленфилиал НИИАТ	То же
3.6. Прибор для проверки рулевых управлений	К-187	Переносной, ручной, пределы измерений динамометра 0-800Н (0-80 кгс) угломера 0-15°	НИИАТ	–»–
3.7. Прибор для проверки переднего моста автомобиля	T-1	Ручной, с измерительным индикатором часового типа ц. д. 0,01 мм	НИИАТ	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
3.8. Линейка измерительная металлическая	300 ГОСТ 427-75	Ц.д. 1,0 мм, предел измерения 0-300 мм		Ленинградское объединение «Комплекс»
3.9. Прибор для проверки бензонасосов на автомобилях	527Б	Переносной, пределы измерения по шкале манометра 0-0,1 МПа (0-1 кгс/см2)	НИИАТ	Чистопольский завод «Автоспецоборудование»
3. 10. Подъемник канавный передвижной	П-227	Грузоподъемность 10 кН передвижной, гидравлический, одноплунжерный, с ручным приводом	Грозненский опытно-экспериментальный завод «Автоспецоборудование»
3.11. Стенд для контроля и регулировки углов установки колес легковых автомобилей	К-111	Стационарный, электрический. Точность измерения по электрооптической системе ±15мин.	НИИАТ «Автоспецоборудование»	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
	или 1119М	стационарные, с оптической измерительной системой	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
3. 12. Линейка для проверки схождения колес автомобиля	2182	Универсальная реечная, ручная, телескопическая, ход подвижной трубки 170 мм	Казанский опытно-экспериментальный завод «Автоспецоборудование»
3.13. Деселерометр	1155M	Ручной, инерционного действия, маятниковый. Предел измерения 0-8 м/сек2	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Новгородское производственное объединение «Автоспецоборудование»
3. 11. Станок для балансировки колес легковых автомобилей	К-121	Стационарный, электромеханический, точность балансирования 15г	Новгородское п/о АСО	Йошкар-Олинский з-д нестандартного оборудования
	или К-125	передвижной, электромеханический (без снятия колес), точность балансировки 15г	То же	То же
3.15. Прибор для проверки фар автомобиля	К-303	Передвижной, оптический с фотометрическим устройством. Точность установки фары, мин.: по вертикали ±20 по горизонтали ±90	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Новгородское производственное объединение «Автоспецоборудование «
3.16. Комплект приборов и инструмента для технического обслуживания аккумуляторных батарей	Э-401	Переносной	Новгородское производственное объединение «Автоспецоборудование»
3.17. Манометр шинный	ГОСТ 9921-81	Ручной ц. д. 0,2 кгс/см2 Предел измерения давления 0,3-0,9 МПа (3,0-9,0 кгс/см2)		З-д «Автоэлектроприбор» г.Рига
3.18. Штангенциркуль	ШЦ-125-0,1 ГОСТ 166-80	Предел измерения 0-125 мм ц.д. 1,0 мм		З-д «Красный инструментальщик» г.Киров
3.19. Прибор для проверки свободного и полного хода педалей	К-446	Переносной, ручной, точность измерения 2,5 мм, масса 0,5 кг, входят в комплект оборудование	НИИАТ	Новгородское производственное объединение «Автоспецоборудование»
3. 20. Компрессометр для дизельных двигателей	К-183	Ручной с фиксацией давления	Казанский ОЭЗ РАСО
3.21. Подъемник канавный передвижной	П-113	Гидравлический, одноплунжерный, с ручным приводом Грузоподъемность 400 кгс	Грозненский опытно-экспериментальный завод «Автоспецоборудование»
3.22. Газоанализатор	К-456	Для определения содержания СО в отработавших гагах	Новгородское п/о РАСО (в настоящее время не выпускается)
	или ГАН-1	То же	Смоленское п/о Аналитприбор
	или ELKON S-105A	Для определения процентного СО в пределах от 0-10% цена деления 0,1%		ВНР
	или Инфралит-Т	Для определения процентного СО в пределах от 0-10%, цена деления 0,1%		ГДР
3. 23. Измеритель дымности автомобиля	ИДА-106 «Атлас»	Для определения дымности отработавших газов дизельных двигателей		Кировоканский з-д. «Автоматика»
3.24. Секундомер	СМ60 ГОСТ 5072-79	Ц.д. 0,1 сек. 60 с; 60 мин.		2-й часовой з-д г.Москва
3.25. Набор манометров для проверки тормозной системы автопоездов	1131	В набор входят три манометра со специальными наконечниками	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Загорский завод «Автоспецоборудование»
3.26. Манометр шинный	МД-14-3912200-Г	Предел измерения давления 0,05÷0,3МПа (0,5÷3 кгс/см2) ц.д. 0,01 МПа	Входит в комплект инструмента автомобиля	Минавтопром СССР ЛиАЗ
3. 27. Подъемник канавный	Тип 2 СКМ-5 модель 468	Стационарный, 2-х стоечный, электромеханический	Грозненский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
3.28. Молоток с длинной ручкой	ГОСТ 2310-70	Масса 150 г длина ручки 600 мм
3.29. Кружка с мыльной эмульсией, кисть				Покупное
3. 30. Воздухораздаточная колонка автоматическая	С-401	Стационарная. Давление подводимого воздуха 0,5÷0,8 МПа (5÷8 кгс/см2)	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Бежецкий завод «Автоспецоборудование»
4. Диагностическое оборудование и приборы для Д-1
4.1. Стенд для контроля и регулировки управляемых колес легковых автомобилей	К-111	Стационарный, электрический, точность измерения ±15мин.	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
4. 2. Стенд для проверки тормозов легковых автомобилей	К 208 М	Стационарный, роликовый с принудительным приводом колес автомобиля. Колея проверяемого автомобиля 1100-1800 мм. Нагрузка на ось 2000 кгс;	Новгородское производственное объединение «Автоспецоборудование»
4.3. Стенд для проверки тормозов автомобилей	СПТ2-К259 ТУ 200 РСФСР	Нагрузка на ось 60 кН 5085×1190×680	Челябинский политехнический институт	Челябинский авторемонтный завод Минавтотранс РСФСР
	или СПТ3-К480 ТУ 200 РСФСР	5612×2272×680	То жe	То же
4. 4. Стенд для проверки установки передних колес	СХК-2 или СХК-3	Имитируемая скорость 7 км/час.		Киевский завод «Автотехника»
4.5. Стенд для проверки тормозов	КИ 4998	Допустимая нагрузка на ось 40 кН (4,0 тс)	ГОСНИТИ	Береговский ОЭЗ Госкомсельхозтехника УССР
4. 6. Подъемник канавный передвижной	П-113	Гидравлический, одноплунжерный, с ручным приводом Грузоподъемность 40 кН (4,0 тс)	Грозненский опытно-экспериментальный завод «Автоспецоборудование»
4.7. Воздухораздаточная колонка	С-401	Стационарная Давление подводимого воздуха 0,5-0,8 МПа (5-8 кгс/см2)	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Бежецкий завод «Автоспецоборудование»
4. 8. Прибор для проверки и регулировки фар автомобилей	К-303	Передвижной, оптический с фотометрическим устройством Точность установки фары, мин,: по вертикали ±20 по горизонтали ±90	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Новгородское производственное объединение «Автоспецоборудование»
4.9. Линейка для проверки схождения передних колес	2182	Универсальная, реечная, телескопическая, ход подвижной трубки 170 мм	Казанский ОЭЗ » Автоспецоборудование»
4. 10. Прибор для проверки рулевого управления	К 187	Переносной, ручной. Пределы измерения угломера 0-15°	НИИАТ	Казанский опытно-экспериментальный завод «Автоспецоборудование»
4.11. Установка для проверки рулевых управлений с гидроусилителем	ЦПКТБ K-465	Передвижная, гидравлическая	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Загорский з-д РАСО
4. 12. Газоанализатор	К-456	Для определения содержания СО в отработавших газах	Новгородское д/о РАСО (в настоящее время не выпускается)
	или ГАИ-1	То же		Смоленское п/о «Аналитприбор»
	или ELKON S-105	Для определения процентного СО в пределах от 0-10% цена деления 0,1%		ВНP
	или «Инфралит-Т»	То же		ГДР
4. 13. Измеритель дымности автомобиля	ИДА-106 «Атлас»	Для определения дымности отработавших газов дизельных двигателей		Кировокамский з-д «Автоматика»
4.14. Манометр шинный	ГОСТ 9921-81	Ручной ц.д. 0,2кгс/см2 Предел измерения давления 0,3÷0,9 МПа (3,0÷9,0 кгс/см2)		3-д «Автоэлектроприбор» г.Рига Минавтопром СССР
4. 15. Уровнемерная трубка (из комплекта приборов Э-401)	—	Стеклянная Ø=5 мм l=200 мм	Новгородское производственное объединение «Автоспецоборудование»
4.16. Прибор для проверки натяжения приводных ремней	К-403	Переносной, диапазон измерения: силы прикладываемой к ремню 20-40Н (2-4 кгс.)	НИИАТ	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
4. 17. Прибор для проверки свободного и полного хода педалей	К-446	Переносной, ручной, точность измерения 2,5 мм, масса 0,5 кг, входят в комплект оборудования комплекса K-455М	НИИАТ	Новгородское п/о «Автоспецоборудование»
4.18. Прибор для определения люфтов в трансмиссии	К-428А	Переносной с замером окружных люфтов, масса 2,8 кг	Ленфилиал НИИАТ	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
4. 19. Прибор для проверки переднего моста автомобилей	Т-1	Ручной с измерительным индикатором часового типа ц.д. 0,01 мм	НИИАТ	То же
4.20. Подъемник канавный	П-227	Передвижной, гидравлический, одноплунжерный, с ручным приводом Грузоподъемность 10 кН	Грозненский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
4.21. Линейка измерительная металлическая	300 ГОСТ 427-75	Ц. д. 1,0мм, предел измерения 0-300 мм		Ленинградское объединение «Комплекс»
4.22. Подъемник канавный	Тип 2 СКМ-5 модель 468	Стационарный, 2-х стоечный, электромеханический	Грозненский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
4.23. Манометр шинный	МД-14-3912200-Г	Предел измерения давления 0,05÷0,3 МПа (0,5÷3кгс/см2) ц.д. 0,01МПа	Входит в комплект инструмента автомобиля	Минавтопром СССР ЛиАЗ
4. 24. Секундомер	СМ-60 ГОСТ 5072-72	Ц.д. 0,1 сек. 60с., 60 мин.		2-й часовой з-д г .Москва
5. Диагностическое оборудование и приборы для Д-2
5.1. Стенд для контроля и регулировки управляемых колес легковых автомобилей	К-111	Стационарный, электрический, точность измерения ±15 мин.	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
	или 1119М	Стационарный с оптической измерительной системой	То же	То же
5. 2. Стенд для проверки тормозов легковых автомобилей	К-208М	Стационарный, роликовый с принудительным приводом колес автомобиля. Колея проверяемого автомобиля 1100-1800 мм, нагрузка на ось 2000 кгс	Новгородское производственное объединение «Автоспецоборудование»
5.3. Стенд для определения тягово-экономических показателей легковых автомобилей	К-409М	Входит в комплект К-455М, нагрузка на ось 15кН, (1,5 тс)	То же
5.4. Комплекс диагностического оборудования	К-455M	Площадь размещения комплекса 144 (6×24)м2 Суммарная мощность потребителей тока 1,7 квт.	–»–
5.5.Станция диагностики грузовых автомобилей и автобусов с карбюраторными двигателями	4819B-К-490	Мощность двигателей до 200 кВт (270 л.с.) 5150×2880×1000	Госавтотранс НИИ проект	Киевский опытный завод «Автотехника» Минавтотранс УССР
	или СД-3А К-453	Нагрузка на ось 8,0 т.с, мощность двигателя до 147кВг (200 л.с.)	Челябинский политехнический институт	Челябинский авторемонтный з-д Минавтотранс РСФСР
5.6.Стенд для проверки тормозов автомобилей	СПТ2-К259 ТУ 200 РСФСР	Нагрузка на ось 60 кН (6,0 тс) 5085×1190×680	То же	То же
	или СПТ3-К480 ТУ 200 РСФСР	5612×2272×680	–»–	–»–
5.7.Стенд для проверки установки передних колес	4872	Максимальное боковое усилие 300 Н (30 кгс) погрешность 10 %	ГОСНИТИ	Береговский ОЭЗ Госкомсельхозтехника УССР
5.8. Стенд для проверки тяговых качеств	КИ-8930 (для 3-осных автомобилей)	Максимальное тяговое усилие 5кН (500кгс)		Береговский ОЭЗ Госкомсельхозтехника УССР
5.9. Стенд для проверки тормозов	КИ 4998	Нагрузка на ось 40кН (4,0 тс)		То же
5.10. Подъемник канавный	П-227	Передвижной, гидравлический, одноплунжерный с ручным приводом. Грузоподъемность 10 кН.	Грозненский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
5.11. Подъемник канавный передвижной для грузовых автомобилей	П-113	Передвижной, гидравлический, одноплунжерный, с ручным приводом. Грузоподъемность 40 кН (4,0 тс)	То же	То же
5.12. Подъемник канавный	Тип 2 СКМ5 модель 468	Стационарный, двухстоечный, электромеханический	То же	То же
5.13. Воздухораздаточная колонка автоматическая	C-401	Стационарная, давление подводимого воздуха 0,5-0,8 МПа (5-8 кгс/см2)	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Бежецкий з-д «Автоспецоборудование»
5.14. Прибор для проверки и регулировки фар	К-303	Передвижной, оптический с фотометрическим устройством	То же	Новгородское п/о «Автоспецоборудование»
5.15. Линейка для проверки схождения передних колес	2182	Универсальная, реечная, телескопическая, ход подвижной трубки 170 мм	Казанский опытно-экспериментальный завод «Автоспецоборудование»
5.16. Установка для проверки рулевых управлений с гидроусилителем	ЦПКТБ К-465	Передвижная гидравлическая	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Загорский з-д РАСО
5.17. Газоанализатор	К-456	Для определения содержания СО в отработавших газах	Новгородское п/о РАСО (в настоящее время не выпускается)
	или ГАИ-1	То же	Смоленское п/о «Аналитприбор»
	или ELKON S-105А	Для определения, процентного СО в пределах от 0-10% цена деления 0,1%		ВНР
	или «Инфралит-Т»	То же		ГДР
5.18. Измеритель дымности автомобилей	ИДА-106 «Атлас»	Для определения дымности отработавших газов дизельных двигателей		Кировоканский з-д «Автоматика»
5.19. Манометр шинный	ГОСТ 9921-81	Ручной цена деления 0,2 кгс/см2 предел измерения давления 0,3-0,9 МПа (3,0-9,0 кгс/см2)		З-д «Автоэлектроприбор» г. Рига Минавтопром СССР
5.20. Комплект приборов и инструмента для технического обслуживания аккумуляторных батарей	Э-401	Переносной 350×280×340	Новгородское п/о «Автоспецоборудование»
5.21. Прибор для проверки натяжения приводных ремней	К-403	Переносной диапазон измерения силы, прикладываемой к ремню 20-40 Н (2-4 кгс)	НИИАТ	Казанский опытно-экспериментальный завод «Автоспецоборудование»
5.22. Прибор для проверки свободного и полного хода педалей	К-446	Переносной, ручной, точность измерения 2,5мм, масса 0,5 кг, входит в комплект оборудования комплекса К-455M	НИИАТ	Новгородское п/о «Автоспецоборудование»
5.23. Прибор для определения люфтов трансмиссии	К-428А	Переносной с замером окружных люфтов, масса 2,8 кг	Ленфилиал НИИАТ	Казанский опытно-экспериментальный з-д «Автоспецоборудование»
5.24. Прибор для проверки переднего моста автомобилей	T-1	Ручной с измерительным индикатором часового типа ц.д. 0,01 мм	НИИАТ	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
5.25. Прибор для проверки рулевого управления	K-187	Переносной, ручной, пределы измерения угломера 0-15 град.	НИИАТ	То же
5.26. Анализатор двигателя	К-488	Передвижной, электронный 1000×700×1900	Опытно-экспериментальный завод Новгородского ПО «Автоспецоборудование»
5.27. Прибор для проверки бензонасосов на автомобилях	527Б	Переносной. Пределы измерения по шкале манометра 0-0,1 МПА (0-1 кгс/см2)	НИИАТ	Чистопольский завод «Автоспецоборудование»
5.28. Прибор для определения технического состояния цилиндропоршневой группы автомобильных двигателей	К-69М	Переносной, пневматический	Новгородское п/о «Автоспецоборудование»
5.29. Стетоскоп электронный	КЭО	Переносной		Минавтопром СССР
5.30. Компрессометр для карбюраторных двигателей регистрирующий	K-181	Переносной, с фиксацией максимального давления на бумажном бланке	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
5.31. Компрессометр для дизельных двигателей	K-183	Ручной с фиксацией давления	Казанский ОЭЗ РАСО	То же
5.32. Штангенциркуль	ЩЦ-1-125-01 ГОСТ 166-80	Пределы измерения 0-125 ц.д. 1,0		Завод «Красный инструментальщик» г. Киров
5.33. Набор щупов №2	ГОСТ 882-75	Пределы измерения 0,02-0,5 мм Количество щупов 17
5.34. Комплект ключей динамометрических	К-468	Комплект состоит из трех ключей: -с максимальным крутящим моментом 300 Н.м (30 кгс м) -с максимальным крутящим моментом 150 Н.м (15 кгс м) -ключа для настройки в комплект входят также семь сменных головок.	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
5.35. Секундомер	СМ-60 ГОСТ 5072-72	Ц.д. 0,1 сек. 60с, 60 мин		2-й часовой завод г.Москва
5.36. Линейка измерительная металлическая	300 ГОСТ 427-75	Ц.д. 1,0 мм, предел измерения 0-300 мм		Ленинградское объединение «Комплекс»
5.37. Ломик			Входит в комплект инструмента автомобиля
5.38. Комплект инструмента автомеханика	И-132	В наборе 38 различных инструментов	Казанский опытно-экспериментальный з-д «Автоспецоборудование»
5.39. Набор манометров для проверки тормозной системы автопоездов	1131	В набор входят 3 манометра со специальными наконечниками	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Загорский завод «Автоспецоборудование»
5.40. Манометр шинный	МД-14-3912200-Г	Предел измерения давления 0,05-0,3 МПА (0,5-3 кгс/см2) ц.д. 0,01МПа	Входит в комплект инструмента автомобиля	Минавтовром СССР ЛиАЗ
6. Оборудование и приборы, используемые после ремонта на участках
6.1. Стенд обкаточно-тормозной для обкатки двигателей	КИ-1363	Наибольшая тормозная мощность 73,5 kBт, (100 л.с.)	ГОСНИТИ	Измаильский ремонтный з-д Госкомсельхозтехника УССР
	или КИ-2139-Б	Наибольшая тормозная мощность 110,2 кВт (150 л.с.)	ГОСНИТИ	Измаильский ремонтный з-д Госкомсельхозтехиика УССР
	или КИ-2118А	Наибольшая тормозная мощность 206 кВт (280 л.с.)	То же	То же
6.2. Стенд для испытания КПП ГАЗ-24	ИК-29	Стационарный, габариты, мм: 1460×240×1120	ПТБ Главленавтотранс	Собственного изготовления
6.3. Стенд для обкатки и испытания ГМП автобусов ЛиАЗ-677	Ст-14	Стационарный, электромеханический, габариты, мм: 3500×900×1250	КТБ ЮУТТУ	То же
6.4. Стенд для испытания коробок передач	ОН-390	Электромеханический с электротормозом: габариты, мм 2500×556×985	КТБ Минавтотранс БССР	То же
6.5. Стенд для проверки пневмооборудования автомобилей	К-203	Стационарный, пневматический. Габариты, мм: 1100×835×1300	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Загорский з-д «Автоспецоборудование»
6.6. Стенд для контроля рулевых управлений с гидроусилителем	K-155	Стационарный, гидравлический. Габариты, мм: 910×730×1280	То же	То же
6.7. Контрольно-испытательный стенд для проверки генераторов, реле-регулятора и стартеров	532М	Стационарный, мощность электродвигателя 4,0 кВт, габариты, мм: 985×360×1605	Новгородское п/о «Автоспецоборудование»
6.8. Прибор для проверки карбюраторов и топливных насосов бензиновых двигателей	НИИАТ-5276	Настольный, габариты, мм: 365×320×500 масса 20 кг	НИИАТ	Киевский з-д нестандартного оборудования Минавтотранс УССР
6.9. Стенд для испытания ТНВД	Стар 12 или Стар 12Ц	Стационарный, габариты 1500×700×1900	ВНР	ВНР
	или Минор-8/Б	Габариты, мм: 1050×500×1780	То же	То же
6.10. Прибор для испытания форсунок	Супер-3	Габариты, мм: 390×300×330	–»–	–»–
	НЦ-50	Габаритны, мм: 520×520	ЧССР	ЧССР
6.11. Установка для проверки карбюраторов	НИАТ-489А	Стационарная, вакуумная габариты, мм машинной секции 1000×1700×3000 операторской секции 1300×630×3000	НИИАТ	Свирский з-д РАСО
6.12. Комплект приборов и инструмента технического обслуживания аккумуляторных батарей	Э-401	Переносной Комплект состоит (из 15 предметов)	Новгородское в/о «Автоспецоборудование»
6.13. Прибор для проверки якорей генераторов и стартеров	Э-236	Переносной, индукционный Диаметр проверяемых якорей, мм от 25 до 180	Новгородское в/о «Автоспецоборудование»
6.1. Комплект изделия для очистки и проверки свечей зажигания	Э-203	Тип приспособления настольное, пневматическое, а прибора – настольный, пневмоэлектрический	То же	То же
7. Оборудование и приборы, используемые на постах текущего ремонта
7.1. Стенд для контроля и регулировки управляемых колес легковых автомобилей	К-111	Стационарный, электрический, точность измерения ±15 мин	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
	или 1119М	Стационарный с оптической измерительной системой	То же	То же
7.2. Стенд дли проверки установки передних колёс	4872	Максимальное боковое усилие 300 Н (30 кгс) погрешность 10%	ГОСНИТИ	Береговский ОЭЗ Госкомсельхозтехника УССР
7.3. Линейка для проверки схождения передних колес	2182	Универсальная, реечная, телескопическая, ход подвижной трубки 170 мм	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
7.4. Прибор для проверки и регулировки фар	К-303	Передвижной оптический с фотометрическим устройством	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Новгородское п/о «Автоспецоборудование»
7.5. Набор манометров для проверки тормозной системы	1131	В набор входят три манометра со специальными наконечниками.	То же	Загорский завод «Автоспецоборудование»
7.6. Установка для проверки рулевых управлений с гидроусилителем	ЦПКТБ К-465	Передвижная гидравлическая	–»–	–»–
7.7. Прибор для проверки переднего моста автомобилей	Т-1	Ручной с измерительным индикатором часового типа цена деления 0,01 мм	НИИАТ	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
7.8. Прибор для проверки рулевого управления	K-187	Переносной, ручной, пределы измерения угломера 0-15 град.	НИИАТ	То же
7.9. Анализатор двигателя	К-488	Передвижной электронный 1000×700×1900	ОЭЗ Новгородского п/о «Автоспецоборудование»
7.10. Штангенциркуль	ЩЦ-1-125-01 ГОСТ 166-80	Предел измерения 0-125 т ц.д. 1,0 мм.		3-д «Красный инструментальщик» г.Киров
7.11. Набор щупов №2	ГОСТ 882-75	Пределы толщины 0,02-0,5 мм., количество пупов 17
7.12. Комплект ключей динамометрических	К-468	Комплект состоит из трех ключей: -с максимальным крутящим моментом 300 Н.м (30 кгс м) -с максимальным крутящим моментом 150 Н.м (15 кгс м) -ключа для настройки в комплект входят также семь сменных головок.	ЦПКТБ «Автоспецоборудование»	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
7.13. Секундомер	СМ-60 ГОСТ 5072-72	Ц.д. 0,1 сек 60с, 60 мин		2-й часовой завод г. Москва
7.14. Линейка измерительная металлическая	300 ГОСТ 427-75	ц,д. 1,0 мм, предел измерения 0-300 мм		Ленинградское объединение «Комплекс»
7.15. Прибор для проверки натяжения приводных ремней	К-403	Переносной, диапазон измерений силы, прикладываемой к ремню 20-40Н (2-4 кгс)	НИИАТ	Казанский ОЭЗ «Автоспецоборудование»
7.16. Ломик			Входит в комплект инструмента автомобиля
7.17. Манометр шинный	МД-1А-3912200-Г	Предел измерения давления 0,05-0,3 МПа (0,5-3 кгс/см2) ц.д. 0,01 МПа	Входит в комплект инструмента автомобиля	Минавтопром СССР ЛиАЗ
7.16. Манометр шинный	ГОСТ ЙШ<-81	Ручной ц. деления 0,2 кгс/см2, предел измерения 0,3-0,9 МПа (3,0-9,0 кгс/см2)		3-д «Автоэлектроприбор» г. Рига Минавтопром СССР

Таблица ATP — Теннис — Eurosport

1	Новак Джокович	11 430
2	Даниил Медведев	9 630
3	Стефанос Циципас	7 995
4	Александр Зверев	6 930
5	Рафаэль Надаль	5 635
6	Андрей Рублев	5 560
7	Маттео Берреттини	4 858
8	Доминик Тим	3 815
9	Каспер Рууд	3 615
10	Хуберт Хуркач	3 378
11	Роджер Федерер	3 285
12	Феликс Оже-Альяссим	3 263
13	Диего Шварцман	2 970
14	Денис Шаповалов	2 903
15	Кэмерон Норри	2 895
16	Янник Синнер	2 895
17	Кристиан Гарин	2 510
18	Пабло Каррено	2 445
19	Гаэль Монфис	2 383
20	Роберто Баутиста	2 270
21	Григор Димитров	2 231
22	Аслан Карацев	2 154
23	Даниэль Эванс	2 144
24	Лоренцо Сонего	2 125
25	Райлли Опелка	2 071
26	Алекс Де Минаур	2 071
27	Николоз Басилашвили	2 066
28	Юго Умбер	2 045
29	Джон Изнер	2 001
30	Тэйлор Фритц	1 810
31	Карен Хачанов	1 718
32	Ллойд Харрис	1 640
33	Душан Лайович	1 556
34	Фабио Фоньини	1 529
35	Александр Бублик	1 516
36	Давид Гоффен	1 516
37	Филип Крайинович	1 472
38	Себастьян Корда	1 469
39	Мартон Фучович	1 459
40	Федерико Дельбонис	1 370
41	Марин Чилич	1 365
42	Карлос Алькарас	1 355
43	Илья Ивашко	1 330
44	Алехандро Давидович Фокина	1 325
45	Альберт Рамос	1 294
46	Милош Раонич	1 289
47	Бенуа Пэр	1 270
48	Френсис Тиафо	1 217
49	Кэй Нисикори	1 210
50	Ян-Леннард Штруфф	1 201
51	Адриан Маннарино	1 144
52	Джеймс Дакуорт	1 139
53	Ласло Джере	1 137
54	Томми Пол	1 128
55	Маккензи Макдональд	1 117
56	Сунву Квон	1 115
57	Стэн Вавринка	1 092
58	Маркос Гирон	1 071
59	Кевин Андерсон	1 034
60	Педро Мартинес	1 031
61	Ботик Ван де Зандсхулп	1 029
62	Джон Миллман	1 023
63	Бенджамин Бонци	1 022
64	Доминик Кёпфер	1 015
65	Артур Риндеркнех	965
66	Борна Чорич	964
67	Джанлука Магер	954
68	Федерико Кориа	950
69	Лоренцо Музетти	948
70	Дженсон Бруксби	947
71	Миомир Кечманович	936
72	Джордан Томпсон	930
73	Ришар Гаске	921
74	Алексей Попырин	912
75	Эмиль Руусувуори	903
76	Джауме Мунар	901
77	Иржи Веселы	897
78	Йосихито Нисиока	885
79	Брэндон Накасима	884
80	Роберто Карбаллес	882
81	Факундо Баньис	877
82	Гвидо Пелья	866
83	Стефано Травалья	850
84	Корентен Муте	848
85	Петер Гоёвчик	847
86	Вашек Поспишил	835
87	Жереми Шарди	829
88	Стив Джонсон	822
89	Таллон Грикспур	812
90	Альяж Бедене	807
91	Денис Кудла	807
92	Тьяго Монтейро	805
93	Пабло Андухар	800
94	Сэм Куэрри	795
95	Ник Кирьос	793
96	Теннис Сандгрен	773
97	Пьер-Юж Эрбер	770
98	Андреас Сеппи	767
99	Генри Лааксонен	762
100	Пабло Куэвас	760
101	Микаэль Имер	757
102	Хуан Мануэль Серундоло	753
103	Норберт Гомбос	750
104	Марко Чеккинато	746
105	Уго Гастон	742
106	Даниэль Галан	735
107	Ричардас Беранкис	733
108	Фелисиано Лoпес	730
109	Егор Герасимов	724
110	Даниэль Альтмайер	722
111	Карлос Табернер	713
112	Алекс Молчан	694
113	Кайл Эдмунд	691
114	Деннис Новак	681
115	Филипп Кольшрайбер	678
116	Франсиско Серундоло	676
117	Жиль Симон	669
118	Андрей Мартин	662
119	Камиль Майхрзак	660
120	Раду Албот	655
121	Таро Даниэль	654
122	Бернабе Сапата	647
123	Хольгер Руне	645
124	Себастьян Баез	631
125	Лиам Броуди	616
126	Тьяго Уайлд	609
127	Янник Ханфманн	594
128	Уго Дельен	584
129	Хуан Пабло Варильяс	581
130	Аттила Балаж	557
131	Оскар Отте	534
132	Юрий Родионов	524
133	Фернандо Вердаско	521
134	Алекс Болт	521
135	Сальваторе Карузо	514
136	Йозеф Ковалик	513
137	Дамир Джумхур	511
138	Томас Этчеверри	511
139	Юити Сагита	509
140	Томаш Мачак	509
141	Зденек Коларж	508
142	Никола Милоевич	506
143	Максим Кресси	494
144	Педро Соуса	483
145	Томас Барриос	472
146	Кристофер О’Коннелл	467
147	Михаил Кукушкин	466
148	Митчелл Крюгер	458
149	Евгений Донской	456
150	Кентен Алис	448
151	Эмилио Гомес	447
152	Федерико Гайо	444
153	Марк Полманс	443
154	Антуан Хоан	439
155	Марк-Андреа Хюслер	439
156	Себастьян Офнер	439
157	Джек Сок	438
158	Люка Пуй	435
159	Матс Морайнг	433
160	Роман Сафиуллин	432
161	Джейсон Юнг	432
162	Элиас Имер	431
163	Дмитрий Попко	430
164	Илья Марченко	429
165	Алтуг Челикбилек	428
166	Джем Илькель	427
167	Эрнесто Эскобедо	422
168	Грегур Баррер	421
169	Каспер Жук	421
170	Хуан Лондеро	420
171	Иржи Лехечка	414
172	Энди Маррей	411
173	Жо-Вильфрид Тсонга	408
174	Алехандро Табило	407
175	Макс Пёрселл	403
176	Жоау Соуза	400
177	Бьорн Фратанджело	400
178	Танаси Коккинакис	394
179	Праджнеш Гуннесваран	393
180	Марио Вилелья	391
181	Ясутака Утияма	390
182	Седрик-Марсель Штебе	390
183	Блаж Рола	390
184	Кристофер Юбенкс	385
185	Мохаммед Сафват	382
186	Зизу Бергс	378
187	Фелипе Мелигени	371
188	Уго Гренье	371
189	Димитар Кузманов	367
190	Энцо Коко	366
191	Рамкумар Раманатан	361
192	Александар Вукич	357
193	Ренцо Оливо	357
194	Джей Кларк	354
195	Жеффри Вулф	349
196	Эрнест Гулбис	348
197	Филип Горански	346
198	Максимилиан Мартерер	342
199	Марко Трунхеллити	341
200	Вит Коприва	340
201	Роберто Маркора	338
202	Николас Ярри	336
203	Джанмарко Морони	336
204	Алессандро Джаннези	335
205	Фредерико Силва	333
206	Тиаго Тиранте	331
207	Александр Мюллер	325
208	Констан Лестьенн	321
209	Лукаш Лацко	319
210	Франко Агаменоне	318
211	Лоренцо Джустино	316
212	Киммер Коппеянс	312
213	Джейсон Каблер	308
214	Камило Уго	307
215	Сумит Нагал	302
216	Микаэль Торпегор	300
217	Виктор Троицки	297
218	Андреа Пеллегрино	297
219	Флавио Коболли	295
220	Рубен Бемельманс	293
221	Майкл Ммох	288
222	Гастао Элиаш	287
223	Брэйден Шнур	283
224	Жоау Домингеш	283
225	Жоао Менезес	283
226	Томас Фаббиано	282
227	Сергей Стаховский	281
228	Матиас Бург	280
229	Робин Хасе	279
230	Иво Карлович	277
231	Денис Истомин	277
232	Тай-Сон Квятковски	275
233	Максим Жанвье	275
234	Факундо Мена	274
235	Чжичжэнь Чжан	270
236	Мэттью Эбден	266
237	Тим ван Рийтховен	265
238	Лукаш Клейн	265
239	Йеспер Де Йонг	263
240	Даниэль Мазур	262
241	Го Соэда	259
242	Тобиас Камке	257
243	Мартин Клижан	254
244	Нино Сердарушич	254
245	Борна Гойо	253
246	Йосукэ Ватануки	252
247	Чжуньсин Цзэн	250
248	Улисес Бланч	249
249	Никола Кун	248
250	Джулио Зеппиери	246
251	Виталий Сачко	246
252	Стефан Козлов	244
253	Дуже Айдукович	242
254	Татсума Ито	239
255	Мирза Башич	237
256	Тунлин Ву	234
257	Паоло Лоренци	232
258	Бернард Томич	231
259	Николас Киккер	231
260	Мануэль Гинар	229
261	Стивен Диез	228
262	Доминик Штрикер	225
263	Блаж Кавчич	223
264	Александер Ричард	223
265	Андреа Колларини	223
266	Педро Качин	223
267	Теймураз Габашвили	223
268	Нуну Боржеш	222
269	Тимофей Скатов	222
270	Гуидо Андреоцци	213
271	Маттиас Бахингер	213
272	Тристан Ламасин	213
273	Андреа Арнабольди	212
274	Павел Котов	212
275	Лукаш Росол	210
276	Хуан Пабло Фикович	209
277	Кристиан Харрисон	208
278	Данило Петрович	207
279	Евгений Карловский	204
280	Эван Фюрнесс	204
281	Роберто Сид	202
282	Джек Дрэйпер	198
283	Питер Полански	196
284	Джеффри Бланкано	194
285	Леонардо Майер	193
286	Николас Мейя	192
287	Матеус Пучинелли	188
288	Орландо Луж	188
289	Рикардо Бонадио	184
290	Маттео Виола	183
291	Андрей Кузнецов	181
292	Янник Маден	181
293	Роберто Кирос	180
294	Мариус Копил	179
295	Чжэ Ли	179
296	Хавьер Барранко	179
297	Малек Жазири	176
298	Андреа Вавассори	176
299	Хироки Мория	176
300	Эндрю Харрис	174

Объекты недвижимости — Комитет имущественных отношений Санкт-Петербурга

Информация об объектах, в том числе свободных, включенных в Схему НТО для размещения передвижных средств развозной торговли (специализированные или специально оборудованные для розничной торговли, механические транспортные средства производителей хлебобулочных изделий, молочной, мясной и рыбной продукции).

Копия АТП необходима пользователям помещений для:

а) заключения договора энергоснабжения с энергосбытовой организацией.

Со стороны АО «Петербургская сбытовая компания» работа по заключению договора энергоснабжения с потребителями-арендаторы помещений, собственниками которых является Санкт-Петербург, будет проводиться в первоочередном порядке. В этой связи между АО «ПСК» и ПАО «Ленэнерго» налажено информационное взаимодействие, в рамках которого АО «ПСК» вправе самостоятельно запрашивать сведения о присоединении. (Таким образом, заверять АТП печатью Комитета не требуется).

Также не требуется переоформление АТП непосредственно на арендатора, достаточно предоставления в АО «ПСК» договора аренды/безвозмездного пользования, подтверждающего право владения Объектом.

б) для заключения договора с ПАО «Ленэнерго» о технологическом присоединении дополнительной мощности.

В этом случае АТП подтверждает существующую выделенную на Объект мощность в дополнение к которой пользователь Объекта может присоединить мощность, необходимую для ведения своей деятельности. (Заверение копий также не требуется, так как ПАО «Ленэнерго» обладает оригиналом данного документа.)

 

Инженерные сооружения

По вопросу возможности аренды сооружения необходимо обращаться к правообладателю.

Сдача в аренду объектов (их частей) возможна в целях обеспечения более эффективной организации основной деятельности учреждения, для которой оно создано, рационального использования такого имущества.

Physiology, Аденозинтрифосфат — StatPearls

Введение

Тело — сложный организм, и поэтому для поддержания его надлежащего функционирования требуется энергия. Аденозинтрифосфат (АТФ) является источником энергии для использования и хранения на клеточном уровне. Структура АТФ представляет собой нуклеозидтрифосфат, состоящий из азотистого основания (аденина), рибозного сахара и трех последовательно связанных фосфатных групп. АТФ обычно называют «энергетической валютой» клетки, поскольку он обеспечивает легко высвобождаемую энергию в связи между второй и третьей фосфатными группами.Помимо обеспечения энергией, расщепление АТФ посредством гидролиза служит широкому спектру функций клетки, включая передачу сигналов и синтез ДНК / РНК. В синтезе АТФ используется энергия, полученная из нескольких катаболических механизмов, включая клеточное дыхание, бета-окисление и кетоз.

Большая часть синтеза АТФ происходит в клеточном дыхании в митохондриальном матриксе: генерируется примерно тридцать две молекулы АТФ на молекулу окисляемой глюкозы. АТФ расходуется для получения энергии в процессах, включая перенос ионов, сокращение мышц, распространение нервных импульсов, фосфорилирование субстрата и химический синтез.Эти, как и другие процессы, создают высокий спрос на АТФ. В результате клетки человеческого тела зависят от гидролиза от 100 до 150 моль АТФ в день для обеспечения правильного функционирования. В следующих разделах АТФ будет подвергаться дальнейшей оценке своей роли как решающей молекулы в повседневном функционировании клетки.

Cellular

АТФ — прекрасная молекула для хранения энергии, которую можно использовать в качестве «валюты» из-за фосфатных групп, которые связываются через фосфодиэфирные связи.Эти связи имеют высокую энергию из-за связанных с ними электроотрицательных зарядов, оказывающих отталкивающую силу между фосфатными группами. Значительное количество энергии остается внутри фосфатно-фосфатных связей. В ходе метаболических процессов АТФ гидролизуется до АДФ или далее до АМФ и свободных неорганических фосфатных групп. Процесс гидролиза АТФ до АДФ является энергетически выгодным, давая энергию Гиббса -7,3 кал / моль [1]. АТФ должен постоянно пополняться, чтобы питать постоянно работающий элемент.Обычная внутриклеточная концентрация АТФ составляет от 1 до 10 мкМ [2]. Существует множество механизмов обратной связи, чтобы гарантировать поддержание постоянного уровня АТФ в клетке. Усиление или ингибирование АТФ-синтазы является обычным регуляторным механизмом. Например, АТФ ингибирует фосфофруктокиназу-1 (PFK1) и пируваткиназу, два ключевых фермента в гликолизе, эффективно действуя как петля отрицательной обратной связи для подавления распада глюкозы при наличии достаточного клеточного АТФ.

И наоборот, АДФ и АМФ могут активировать PFK1 и пируваткиназу, способствуя синтезу АТФ во время высокой потребности в энергии.Другие системы регулируют АТФ, например, в регуляторных механизмах, участвующих в регуляции синтеза АТФ в сердце. Новые эксперименты показали, что десятисекундные всплески, называемые митохондриальными вспышками, могут нарушить производство АТФ в сердце. Во время этих митохондриальных вспышек митохондрии выделяют активные формы кислорода и эффективно приостанавливают синтез АТФ. Подавление продукции АТФ происходит во время митохондриальных вспышек. Во время низкого спроса на энергию, когда клетки сердечной мышцы получали достаточно строительных блоков, необходимых для производства АТФ, митохондриальные вспышки наблюдались чаще.С другой стороны, когда потребность в энергии высока во время быстрого сердечного сокращения, митохондриальные вспышки происходят реже. Эти результаты свидетельствуют о том, что в периоды, когда необходимо значительное количество АТФ, митохондриальные вспышки происходят реже, что позволяет продолжать производство АТФ. И наоборот, в периоды низкой выработки энергии митохондриальные вспышки происходили более регулярно и подавляли выработку АТФ. [3]

Функция

Гидролиз АТФ обеспечивает энергию, необходимую для многих важных процессов в организмах и клетках.К ним относятся внутриклеточная передача сигналов, синтез ДНК и РНК, пуринергическая передача сигналов, синаптическая передача сигналов, активный транспорт и сокращение мышц. Эти темы не являются исчерпывающим списком, но включают некоторые из жизненно важных ролей, которые выполняет ATP.

АТФ в внутриклеточной передаче сигналов

Передача сигналов в значительной степени зависит от АТФ. АТФ может служить субстратом для киназ, самого многочисленного АТФ-связывающего белка. Когда киназа фосфорилирует белок, может активироваться сигнальный каскад, что приводит к модуляции различных внутриклеточных сигнальных путей.[4] Активность киназы жизненно важна для клетки и, следовательно, должна строго регулироваться. Присутствие иона магния помогает регулировать активность киназы. [5] Регуляция осуществляется посредством ионов магния, существующих в клетке в виде комплекса с АТФ, связанного с фосфатно-кислородными центрами. Помимо киназной активности, АТФ может действовать как повсеместный триггер высвобождения внутриклеточного мессенджера. [6] Эти посредники включают гормоны, различные ферменты, липидные медиаторы, нейротрансмиттеры, оксид азота, факторы роста и активные формы кислорода.[6] Пример использования АТФ во внутриклеточной передаче сигналов можно наблюдать в АТФ, действующем как субстрат для аденилатциклазы. Этот процесс в основном происходит в сигнальных путях рецепторов, связанных с G-белками. Связываясь с аденилатциклазой, АТФ превращается в циклический АМФ, который помогает высвобождать кальций из внутриклеточных запасов [7]. ЦАМФ играет и другие роли, включая вторичные мессенджеры в гормональных сигнальных каскадах, активацию протеинкиназ и регулирование функции ионных каналов.

Синтез ДНК / РНК

Для синтеза ДНК и РНК требуется АТФ. АТФ — один из четырех нуклеотидтрифосфатных мономеров, необходимых во время синтеза РНК. В синтезе ДНК используется аналогичный механизм, за исключением того, что в синтезе ДНК АТФ сначала трансформируется путем удаления атома кислорода из сахара с образованием дезоксирибонуклеотида, дАТФ. [8]

Пуринергическая сигнализация

Пуринергическая передача сигналов — это форма внеклеточной паракринной передачи сигналов, которая опосредуется пуриновыми нуклеотидами, включая АТФ.Этот процесс обычно влечет за собой активацию пуринергических рецепторов на близлежащих клетках, тем самым передавая сигналы для регулирования внутриклеточных процессов. АТФ высвобождается из везикулярных хранилищ и регулируется IP3 и другими общими экзоцитотическими регуляторными механизмами. АТФ совместно хранится и совместно высвобождается среди нейротрансмиттеров, что дополнительно подтверждает мнение о том, что АТФ является необходимым медиатором пуринергической нейротрансмиссии как в симпатических, так и в парасимпатических нервах. АТФ может вызывать несколько пуринергических реакций, включая контроль вегетативных функций, взаимодействия нервной глии, боль и контроль тонуса сосудов.[9] [10] [11] [12]

Нейротрансмиссия

Мозг является самым большим потребителем АТФ в организме, потребляя примерно двадцать пять процентов всей доступной энергии. [13] Большое количество энергии тратится на поддержание концентраций ионов для правильной нейрональной передачи сигналов и синаптической передачи. [14] Синаптическая передача — это энергоемкий процесс. На пресинаптическом конце АТФ необходим для установления ионных градиентов, которые доставляют нейротрансмиттеры в пузырьки, и для примирования пузырьков для высвобождения посредством экзоцитоза.[14] Нейрональная передача сигналов зависит от потенциала действия, достигающего пресинаптического конца, сигнализируя о высвобождении загруженных везикул. Этот процесс зависит от АТФ, восстанавливающего концентрацию ионов в аксоне после каждого потенциала действия, позволяя появиться другому сигналу. Активный транспорт отвечает за возврат концентраций ионов натрия и калия к исходным значениям после того, как потенциал действия возникает через Na / K-АТФазу. Во время этого процесса одна молекула АТФ гидролизуется, три иона натрия транспортируются из клетки, а два иона калия транспортируются обратно в клетку, оба из которых движутся против своих градиентов концентрации.

Потенциалы действия, движущиеся вниз по аксону, инициируют высвобождение везикул при достижении пресинаптического терминала. После установления ионных градиентов потенциалы действия затем распространяются вниз по аксону через деполяризацию аксона, посылая сигнал к терминалу. Приблизительно один миллиард ионов натрия необходим для распространения единственного потенциала действия. Нейронам необходимо будет гидролизовать почти один миллиард молекул АТФ, чтобы восстановить концентрацию ионов натрия / калия после каждой деполяризации клетки.[13] Возбуждающие синапсы в основном доминируют в сером веществе мозга. Везикулы, содержащие глутамат, будут выпущены в синаптическую щель для активации постсинаптических возбуждающих глутаминергических рецепторов. Загрузка этих молекул требует большого количества АТФ из-за того, что почти четыре тысячи молекул глутамата хранятся в одной везикуле. [13] Значительные запасы энергии необходимы, чтобы инициировать высвобождение везикулы, управлять глутаматергическими постсинаптическими процессами и рециркулировать везикулу, а также оставшийся глутамат.[13] Таким образом, из-за большого количества энергии, необходимой для упаковки глутамата, митохондрии близки к глутаматергическим пузырькам. [15]

АТФ в сокращении мышц

Сокращение мышц является необходимой функцией повседневной жизни и не может происходить без АТФ. В сокращении мышц АТФ выполняет три основные роли. Первый — это создание силы против прилегающих актиновых нитей через циклическое движение миозиновых поперечных мостиков.Второй — перекачка ионов кальция из миоплазмы через саркоплазматический ретикулум против градиентов их концентрации с использованием активного транспорта. Третья функция, выполняемая АТФ, — это активный транспорт ионов натрия и калия через сарколемму, так что ионы кальция могут высвобождаться при получении входных данных. Гидролиз АТФ управляет каждым из этих процессов. [16]

Механизм

Многие процессы способны производить АТФ в организме в зависимости от текущих метаболических условий.Производство АТФ может происходить в присутствии кислорода в результате клеточного дыхания, бета-окисления, кетоза, катаболизма липидов и белков, а также в анаэробных условиях.

Клеточное дыхание

Клеточное дыхание — это процесс катаболизма глюкозы в ацетил-КоА с образованием высокоэнергетических носителей электронов, которые будут окисляться во время окислительного фосфорилирования с образованием АТФ. Во время гликолиза, первой стадии клеточного дыхания, одна молекула глюкозы распадается на две молекулы пирувата.Во время этого процесса два АТФ продуцируются посредством фосфорилирования субстрата ферментами PFK1 и пируваткиназой. Также происходит образование двух восстановленных молекул-переносчиков электронов НАДН. Затем молекулы пирувата окисляются комплексом пируватдегидрогеназы, образуя молекулу ацетил-КоА. Затем молекула ацетил-КоА полностью окисляется с образованием диоксида углерода и восстановленных переносчиков электронов в цикле лимонной кислоты. По завершении цикла лимонной кислоты общий выход составляет две молекулы диоксида углерода, один эквивалент АТФ, три молекулы NADH и одну молекулу FADh3.Эти высокоэнергетические переносчики электронов затем переносят электроны в цепь переноса электронов, в которой ионы водорода (протоны) переносятся против своего градиента во внутреннее мембранное пространство из митохондриальной матрицы. Затем молекулы АТФ синтезируются в виде протонов, движущихся вниз по электрохимическому градиенту мощности АТФ-синтазы. [9] Количество произведенного АТФ варьируется в зависимости от того, какой электронный носитель отдал протоны. Одна молекула НАДН производит два с половиной АТФ, тогда как одна молекула FADh3 производит полторы молекулы АТФ.[17]

Бета-окисление

Бета-окисление — еще один механизм синтеза АТФ в организмах. Во время бета-окисления цепи жирных кислот постоянно укорачиваются, давая молекулы ацетил-КоА. На протяжении каждого цикла бета-окисления жирная кислота восстанавливается на две длины углерода, образуя одну молекулу ацетил-КоА, которая может окисляться в цикле лимонной кислоты, и по одной молекуле каждого из NADH и FADh3, которые передают свою высокую энергию. электрон в транспортную цепочку.[18]

Кетоз

Кетоз — это реакция, при которой в результате катаболизма кетоновых тел выделяется АТФ. Во время кетоза кетоновые тела подвергаются катаболизму для производства энергии, генерируя двадцать две молекулы АТФ и две молекулы ГТФ на молекулу ацетоацетата, которая окисляется в митохондриях.

Анаэробное дыхание

Когда во время клеточного дыхания кислород недостаточен или недоступен, клетки могут подвергаться анаэробному дыханию. В анаэробных условиях происходит накопление молекул НАДН из-за неспособности окислять НАДН до НАД +, что ограничивает действие ГАФД и потребление глюкозы.Для поддержания гомеостатического уровня НАДН пируват восстанавливается до лактата, что приводит к окислению одной молекулы НАДН в процессе, известном как молочная ферментация. При молочной ферментации две молекулы НАДН, образовавшиеся при гликолизе, окисляются для поддержания резервуара НАД +. Эта реакция производит только две молекулы АТФ на молекулу глюкозы.

Сопутствующее тестирование

Многие методы позволяют рассчитать внутриклеточные уровни АТФ. Общепринятый протокол включает использование люциферазы светлячков, фермента, который вызывает окисление люциферина.[19] Эта реакция поддается количественному определению из-за выхода энергии этой реакции, высвобождающего фотон света, известного как биолюминесценция, который поддается количественному определению.

Клиническая значимость

Роль АТФ в обезболивании

АТФ демонстрирует уменьшение острой периоперационной боли в клинических исследованиях [20]. В этих исследованиях пациенты получали АТФ внутривенно. Внутривенное введение аденозина воздействует на рецептор аденозина A1, инициируя сигнальный каскад, который в конечном итоге способствует обезболивающему эффекту, наблюдаемому при воспалении.Исследования показали, что соединения аденозина уменьшают аллодинию и гипералгезию при введении в умеренных дозах [20]. Активация аденозинового рецептора A1 оказывает эффективное обезболивающее благодаря медленному началу и длительному действию, которое в некоторых случаях может длиться несколько недель [20].

Анестезия

Добавление АТФ дало положительные результаты во время анестезии. Данные показывают, что низкие дозы аденозина уменьшают нейропатическую боль, ишемическую боль и гипералгезию до уровня, сопоставимого с морфином.[21] Аденозин также снизил потребление опиоидов в послеоперационном периоде, что указывает на потенциальную длительную активацию аденозинового рецептора A1.

Кардиология и хирургия

Было продемонстрировано, что АТФ является безопасным и практичным легочным вазодилататором у пациентов, страдающих легочной гипертензией. [21] Точно так же аденозин и АТФ могут использоваться во время операции для индукции гипотензии у пациентов. [21]

Ссылки

1.

Meurer F, Do HT, Sadowski G, Held C.Стандартная энергия Гиббса метаболических реакций: II. Глюкозо-6-фосфатазная реакция и гидролиз АТФ. Biophys Chem. 2017 Апрель; 223: 30-38. [PubMed: 28282626]

2.

Beis I, Newsholme EA. Содержание адениновых нуклеотидов, фосфагенов и некоторых гликолитических промежуточных продуктов в мышцах покоя позвоночных и беспозвоночных. Biochem J. 1975 Oct; 152 (1): 23-32. [Бесплатная статья PMC: PMC1172435] [PubMed: 1212224]

3.

Wang X, Zhang X, Wu D, Huang Z, Hou T, Jian C, Yu P, Lu F, Zhang R, Sun T, Li J , Ци В., Ван И, Гао Ф, Ченг Х.Митохондриальные вспышки регулируют гомеостаз АТФ в сердце. Элиф. 2017 10 июля; 6 [Бесплатная статья PMC: PMC5503511] [PubMed: 28692422]

4.

Мишра Н.С., Тутея Р., Тутея Н. Передача сигналов через сети MAP-киназ в растениях. Arch Biochem Biophys. 01 августа 2006 г .; 452 (1): 55-68. [PubMed: 16806044]

5.

Lin X, Ayrapetov MK, Sun G. Характеристика взаимодействий между активным центром протеинтирозинкиназы и активатором двухвалентного металла. BMC Biochem. 2005 23 ноября; 6:25.[Бесплатная статья PMC: PMC1316873] [PubMed: 16305747]

6.

Циммерманн Х. Внеклеточный АТФ и другие нуклеотиды — повсеместные триггеры высвобождения межклеточного мессенджера. Пуринергический сигнал. 2016 Март; 12 (1): 25-57. [Бесплатная статья PMC: PMC4749530] [PubMed: 26545760]

7.

Каменецкий М., Миддельхауф С., Банк Е.М., Левин Л.Р., Бак Дж., Стигборн С. Молекулярные детали генерации цАМФ в клетках млекопитающих: история двух систем . J Mol Biol. 2006 29 сентября; 362 (4): 623-39. [Бесплатная статья PMC: PMC3662476] [PubMed: 16934836]

8.

Джойс К.М., Стейтц ТА. Полимеразные структуры и функции: вариации на тему? J Bacteriol. 1995 ноя; 177 (22): 6321-9. [Бесплатная статья PMC: PMC177480] [PubMed: 7592405]

9.

Bonora M, Patergnani S, Rimessi A, De Marchi E, Suski JM, Bononi A, Giorgi C, Marchi S, Missiroli S, Poletti F, Wieckowski MR, Пинтон П. Синтез и хранение АТФ. Пуринергический сигнал. 2012 сентябрь; 8 (3): 343-57. [Бесплатная статья PMC: PMC3360099] [PubMed: 22528680]

10.

Cárdenas C, Miller RA, Smith I, Bui T, Molgó J, Müller M, Vais H, Cheung KH, Yang J, Parker I, Thompson CB , Бирнбаум MJ, Hallows KR, Foskett JK.Существенная регуляция биоэнергетики клетки путем конститутивного переноса Ca2 + рецептора InsP3 в митохондрии. Клетка. 23 июля 2010 г .; 142 (2): 270-83. [Бесплатная статья PMC: PMC2911450] [PubMed: 20655468]

11.

Pablo Huidobro-Toro J, Verónica Donoso M. Сопутствующая трансмиссия: координированное действие АТФ и норадреналина и их модуляция нейропептидом Y в сосудистом нейроэффекторе человека переходы. Eur J Pharmacol. 2004 Октябрь 01; 500 (1-3): 27-35. [PubMed: 15464018]

12.

Coco S, Calegari F, Pravettoni E, Pozzi D, Taverna E, Rosa P, Matteoli M, Verderio C.Хранение и высвобождение АТФ из астроцитов в культуре. J Biol Chem. 2003 10 января; 278 (2): 1354-62. [PubMed: 12414798]

13.

Аттвелл Д., Лафлин С.Б. Энергетический баланс для передачи сигналов в сером веществе мозга. J Cereb Blood Flow Metab. 2001 Октябрь; 21 (10): 1133-45. [PubMed: 11598490]

14.

Харрис Дж. Дж., Джоливет Р., Аттвелл Д. Использование и поставка синаптической энергии. Нейрон. 2012 6 сентября; 75 (5): 762-77. [PubMed: 22958818]

15.

Wong-Riley MT. Цитохромоксидаза: эндогенный метаболический маркер нейрональной активности.Trends Neurosci. 1989 Март; 12 (3): 94-101. [PubMed: 2469224]

16.

Barclay CJ. Энергетика сокращения. Compr Physiol. 2015 Апрель; 5 (2): 961-95. [PubMed: 25880520]

17.

Rich PR. Молекулярный аппарат дыхательной цепи Кейлина. Biochem Soc Trans. 2003 декабрь; 31 (Pt 6): 1095-105. [PubMed: 14641005]

18.

Ronnett GV, Kim EK, Landree LE, Tu Y. Метаболизм жирных кислот как мишень для лечения ожирения. Physiol Behav. 2005 19 мая; 85 (1): 25-35.[PubMed: 15878185]

19.

Бровко Л.Ю., Романова Н.А., Угарова Н.Н. Биолюминесцентный анализ бактериального внутриклеточного AMP, ADP и ATP с использованием коиммобилизованного трехферментного реагента (аденилаткиназы, пируваткиназы и люциферазы светлячков). Анальная биохимия. 1 августа 1994 г .; 220 (2): 410-4. [PubMed: 7978286]

20.

Хаяшида М., Фукуда К., Фукунага А. Клиническое применение аденозина и АТФ для контроля боли. Дж. Анест. 2005; 19 (3): 225-35. [PubMed: 16032451]

21.

Agteresch HJ, Dagnelie PC, van den Berg JW, Wilson JH. Аденозинтрифосфат: установленные и потенциальные клинические применения. Наркотики. 1999 август; 58 (2): 211-32. [PubMed: 10473017]

АТФ и АДФ

АТФ и АДФ

Зачем организму еда

Ваш метаболизм — это совокупность химических реакций, которые происходят в ваших клетках для поддержания жизни. Некоторые из этих реакций используют накопленную энергию для создания вещей, что мы называем анаболизмом, в то время как другие реакции разрушают вещи, высвобождая энергию, которая может быть сохранена для будущего использования, и это называется катаболизмом.Представьте, что гамбургер из белков, жиров и углеводов, который вы едите на ужин, представляет собой набор кубиков лего разных цветов и форм. Чтобы организовать эти блоки в эту сложную структуру, потребовалось много энергии, и разрушение блоков высвобождает эту энергию и освобождает блоки, чтобы их можно было снова собрать в новые вещи. Ваше тело делает именно это, когда вы едите пищу. Вот краткая видеолекция, в которой резюмируется эта концепция.

Живые существа разбивают три основные категории продуктов питания (белки, жиры и углеводы) на составные части, отдельные блоки лего, по двум причинам.1) После того, как пищевые атомы и группы атомов (молекул) расщеплены, они могут быть снова преобразованы в определенные виды вещей, которые нужны организму, такие как кости, мышцы, кожа, волосы, перья, мех, кора, листья и т. Д. и т. д. 2) Разрушение молекул пищи высвобождает энергию, которая удерживала их вместе, и эта высвобожденная энергия временно сохраняется в клетке для процесса восстановления. Для каждого из этих типов пищи требуется свой процесс расщепления, и мы рассмотрим их позже, но цель одна — взять энергию, которая удерживает эти молекулы пищи вместе, и высвободить ее, чтобы ее можно было хранить в форме, которая Ячейку можно использовать позже, чтобы построить то, что ей нужно.У клетки есть особый вид молекулы для хранения этой энергии, и она называется АТФ.

http://en.wikipedia.org/wiki/Adenosine_triphosphate

АТФ (аденозинтрифосфат) — важная молекула, обнаруженная во всех живых существах. Думайте об этом как о «энергетической валюте» клетки. Если клетке необходимо тратить энергию для выполнения задачи, молекула АТФ отщепляет один из трех своих фосфатов, превращаясь в АДФ (аденозиндифосфат) + фосфат. Энергия, удерживающая эту молекулу фосфата, теперь высвобождается и доступна для работы в клетке.Когда клетка имеет дополнительную энергию (полученную от расщепления потребленной пищи или, в случае растений, полученной посредством фотосинтеза), она накапливает эту энергию, повторно присоединяя свободную молекулу фосфата к АДФ, превращая ее обратно в АТФ. Молекула АТФ подобна перезаряжаемой батарее. Когда он полностью заряжен, это АТФ. Когда он израсходован, это АДФ. Однако аккумулятор не выбрасывается, когда он разряжен — он просто снова заряжается.

http://en.wikipedia.org/wiki/Adenosine_diphosphate

ATP ß à ADP + P + энергия

Вот как это выглядит химически.Каждый фосфат представляет собой PO ₄ (кислород имеет заряд -2, а их 4, всего -8, а P имеет заряд +5, поэтому чистый заряд фосфатной группы составляет -3. .Если свободные атомы H, которые равны +1, добавляются к атомам O, которые не связаны с двумя вещами, тогда чистый заряд равен нулю.)

ß

АТФ-АДФ

Бывают случаи, когда клетке требуется еще больше энергии, и она расщепляет другой фосфат, поэтому она переходит от АДФ, аденозиддифосфата, к АМФ, аденозинмонофосфата.

АТФ ß à ADP + P + энергия ß à AMP + P + энергия

ß

ADP AMP

В клетке есть и другие молекулы-аккумуляторы энергии, такие как НАД и ФАД, но система АТФ является наиболее распространенной и наиболее важной. Думайте о других как о разных марках перезаряжаемых батарей, которые выполняют одну и ту же работу. Далее мы исследуем некоторые пути, которые организм использует для расщепления продуктов разных типов.

А кислород? Зачем нам это нужно? Что будет, если над свечой поставить стакан? Вы морите огонь кислородом, и пламя гаснет. Если метаболическая реакция носит аэробный характер, ей требуется кислород. Купить почему? Вот аналогия. Подумайте о разжигании костра. Что тебе нужно? Вам нужно топливо (дрова), вам нужно тепло (труднее разжечь огонь, когда холодно), и вам нужен кислород (потому что другое слово для обозначения горения — «окисление», и, как вы могли догадаться, это может произойти только в наличие кислорода).Окисление чего-либо приводит к потере электронов, что означает, что энергия (электроны) высвобождается, когда вы окисляете или сжигаете топливо. Ваша еда — ваше топливо. Вы сжигаете топливо для получения энергии. Кислород нужен для сжигания топлива. Это происходит в митохондриях.

Функция аденозинтрифосфата (АТФ) в клетках

АТФ — основной источник энергии для большинства клеточных процессов. Строительными блоками АТФ являются углерод, азот, водород, кислород и фосфор. Из-за наличия нестабильных высокоэнергетических связей в АТФ он легко гидролизуется в реакциях с выделением большого количества энергии.

Ферментативное удаление фосфатной группы из АТФ с образованием АДФ высвобождает огромное количество энергии, которая используется клеткой в ​​нескольких метаболических процессах, а также в синтезе макромолекул, таких как белки. Удаление второй фосфатной группы из АТФ приводит к дальнейшему высвобождению энергии и образованию аденозинмонофосфата (АМФ).

Когда организм не нуждается в энергии, фосфатная группа добавляется обратно к АМФ и АДФ для образования АТФ — при необходимости он может быть гидролизован позже.Таким образом, АТФ функционирует как надежный источник энергии для клеточных путей.

Функции АТФ в клетках

АТФ находит применение в нескольких клеточных процессах. Некоторые важные функции АТФ в клетке кратко описаны ниже:

Активный транспорт

АТФ играет важную роль в транспортировке макромолекул, таких как белки и липиды, внутрь и из клетки. Гидролиз АТФ обеспечивает необходимую энергию для активных транспортных механизмов, чтобы переносить такие молекулы через градиент концентрации.Транспорт молекул в клетку называется эндоцитозом, в то время как транспорт из клетки известен как экзоцитоз.

Сигнализация ячейки

АТФ выполняет ключевые функции как во внутриклеточной, так и во внеклеточной передаче сигналов. Он легко распознается пуринергическими рецепторами в тканях млекопитающих — его высвобождение из синапсов и аксонов активирует пуринергические рецепторы, которые модулируют уровни кальция и циклического АМФ внутри клетки.

В центральной нервной системе аденозин модулирует нервное развитие, контроль иммунной системы и нейронную / глиальную передачу сигналов.

АТФ также участвует в передаче сигнала — его фосфатные группы используются киназами в реакциях переноса фосфата, которые активируют каскад протеинкиназных реакций.

Техническое обслуживание сооружений

АТФ играет очень важную роль в сохранении структуры клетки, помогая сборке цитоскелетных элементов. Он также снабжает энергией жгутики и хромосомы, чтобы поддерживать их надлежащее функционирование.

Сокращение мышц

АТФ имеет решающее значение для сокращения мышц; он связывается с миозином, чтобы обеспечить энергию и облегчить его связывание с актином, чтобы сформировать поперечный мостик.Затем высвобождаются АДФ и фосфат, и новая молекула АТФ связывается с миозином. Это разрывает мост между миозиновыми и актиновыми филаментами, высвобождая миозин для следующего сокращения.

Синтез ДНК и РНК

Во время синтеза ДНК рибонуклеотидредуктаза (RNR) восстанавливает сахарный остаток из рибонуклеозиддифосфатов с образованием дезоксирибонуклеозиддифосфатов, таких как dADP.

Таким образом, регуляция RNR помогает поддерживать баланс дезоксинуклеотидов (dNTP) в клетке.Низкие концентрации dNTP ингибируют синтез и репарацию ДНК, в то время как высокие уровни обладают мутагенным действием, поскольку ДНК-полимераза имеет тенденцию добавлять неправильный dNTP во время синтеза ДНК.

Аденозин из АТФ является строительным блоком РНК и непосредственно добавляется к молекулам РНК во время синтеза РНК полимеразами РНК. Удаление пирофосфата обеспечивает энергию, необходимую для этой реакции.

Сводка

АТФ — сложная молекула, которая служит энергетическим пакетом для тысяч реакций, протекающих в клетках большинства организмов.Помимо человека, микроорганизмы также полагаются на АТФ для удовлетворения своих энергетических потребностей.

АТФ — это высокоэффективная молекулярная машина с быстрым оборотом энергии, что делает ее пригодной для удовлетворения меняющихся энергетических потребностей организма. Молекула АТФ имеет более 500 атомных единиц массы (AMU).

Даже когда эволюционисты задаются вопросом о жизни до появления сложной молекулы АТФ и альтернатив АТФ, в настоящее время не существует другого источника энергии, который мог бы точно отвечать на энергетические потребности клетки и выполнять ее важные процессы.

Список литературы

1. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2877495/
2. http://hyperphysics.phy-astr.gsu.edu/hbase/biology/actran.html
3. www.chm.bris.ac.uk/motm/atp/atp1.htm
4. http://www.trueorigin.org/atp.php

Дополнительная литература

ATP Synthase — обзор

C F

₀ F ₁ -ATPase

F ₀ F ₁ -ATPase играет фундаментальную роль в поддержании гомеостаза pH.Функционально этот мультисубъединичный фермент организован в два отдельных, но физически связанных домена; каталитическая часть (F ₁ ) является цитоплазматической и включает субъединицы α, B, γ, δ и ε, в то время как интегральный мембранный домен (F ₀ ), включая субъединицы a, b и c, функционирует как мембранный канал для транслокации протонов (Sebald et al. , 1982). Функция цитоплазматического домена состоит в том, чтобы катализировать синтез АТФ, когда протоны перемещаются извне клетки в цитоплазму, через мембраносвязанный домен, или гидролизовать АТФ, когда протоны перемещаются из клетки.

Роль F ₀ F ₁ -АТФазы в организмах, способных к окислительному фосфорилированию, заключается в аэробном синтезе АТФ в результате прохождения протонов в клетку и в создании протонодвижущей силы (PMF) анаэробно, посредством изгнание протонов. Как следствие последнего механизма, считается, что F ₀ F ₁ -АТФаза может увеличивать внутриклеточный pH в ситуациях, когда он становится подкисленным. Для многих бактерий данные об активности демонстрируют, что снижение внутриклеточного pH сопровождается индукцией F ₀ F ₁ -АТФазы (Koebmann et al., 2000; Kuhnert and Quivey, 2003; Kullen and Klaenhammer, 1999), а у ряда видов бактерий, включая Lactobacillus acidophilus (Kullen and Klaenhammer, 1999), S . mutans (Kuhnert et al. , 2004) и S . pneumoniae (Martin-Galiano et al. , 2001) транскрипция оперона F ₀ F ₁ индуцируется воздействием низкого pH. Присущая кислотостойкость различных бактерий связана как с уровнями F ₀ F ₁ -АТФазы, так и с оптимумом pH ферментов.Ясно, что организмы, устойчивые к кислотам от природы, обладают F ₀ F ₁ -АТФаз с более низким оптимумом pH (Sturr and Marquis, 1992; Martin-Galiano et al. , 2001).

Анализ роли F ₀ F ₁ -АТФазы в устойчивости к кислоте ограничен тем фактом, что эта система необходима для жизни многих видов бактерий (Koebmann et al. , 2000). Нам не удалось создать чистую делецию генов, кодирующих систему в L . monocytogenes (неопубликованные данные). Однако исследования двумерного гель-электрофореза показали, что листериальная субъединица F ₀ F ₁ -АТФазы индуцируется в результате воздействия слабой кислотной обработки (Phan-Thanh and Mahouin, 1999). Введение DCCD, ингибитора АТФазы, продемонстрировало, что АТФаза участвует в толерантности к кислоте и ATR (Datta and Benjamin, 1997). Кроме того, мы создали мутант с частичной вставкой в ​​F ₀ F ₁ -ATPase в L . monocytogenes , которые не нарушают физическую форму. Этот мутант продемонстрировал, что F ₀ F ₁ -АТФаза L . monocytogenes участвует в индукции ATR у этой бактерии (Cotter et al. , 2000).

энергетических путей | 3 первичных энергетических пути в теле

Все мы знаем, что человеческому организму нужна энергия для функционирования, но откуда эта энергия берется? В конечном счете, энергия, которая заставляет нас двигаться, исходит от пищи, которую мы едим.Однако мы не можем использовать энергию непосредственно из пищи — сначала ее нужно преобразовать в аденозинтрифосфат, или АТФ, форму химической энергии, которую можно сразу использовать для всех функций клетки. Тело действительно хранит минимальное количество АТФ в мышцах, но большая часть синтезируется из продуктов, которые мы едим.

Пища состоит из углеводов, жиров и белков, и эти питательные вещества расщепляются на простейшие формы (глюкоза, жирные кислоты и аминокислоты) во время пищеварения. Как только эти питательные вещества расщепляются, они транспортируются через кровь для использования в метаболических путях или сохраняются для дальнейшего использования.

Поскольку мы не храним значительное количество АТФ и нуждаемся в постоянном снабжении, его необходимо постоянно ресинтезировать. Это происходит несколькими способами с использованием одной из трех энергосистем:

1. Фосфаген (непосредственный источник)
2. Анаэробный (несколько медленный, использует углеводы)
3. Аэробика (медленная, использует углеводы или жиры)

Фосфаген

Эта система использует креатинфосфат (CP) и имеет очень высокую скорость производства АТФ.Креатинфосфат используется для восстановления АТФ после его расщепления с целью высвобождения его энергии. Общее количество ЦП и АТФ, хранящихся в мышцах, невелико, поэтому энергия, доступная для мышечного сокращения, ограничена. Однако он доступен мгновенно и необходим в начале активности, а также во время краткосрочных высокоинтенсивных занятий продолжительностью от 1 до 30 секунд, таких как спринт, поднятие тяжестей или метание мяча.

Анаэробный гликолиз

Анаэробный гликолиз не требует кислорода и использует энергию глюкозы для образования АТФ.Этот путь происходит в цитоплазме и расщепляет глюкозу на более простой компонент, называемый пируватом. В качестве промежуточного звена между фосфагеном и аэробной системой анаэробный гликолиз может довольно быстро производить АТФ для использования во время деятельности, требующей больших всплесков энергии в течение несколько более длительных периодов времени (максимум от 30 секунд до трех минут или во время тренировок на выносливость до достижения устойчивого состояния. достигнуто).

Аэробный гликолиз

Этот путь требует кислорода для производства АТФ, потому что углеводы и жиры сжигаются только в присутствии кислорода.Этот путь происходит в митохондриях клетки и используется для деятельности, требующей устойчивого производства энергии. Аэробный гликолиз имеет медленную скорость производства АТФ и преимущественно используется во время более продолжительных и низкоинтенсивных занятий после того, как фосфагеновая и анаэробная системы утомились.

Важно помнить, что все три эти системы способствуют удовлетворению энергетических потребностей организма во время физической активности. Эти системы не работают независимо друг от друга, а доминируют в разное время, в зависимости от продолжительности и интенсивности активности.

Аденозинтрифосфат

Аденозинтрифосфат (АТФ) биологи считают энергетической валютой жизни. Это высокоэнергетическая молекула, которая накапливает энергию, необходимую нам для того, чтобы делать практически все, что мы делаем. Он присутствует в цитоплазме и нуклеоплазме каждой клетки, и практически все физиологические механизмы, требующие энергии для работы, получают его непосредственно из хранимого АТФ. (Гайтон) Поскольку пища в клетках постепенно окисляется, высвободившаяся энергия используется для переформирования АТФ, так что клетка всегда поддерживает запас этой важной молекулы.Карп приводит оценку, согласно которой в организме человека ежедневно образуется более 2 x 10 26 молекул или> 160 кг АТФ! АТФ примечателен своей способностью вступать во многие сопряженные реакции, как реакции с пищей для извлечения энергии, так и реакции других физиологических процессов, обеспечивающие их энергию. В системах животных АТФ может быть синтезирован в процессе гликолиза, при котором происходит чистое производство двух молекул АТФ в цикле. Этот гликолиз является важным этапом анаэробного дыхания.Для аэробного дыхания гликолиз также является источником АТФ, но более продуктивный процесс в крошечных энергетических фабриках, называемых митохондриями, играет важную роль в производстве АТФ. Структура АТФ имеет упорядоченное углеродное соединение в качестве основы, но действительно важной частью является фосфорная часть — трифосфат. Три группы фосфора связаны друг с другом атомами кислорода, и есть также боковые атомы кислорода, связанные с атомами фосфора.В нормальных условиях в организме каждый из этих атомов кислорода имеет отрицательный заряд и поэтому отталкивается друг от друга. Эти сгруппированные отрицательные заряды хотят убежать — убежать друг от друга, поэтому здесь много потенциальной энергии. Если вы удалите только одну из этих фосфатных групп с конца, так что останется только две фосфатные группы, молекула станет намного счастливее. Это преобразование из АТФ в АДФ является чрезвычайно важной реакцией для обеспечения энергией жизненных процессов.Просто разрыва одной связи с сопутствующей перегруппировкой достаточно, чтобы высвободить около 7,3 килокалорий на моль = 30,6 кДж / моль. Это примерно то же самое, что и энергия одного арахиса. Живые существа могут использовать АТФ как батарею. АТФ может приводить в действие необходимые реакции, теряя одну из своих фосфорных групп для образования АДФ, но вы можете использовать энергию пищи в митохондриях, чтобы преобразовать АДФ обратно в АТФ, чтобы энергия снова стала доступной для выполнения необходимой работы. В растениях энергия солнечного света может использоваться для преобразования менее активного соединения обратно в высокоэнергетическую форму.Что касается животных, вы используете энергию своих высокоэнергетических молекул-аккумуляторов, чтобы делать то, что вам нужно, чтобы оставаться в живых, а затем вы «перезаряжаете» их, чтобы вернуть их в высокоэнергетическое состояние. Окисление глюкозы происходит в цикле, называемом циклом TCA или циклом Кребса в эукариотических клетках, чтобы обеспечить энергию для преобразования ADP в ATP.

Индекс Концепции второго закона Ссылка Guyton Ch 45 Karp Ch 5

АТФ-синтаза типа III представляет собой димер с отклонением симметрии, который вызывает искривление мембраны за счет тетрамеризации

Определение структуры и 9 новых идентифицированных элементов

Чтобы охарактеризовать АТФ-синтазу типа III, мы солюбилизировали митохондриальные мембраны дигитонином, и начальные анализы с использованием градиентной седиментации и PAGE с голубым естественным веществом подтвердили присутствие высокомолекулярных частиц (дополнительный рис.1), что соответствует предыдущим результатам ²⁶ . Комплексы АТФ-синтазы были дополнительно очищены и подвергнуты крио-ЭМ-анализу. Трехмерная классификация частиц АТФ-синтазы выявила две популяции, соответствующие димеру и тетрамеру АТФ-синтазы. Используя маскированные уточнения, разрешение различных областей достигло 2,5–3,1 Å (дополнительные рисунки 2 и 3a – e и дополнительная таблица 1), что позволило моделировать de novo. Уточнение до разрешения 2,7 Å позволило построить димер АТФ-синтазы.Тетрамер был уточнен до разрешения 3,3 Å, а область мембраны, состоящая из взаимодействующих субкомплексов F _o , была дополнительно улучшена до разрешения 3,1 Å после маскированного уточнения (дополнительные рисунки 2 и 3f). Две копии модели димера АТФ-синтазы были уточнены в карту F _o -тетрамер, сгенерировав составную модель тетрамера АТФ-синтазы. Оба мономера в одном и том же вращательном состоянии ингибируются естественным ингибитором IF ₁ .

Общая структура димера АТФ-синтазы III типа имеет U-образную форму (рис.1a, b и дополнительный фильм 1), при этом другие типы не обнаружены, что согласуется с предыдущими исследованиями с низким разрешением ^14,26 . Комплекс ~ 2 MDa состоит из 81 белковой субъединицы, о 9 из которых ранее не сообщалось, и они присвоены непосредственно из нашей карты плотности крио-ЭМ (дополнительный рисунок 4 и дополнительная таблица 2). Далее мы идентифицировали плотность в центральном стержне, соответствующую субъединице-ε, которая также не была обнаружена в предыдущем масс-спектрометрическом анализе ²⁶ (дополнительные фиг.4 и 9а).

Рис. 1: Структура димера АТФ-синтазы типа III со связанными нативными липидами.

a Карта плотности крио-ЭМ с фильтром местного разрешения димера АТФ-синтазы с детергентной лентой. b Составная модель димера АТФ-синтазы с окрашенными метками субъединиц. Черные окна выделяют области для просмотра крупным планом на панелях d и f. c Крио-ЭМ карта плотности для типа III F _o — область света, окрашенная как в b . d Увеличенный вид F _o -крыльевой субъединицы ATPTT1, показывающий связанный кофактор NAD. e Кардиолипины секвестрированы в подкомплексе F _o . CDL _m соответствует липидам листочков матрикса, CDL _-1 соответствует липидам листочков матрикса. f F _o Полость простирается к c-образному кольцу. Карта плотности крио-ЭМ раскрашена субъединицами, смоделированные липиды показаны в виде шариков-палочек. Немоделированные объекты карты плотности липидов окрашены в белый цвет.

Общий размер димера АТФ-синтазы типа III существенно больше, чем у его аналогов.В подкомплексе F _o 6 из 7 консервативных субъединиц являются удлиненными, а 13 субъединиц не имеют структурных эквивалентов в других типах АТФ-синтаз (дополнительный рис. 5). Вместе эти специфические элементы добавляют ~ 0,7 МДа к димеру АТФ-синтазы типа III, удваивая его размер по сравнению с бактериальными аналогами. Для консервативных субъединиц мы приняли номенклатуру дрожжей ¹⁹ , а специфические субъединицы типа III названы ATPTT1-13 в соответствии с убывающей молекулярной массой, как ранее предлагалось ^21,27 (дополнительная таблица 2).

Специфические субъединицы типа III распределены между матриксом, мембраной и областями просвета (рис. 1a, b и дополнительный рис. 5). В частности, имеется расширение в области просвета, где белки F _o образуют область просвета размером 64 на 160 Å F _o (рис. 1c). Следовательно, поверхность раздела мономеров, обращенных друг к другу, изменяется, и формируется другой тип режима димеризации со сложными взаимодействиями между мономерами (дополнительный рис. 6). Как показано на боковом смещении периферических стеблей и консервативных субъединиц (дополнительный рис.7), он существенно отличается от АТФ-синтаз дрожжей, млекопитающих и водорослей ^19,20,28 . Специфические субъединицы на измененной взаимодействующей поверхности стабильно связывают два мономера вместе параллельно друг другу с небольшой индукцией кривизны мембраны. Это отличается от преобладающей широкоугольной V-образной организации ранее описанных митохондриальных АТФ-синтаз, которые вызывают искривление соседней мембраны (дополнительный рис. 7).

Помимо белковых субъединиц, мы также отнесли в подкомплекс F _o 30 кардиолипинов, 6 фосфатидилхолинов, 4 фосфатидилэтаноламинов и 2 молекулы кофермента Q (CoQ) (дополнительный рис.8 и дополнительный фильм 1). Шесть кардиолипинов глубоко встроены в субкомплекс F _o , изолированы от основной мембраны и вместо этого действуют как структурные компоненты димерной структуры АТФ-синтазы (Fig. 1e). Они связаны в сайтах, эквивалентных матриксу и просветным листочкам кристальной мембраны, и, вероятно, включаются во время сборки подкомплекса F _o . Другой участок с высокой концентрацией нативных липидов был обнаружен вокруг канальной полости, проходящей через периферию субкомплекса F _o по направлению к с-кольцу (рис.1е). Эта полость F _o , вероятно, обеспечивает доступ для больших объемов мембранных липидов к с-кольцу, создавая запечатанный светом матричный протонный полуканал, необходимый для перемещения протонов.

Характеристики вновь идентифицированных субъединиц

Среди 13 специфических субъединиц типа III три просветных ATPTT5, ATPTT8 и ATPTT9 имеют домены типа «спираль-спираль-спираль-спираль-спираль» (CHCHD). ATPTT5 и ATPTT8 содержат CX ₉ C / CX ₁₀ C, а ATPTT9 содержит мотивы CX ₃ C / CX ₅ C (дополнительный рис.9б). На стороне матрикса несколько заметных субъединиц принимают глобулярные складки, особенно ATPTT1-3 и ATPTT11 (Supplementary Fig. 9c).

Крылышко F _o зажимает с-кольцо и образовано субъединицей ATPTT1 массой 55 кДа (рис. 1d). Его третичная складка хорошо сочетается с сульфидом митохондрий человека: хинон оксидоредуктазой (дополнительный рис. 9d), которая использует флавинадениндинуклеотид (FAD) для своей активности ²⁹ . Однако в ATPTT1 связывающий карман, образованный двумя складками Россмана, содержит кофактор никотинамидадениндинуклеотид (НАД).Никотинамидная группа НАД находится в непосредственной близости от Cys205 (дополнительный рис. 9e), который потенциально может быть активным сайтом ATPTT1. Человеческий сульфид: хинон оксидоредуктаза является интегральным мембранным белком, и ATPTT1 располагается близко к листку матрикса кристальной мембраны с несколькими соседними липидоподобными плотностными характеристиками, разрешенными на карте плотности крио-ЭМ (дополнительный рис. 9f). Таким образом, ATPTT1 может встречаться с встроенными в мембрану акцепторами электронов, такими как CoQ, аналогично человеческому ферменту ²⁹ .

Дальнейший анализ индивидуальных субъединиц F _o показал, что C-концевой домен ATPTT3 принимает глобулярную складку, подобную домену межмембранного пространства субъединицы TIM21 импортирующей транслоказы внутренней мембраны митохондрий (Fig. 1b and Supplementary Fig. 9h). Связанная белковая субъединица ATPTT11 принимает складку ацильного белка-носителя, однако конъюгированный фосфопантетеин не обнаружен (рис. 1b и дополнительный рис. 9i). Неожиданно мы обнаружили молекулу Mg-ATP, связанную как структурный компонент F _o на стороне матрикса, служащий центром взаимодействий, соединяющих субъединицы a , k , ATPTT3 и ATPTT4 (дополнительный рис.9к). Насколько нам известно, это первое наблюдение нуклеотидного мостика F _o -субъединиц.

Добавление специфических белковых субъединиц типа III влияет на архитектуру и топологию консервативных субъединиц. Например, трансмембранная спираль субъединицы i / j наклонена в почти горизонтальное положение в результате взаимодействия ATPTT7, при этом сохраняется интерфейс с субъединицей 8. Субъединица b вносит свою N-концевую спираль в структуру периферической ножки в дополнение к канонической С-концевой спирали (дополнительный рис.12а). С-концевое удлинение субъединицы k складывается в четырехспиральный пучок прямо под с-образным кольцом, закрывающим его внутреннюю часть (рис. 1c и 4a).

АТФ-синтаза типа III образует димер с отклоненной симметрией с закрепленным IF

₁

Во время обработки изображений мы заметили, что качество кажущейся двукратной симметричной плотности в центральной области между мономерами не соответствовало общей карте качественный. Эта область имела двулопастную форму, отходящую от заполненной липидами центральной полости на матричной стороне подкомплекса F _o .Чтобы улучшить карту, выровненные частицы были подвергнуты трехмерной классификации, в результате чего они были распределены на два основных класса с одинаковым количеством частиц, связанных поворотом на 180 ° (дополнительный рис. 2c и «Методы»).

Дальнейшая обработка позволила идентифицировать вовлеченные белки по плотности боковых цепей и привела к модели трех белковых субъединиц, сгруппированных в этой области. Заметно выделяется ATPTT2, наблюдаемый только в виде единственной копии в димере.Это представляет собой единственную субстехиометрическую субъединицу F _o , о которой сообщается в любом димере АТФ-синтазы. ATPTT2 содержит ядро ​​с консервативной последовательностью, принимающее классическую α / β гидролазную складку, хотя и с неактивной каталитической триадой (дополнительный рис. 9g, j). Гомологи ATPTT2 консервативны у инфузорий, указывая на то, что ATPTT2 является подлинной особенностью АТФ-синтазы типа III (дополнительный рис. 10a). Сайт связывания для ATPTT2 имеет форму колыбели с субъединицами f и ATPTT13, выстилающими обращенный к мембране интерфейсом, и субъединицами b , d и ATPTT4, составляющими стороны (рис.2а).

Рис. 2: Связывание ATPTT2 приводит к нарушению симметрии АТФ-синтазы.

a Обзор, показывающий расположение субстехиометрического ATPTT2 с его взаимодействующими субъединицами. Увеличенный вид показывает сайт связывания ATPTT2 в форме колыбели (цветные поверхности). b Субъединицы с отклоненной симметрией по отношению к ATPTT2. Нижняя панель: суперпозиции субъединиц двух мономеров имеют различия.

Ассоциация субъединицы ATPTT2 вызывает локальные отклонения от симметрии димера, тогда как основная часть подкомплекса F _o подчиняется симметричной архитектуре.Сравнение белковых субъединиц, взаимодействующих с ATPTT2 в субкомплексе F _o , показывает конформационные различия между аналогами (рис. 2b и дополнительный ролик 1). Субъединица f (остатки 2–27) обнаруживает несоответствие симметрии, принимая разные складки в двух копиях. ATPTT4 C-концевые остатки 235-268 различаются по структуре с одной копией, оборачивающейся вокруг расширенной C-концевой петли ATPTT2, тогда как вторая копия выступает прочь. ATPTT12 (5–29) распространяется в противоположных направлениях между двумя копиями, поскольку одна копия взаимодействует с C-концевой петлей ATPTT2, обеспечивая направление просвета, тогда как вторая направлена ​​в сторону матрицы.Копии ATPTT13 (21–41) по-разному взаимодействуют с ATPTT2. Таким образом, субстехиометрическое связывание ATPTT2 индуцирует различные конформации в аналогах из двух мономеров, что приводит к общему отклонению симметрии димера АТФ-синтазы типа III.

Кроме того, ATPTT2 развил уникальную функцию в качестве платформы для связывания природного ингибитора IF ₁ способом, который ингибирует оба мономера в димере, что ранее не наблюдалось. Обычно IF ₁ блокирует вращательное движение через свой N-концевой домен, тогда как C-концевой домен отвечает за его димеризацию ^30,31 .В нашей структуре каноническая ингибирующая спираль IF ₁ связана с β _DP -субъединицей подкомплекса F ₁ (дополнительный рис. 11a, b). Он связан с доменом димеризации С-конца через гибкий (немоделированный) линкер (дополнительный рис. 11c). На С-конце две спирали каждой копии IF ₁ образуют пучок из четырех спиралей, опосредованный ATPTT2 (рис. 3a). Контакты включают гидрофобные и ионные взаимодействия (рис. 3b, c и дополнительный рис.10б). В целом димер IF ₁ типа III отличается от аналога у млекопитающих, который ингибирует мономеры соседних димеров, а не одного и того же димера (рис. 3d, e).

Рис. 3: ATPTT2 закрепляет IF ₁ на мембране.

a ATPTT2 взаимодействует с С-концевыми доменами IF ₁ , которые димеризуются через их спиральные шпильки. Крупным планом показан интерфейс взаимодействия между ATPTT2 и С-концевым димером IF ₁ . b IF ₁ C-концы взаимодействуют посредством электростатических взаимодействий на периферии, а c образуют плотное гидрофобное ядро. d Димер АТФ-синтазы типа III со связанным интрадимерным IF ₁ . Элементы, образующие C-концевой димер, взаимодействуют с ATPTT2 и F ₁ , указаны на правой панели. e Тетрамер АТФ-синтазы свиньи типа I (PDB 6J5K) [https://www.rcsb.org/structure/6J5K] со связанным интердимерным IF ₁ .

Роль субъединицы-

a и субъединиц типа III в димеризации АТФ-синтазы

Сообщалось, что конфигурация димера АТФ-синтазы зависит от конкретных субъединиц, образующих гидрофобный клин, который накладывает локальную кривизну на мембрану ^{16,32, 33,34} .Поскольку предыдущая работа показала, что субъединица и образует димерные контакты ¹⁹ , мы соответствующим образом сфокусировали наш анализ. Субъединица и представляет собой трансмембранный белок, критический для транслокации протонов через F _o -подкомплекс ³⁵ . В соответствии с предыдущими исследованиями ^4,5,19,36 , в нашей структуре он имеет складку из шести спиралей с двумя горизонтальными спиралями H5 _a и H6 _a , контактирующими с c-кольцом, в то время как остальная часть белок взаимодействует с консервативными субъединицами b , d , f , i / j , k , 8, а неконсервативное взаимодействие с субъединицей b ‘(рис.4a и дополнительный рис. 12b). Однако димерные контакты устанавливаются гетеротипично между остатками 362-364 в петле, соединяющей спирали H5 _a и H6 _a в одной субъединице — , копия и N-концевое удлинение на другой (рис. 4b).

Фиг. 4: Взаимодействия субъединицы и во всем подкомплексе F _o .

a Subunit- a каноническое шестиспиральное ядро, окруженное консервативными субъединицами b, d, f, i / j, k и 8.Он образует неканоническое взаимодействие с субъединицей b ‘. С-образное кольцо серое. Окно соответствует области, показанной на крупном плане b . b Субъединица a образует димерный интерфейс с субъединицами a ‘, f ‘, ATPTT5-6 ‘, с фосфатидилэтаноламином, связанным близко к сайту взаимодействия. c Крупный план субъединицы a , демонстрирующий шестиспиральную складку сердцевины (h2-H6 _a ) с N- и C-концевыми расширениями a, помеченными a. d Обзор плотности крио-ЭМ подкомплекса F _o , показывающий периферическое расположение субъединицы , удлинение N-конца и взаимодействующие субъединицы (окрашенные субъединицы, остальные прозрачные серые). На виде крупным планом показана субъединица , выступающая на N-конце , из спиралей из других F _o -субъединиц.

Кроме того, субъединица АТФ-синтазы типа III-а имеет N- и С-концевые удлинения из 170 и 38 аминокислот, соответственно. Общая длина в 446 аминокислот делает эту субъединицу, безусловно, наибольшей — — гомолог , описанный в любой АТФ-синтазе F-типа (рис.4в). N-концевое удлинение сначала складывается в пучок из четырех спиралей, который взаимодействует с субъединицами , /, и ATPTT5-8 на периферии просветной области F _o (рис. ось симметрии подкомплекса F _o , взаимодействующего с зависимыми от симметрии субъединицами a ‘, ATPTT5’, 7’– 9 ‘, 12’ (дополнительный рис. 12c). Таким образом, субъединица и связывает вместе весь F _o -подкомплекс вместе в жесткую структуру и выполняет центральную функцию каркаса окружающих субъединиц, чтобы позиционировать их для взаимодействия.

Дополнительные мотивы димеризации, специфичные для типа III, были идентифицированы в нашей структуре на всем протяжении интерфейса (дополнительный рис. 6). Суммарная площадь поверхности между мономерами превышает 16000 Å ² , что как минимум в четыре раза больше, чем для других охарактеризованных типов. Мы обнаружили контакты в мембране (субъединицы a , b, и f ), матрице (субъединица f и ATPTT13) и просвете (субъединицы a , f , k , ATPTT5- 9, ATPTT12) (рис.5a и дополнительный рис. 6 и 12d – j). Помимо гомотипических контактов вдоль оси симметрии, он дополнительно поддерживается серией обширных гетеротипических контактов, расположенных на расстоянии до ~ 60 Å от оси димеризации (рис. 5a, b). Гетеротипические контакты включают молекулу кардиолипина, связанную внутри мостиковой субъединицы c-кольца — , k, и ATPTT6 ‘. Гомотипические контакты субъединицы b также включают связанные кардиолипины (рис. 5c), тогда как интерфейс субъединицы f включает только контакты белков (рис.5г). Следовательно, структура димера АТФ-синтазы типа III содержит, безусловно, самый обширный интерфейс димеров, наблюдаемый в любом описанном димере АТФ-синтазы.

Рис. 5: Интерфейсы димеров разбросаны по субкомплексу F _o .

a Обзор структуры димера АТФ-синтазы с субъединицами F _o , участвующими в интерфейсах димера, показанными соответствующими цветами. Окна обозначают области, показанные на панелях b-d крупным планом. b Расширенный C-концевой домен субъединицы k участвует в нескольких взаимодействиях интерфейса димера ниже c-кольца с субъединицами F _o ATPTT5-8 ‘.Связанный кардиолипин (CDL, красный) опосредует взаимодействия между субъединицей k и ATPTT6 ‘. c Субъединицы b и b ‘образуют гидрофобный димерный интерфейс с кардиолипинами (CDL, красный). Плотность кардиолипина вырезана на 2,6 Å вокруг атомов на карте, отфильтрованной с локальным разрешением F _o -димер. d Субъединицы f и f ‘образуют димерную границу раздела за счет электростатических, полярных и гидрофобных взаимодействий.

АТФ-синтаза типа III собирается в тетрамеры через субъединицу-

a и участки контакта просвета

Поскольку АТФ-синтаза типа III образует U-образный димер, который не вызывает кривизну мембраны, мы дополнительно исследовали, как димеры собираются в высшие олигомеры посредством с упором на тетрамерные частицы.Мы использовали замаскированное уточнение, чтобы получить карту с разрешением 3,1 Å области тетрамерной мембраны, состоящей из двух димерных единиц (рис. 6a и дополнительные рис. 2c и 3f). Чтобы интерпретировать границу раздела между двумя димерами, мы приспособили модели димеров и уточнили их в карту плотности тетрамера F _o (рис. 6b и дополнительный рис. 13a). Все плотности белка можно объяснить субъединицами моделей димера, и, по-видимому, не требуется дополнительных белковых фрагментов, чтобы удерживать тетрамер вместе.Тетрамерная модель соответствует ранее описанным средним субтомограммам инфузорий АТФ-синтазы ¹⁴ (дополнительный рис. 13b), предполагая, что тетрамер является представителем нативной конфигурации АТФ-синтазы типа III.

Рис. 6. Структура тетрамера АТФ-синтазы III типа.

a Крио-ЭМ карта плотности АТФ-синтазы F _o тетрамера с фильтром местного разрешения. Димер 1 окрашен в серый цвет, а димер 2 — в светло-серый. b Модель тетрамера АТФ-синтазы.Прямоугольники указывают границы взаимодействия белков и липидов. c Димеры АТФ-синтазы, расположенные на расстоянии 140 Å внутри тетрамеров, расположены под углом ~ 11 ° (вид сбоку, слева) и ~ 3 ° (вид сбоку, справа), создавая кривизну мембраны.

В тетрамере димеры АТФ-синтазы расположены на расстоянии 140 Å от центра к центру с углом ~ 11 ° между осями димеров, соединяя подкомплексы F _o вместе (Рис. 6c, левая панель). Кроме того, вдоль перпендикулярной оси, параллельной плоскости мембраны, димеры располагаются под углом ~ 3 ° (рис.6в, правая панель). Такое угловое расположение вызывает искривление окружающей мембраны в форме правой спирали, что также очевидно из плотности детергента / мембраны, окружающей тетрамер АТФ-синтазы (дополнительный рис. 13c). Применение многочастичного уточняющего анализа тетрамера АТФ синтазы с использованием двух димеров в качестве тел не выявило отчетливых конформационных состояний, но вместо этого выявило непрерывные движения в сложном ландшафте движений (Supplementary Fig. 14a). Анализ показал, что в собственном движении преобладают комбинации наклонных и вращательных движений одного димера относительно другого (дополнительный рис.14б – г). Это согласуется с предыдущими наблюдениями ¹⁴ и отражает потребность в пластичности олигомеров АТФ синтазы типа III во время мембранных канальцев.

Взаимодействия белок-белок, удерживающие два димера вместе, можно разделить на два типа интерфейса: прямые взаимодействия между субъединицами F _o в просвете и взаимодействия, опосредованные липидами (рис. 6b). Поверхность просвета регулируется гомотипическими взаимодействиями между субъединицей i / j и ATPTT6, расположенной в соседних F _o -подкомплексах.Расширенная субъединица a N-концевой четырехспиральный пучок позиционирует ATPTT6 с горизонтальной α-спиралью для взаимодействия с субъединицей ATPTT6 в другом димере АТФ-синтазы (рис. 7a). Этот люминальный интерфейс определяется электростатическими взаимодействиями между остатками аргинина и глутамата, а также взаимодействиями стэкинга между аргининами (Рис. 7b). Далее на просветной стороне субъединица i / j копий расположены N-концевой субъединицей , удлинением , чтобы сформировать обширный интерфейс, где остатки Asn207 складываются друг против друга, а остатки Ser173, Lys174 и Ser198 находятся в пределах расстояния. обеспечение полярных взаимодействий между основной и боковой цепями (рис.7а, в).

Рис. 7: Тетрамер АТФ-синтазы типа III взаимодействует через определенные белковые и липидно-опосредованные интерфейсы.

a Люминесцентный вид тетрамера. N-концевой четырехспиральный пучок субъединицы a (темно-зеленый) позиционирует субъединицу i / j и ATPTT6 для тетрамерных взаимодействий. Область и стрелка в рамке указывают область и направление взгляда, показанные крупным планом в b , c . b субъединицы ATPTT6 в двух димерах образуют электростатические взаимодействия. c Субъединицы — i / j в интерфейсе образуют полярные взаимодействия. d Субъединицы i / j и ATPTT5 взаимодействуют через связанные мембранные липиды в листке матрикса (черные пунктирные линии) и в листке просвета (серые пунктирные линии). Немоделированная плотность липидов показана прозрачным светло-коричневым цветом.

Второй тип интерфейса включает липиды, связанные между двумя димерами. Наиболее заметным является интерфейс, расположенный между копиями субъединицы i / j и ATPTT5 (рис.6б). Разрыв между субъединицами в подкомплексах F _o как раз достаточно широк, чтобы вместить три липида между двумя димерами АТФ-синтазы (рис.