Состав вд 40: Смазка универсальная WD-40 200 мл купить по цене 279.0 руб. в ОБИ

Делаем аналог WD-40 своими руками

Несмотря на то, что этот проникающий состав разработан еще в середине 50-х годов, формула его состава до сих пор досконально не известна. Благодаря популярности смазки появились множество её аналогов и один из них мы предлагаем вам сделать самостоятельно в домашних условиях. Как, читайте дальше!

Базовый состав WD-40

WD-40 — это универсальная смазка, применяемая для предотвращения коррозии, снятия пленки окисления, имеющая очистительные обезжиривающие свойства. Цена готова состава — в 2-3 раза больше, чем состава приготовленного вручную!

Точного состава нет, но мы можем назвать его основные компоненты:

• уайт-спирит — 50%;
  
• углекислый газ (нужен для формирования струи аэрозоля), летучие углеводороды — 25%;
  
• минеральное масло — 15%;
  
• инертные добавки, формула которых неизвестна — 10%.
  

Так как часть из этих компонентов продается в объемах от 1л, самодельный состав целесообразен, если он будет применяться в промышленных объемах.

Рецепт изготовления WD-40 в домашних условиях

Уайт-спирит и минеральное масло продается везде, сложнее с летучими углеводородами. В теории летучие углеводороды — это легкие фракции нефти, к которым относятся газолин или нефтяной эфир. Если верить составу, то в Украине можно купить бензин «Калоша», который и заменит нам легкие углеводороды.

Рекомендуемый состав:

• уайт-спирит — 0,4л;
  
• бензин «Калоша» — 0,3л;
  
• минеральное масло (оно самое недорогое. Можно и синтетическое, но смысл?) — 100 мл;
  
• немного парафина для связки уайт-спирита — растапливаем, сливаем в растворитель. Парафин образует водоотталкивающую пленку;
  
• бутылка 1,5л с распылителем.
  

Пропорция компонентов ориентировочная, мы можете экспериментировать, меняя массовую долю каждого из них. Все смешиваем, проверяем вязкость (состав должен легко подниматься по трубке и распыляться). Если состав вязкий (много масла или парафина), добавляем уайт-спирит.

Pitstore — любые расходные материалы от поставщика

Вам этот рецепт показался сложным или нужно WD-40 в небольшом количестве? Тогда только в интернет-каталоге автотоваров Pitstore вы найдете лучшие цены на весь ассортимент расходных материалов для вашего автомобиля. У нас можно купить смазки, масла и другие расходные жидкости, аксессуары для комфорта и многое другое. Не нашли в продаже каталоге то, что вам нужно? Задайте вопрос менеджеру прямо сейчас — уверены, у нас есть, что вам предложить!

Pitstore — пусть автомобиль всегда радует вас!

Что входит в состав WD-40?. Новости компании «А. Svarkov

СОСТАВ WD-40

Узнаваемую синюю баночку с крупной надписью WD-40 и тонкой красной аэрозольной трубочкой можно встретить не только у любого автовладельца, а и просто в кладовой квартиры. Основное свойство состава – отталкивание влаги, растворение образовавшейся ржавчины на поверхности металлических деталей. Если вы не можете скрутить старый болт, открыть дверной замок, которым давно не пользовались, достаточно брызнуть ВД-40 на поверхность и попробовать еще раз. Благодаря этому своему свойству средство и завоевало обширную популярность и всеобщее признание.

Разработчики не разглашают состав этого продукта. Специалисты точно знают, что в него входят следующие компоненты:

• растворитель уайт-спирит;
• двуокись углерода, выполняющая функцию вытеснителя;
• минеральные масла, которые создают пленку на поверхности обработанной детали;
• прочие секретные добавки.

ПРИМЕНЕНИЕ WD-40

WD-40 применяется в автомастерских для быстрого скручивания заржавевших гаек, болтов, других крепежных деталей. В быту это средство тоже широко применяется для очистки поверхностей от засохшего клея, избавления от пятен на одежде, защиты обуви от влаги, обработки металлопластиковых окон зимой в качестве защиты от замерзания. Эта универсальная смазка представлена в широком ассортименте. Состав должен быть всегда под рукой, старайтесь держать дома небольшой запас ВД-40.

ДОСТОИНСТВА ВЛАГОЗАЩИТНОГО СРЕДСТВА

Основное свойство WD-40 – притягивание к себе молекул воды. Когда средство попадает на поверхность, оно высушивает ее. Одновременно осуществляется растворение ржавчины, благодаря чему старые металлические детали легко разъединяются. Нужно совсем незначительное количество средства, чтобы обработать гайку или замочную скважину. Одной баночки хватает надолго. Если следовать правилам безопасности при использовании состава, он не нанесет вреда здоровью.

МИНУСЫ WD-40

Основной минус WD-40 в том, что он не обеспечивает длительную влагозащиту. Минеральные масла, входящие в состав, быстро испаряются, после чего средство начинает притягивать воду, поэтому обработанная поверхность еще больше ржавеет. ВД-40 нельзя обрабатывать полимеры, пластмассы, пенопласт, продукт подходит только для металла, дерева, резины. Если использовать средство по прямому назначению, не приписывая свойства, которых нет, у него не останется недостатков.

Смазка WD-40: состав и применение жидкости

Едва ли не все автомобилисты имеют в своем арсенале смазку WD-40. С ее помощью можно в значительной степени облегчить процесс ремонта автомобиля и его регулярное обслуживание.

Без WD-40 едва ли вы смогли бы с легкостью откручивать все заржавевшие части автомобиля или прикипевшие друг к другу элементы.

Содержание статьи

Что представляет собой смазка WD-40?

Смазка WD-40 — аэрозольная универсальная смазка, обладающая также свойствами устойчивости к воздействию влаги и антикоррозийным эффектом.

С ее помощью можно обрабатывать различные поверхности, тем более, что элементы, включенные в состав WD-40, характеризуются высокими проникающими свойствами. Это дает возможность расширить применение смазки и использовать ее для обработки наиболее труднодоступных мест.

Так, при помощи WD-40 можно смазывать резьбу болта. Средство хорошо переносит высокую и низкую температуру, поэтому может применяться в быту.

Характеристики

Литиевая смазка WD-40 широко используется уже более 50 лет. Производитель Норман Ларсен не сразу сделал состав, удовлетворяющий столь строгим требованиям, — ему понадобилось множество попыток, и лишь на сороковой раз (эта цифра и зафиксирована в названии) получилась жидкость, которую мы используем до сих пор.

Страна—производитель смазки, США, гордится своим «выходцем», а компания держит в строжайшем секрете состав аэрозоля. Даже было принято решение не патентовать разработку, чтобы никто из конкурентов не узнал, в чем секрет смазки. Отсюда и отсутствие аналогов. Далее будет рассмотрено, какие имеет спрей WD-40 характеристики. Компания, а точнее страна, где она функционирует, немного приоткрыла завесу тайны. Для того чтобы получить разрешение на производство и сбыт продукции, компания обязана была получить «паспорт безопасности» — в нем указываются ингредиенты.

Однако в случае с WD-40 в паспорте говорится лишь о 90% ингредиентов, входящих в состав:

• уайт-спирит,
• двуокись углерода,
• минеральное масло,
• углеводороды-алканы.

Где применяется WD-40?

Аэрозоль может использоваться для:

1. Заржавевшей резьбы, которую необходимо обработать. Ржавчина частично будет удалена, а обрабатываемый элемент получит необходимую смазку.
2. Клемм и соединений в электрической цепи автомобиля — при помощи средства можно удалить воду и защитить поверхность этих элементов от последующего окисления.
3. Разморозки дверного замка. При замерзании этого элемента WD-40 проникает внутрь, растворяет лед и вытесняет образовавшуюся внутри него влагу наружу.
4. Уменьшения трения между элементами автомобиля. Аэрозоль создает масляную пленку, которая понижает трение. Тем не менее подобный эффект не будет носить продолжительного действия.

В магазинах можно найти множество различных банок с WD-40, самыми распространенными являются емкости по 400 мл или 200мл.

Обратите внимание, что при работе со смазкой нужно соблюдать технику безопасности — не работать вблизи открытого огня и не допускать попадания в глаза. После обработки того или иного элемента следует подождать какое-то время, пока все характеристики WD-40 не проявят себя. Это касается и тех моментов, когда какой-то элемент может замерзнуть, а вы при помощи средства WD-40 его обработаете. Распылите аэрозольное средство после того, как поставите автомобиль на стоянку, — тем самым вы исключите возможность его замерзания.

Как сделать спрей WD-40 или его аналог самому?

Несмотря на тот факт, что полный состав смазывающей жидкости никому не известен, его ключевые компоненты уже рассекречены и потому аналоги у средства все-таки есть.

• Так, существует силиконовая смазка Multi-Spray Plus 7, которая справляется со всеми теми же задачами, которые стоят перед WD-40.

Однако иногда случаются ситуации, при которых ни WD, ни ее аналога под рукой нет. Тут на выручку могут прийти подручные средства и народные методы, которые позволят сделать подобие WD-40 своими руками.

• Чтобы успешно открутить проржавевший болт или обработать поверхность, которая замерзла, можно воспользоваться керосином или растворителем. Именно они характеризуются нужной текучестью и с высокой скоростью проникают вглубь соединения. Учитывайте, что такие элементы, несмотря на хорошую проникающую способность, не смогут сыграть роль смазки, поэтому приложить усилия для откручивания элемента все-таки придется.
• Хорошую смазывающую способность несет в себе дизельное топливо — его тоже можно применять в подобном случае.
• Для работы со ржавчиной подойдет уксус. Он прекрасно справляется с последствиями коррозии благодаря своему составу.

Видео Лайфхаки с WD-40

Смазка универсальная WD-40 (150мл)

Акция

50 мл БЕСПЛАТНО! (150 мл по цене 100 мл)*

___________________

*Производитель конечно молодец: Указал на упаковке заманчивое предложение — «150мл по цене 100мл», но по сравнению со стоимостью предыдущих поставок 100мл упаковок

не постеснялся «слегка» увеличить цену.

В связи с чем стоимость упаковки 100мл прошлогоднего поступления может отличаться от новой «акционной» .

Но в целом достаточно выгодное предложение!

Описание

• Устраняет скрип
• Вытесняет влагу
• Очищает
• Защищает от коррозии
• Освобождает заржавевшие и заклинившие механизмы

 

Благодаря своим проникающим и смазывающим свойствам, WD-40 помогает деталям и механизмам работать исправно и эффективно.

Устраняет скрип, вытесняет влагу с металлических поверхностей, очищает от смолы, клея, жира.

Оставляет защитную пленку против коррозии.

Проникает в ржавчину и освобождает болты и гайки, освобождает и смазывает движущиеся части механизмов.

 

 

Инструкция

Указания по применению.

• Нанесите с небольшого расстояния на обрабатываемую поверхность.

• Дайте препарату впитаться.

• Для большего эффекта — не вытирайте.

 

Опасно! Чрезвычайно воспламеняющийся аэрозоль!

Баллон под давлением!

При нагревании возможен взрыв.

Может вызывать сонливость и головокружение.

При необходимости обратиться за медицинской помощью, по возможности показать упаковку / маркировку продукта.

Хранить в недоступном для детей месте.

Беречь от источников воспламенения нагревания / искр / открытого огня.

Не курить.

Не распылять вблизи открытого огня или других источников воспламенения.

Не нарушать целостность упаковки и не сжигать, даже после использования.

Избегать вдыхание пара или аэрозолей.

Использовать только на открытом воздухе или в хорошо вентилируемом помещении.

 

ПРИ ПРОГЛАТЫВАНИИ Немедленно обратиться за медицинской помощью.

НЕ вызывать рвоту!

Обратиться за медицинской помощью при плохом самочувствии.

 

Хранить в недоступном для посторонних месте.

Беречь от солнечных лучей, избегать нагревания выше 50°C.

Повторное соприкосновение может вызвать сухость кожи или трещины.

 

При недостаточной вентиляции возможно образование взрывоопасных смесей.

Избегать попадания в глаза.

 

Состав

Состав:

• 1-5% Диоксид углерода
• 60-80% Углеводороды
• C9-C11
• n-алканы
• <2% ароматные соединения

 

Не содержит силикона

Не содержит хладонов и озоноразрушающих веществ!

 

Соответствует требованиям ТР ТС 030/2012

Срок годности — 20 лет с даты производства, указанной на дне баллончика. 

 

13 необычных способов использования WD-40

Часто ли вам встречалось средство бытовой химии, которое имеет свою страницу в Facebook и многочисленные фан-сайты? Какой продукт сначала использовался для защиты обшивки космических ракет от коррозии, а теперь продается практически в каждом супермаркете?

Вы, вероятно, уже поняли, что речь идет о популярнейшем WD-40, в народе известном как «вэдэшка». Его формула до сих пор тщательно охраняется, но это не мешает нам с успехом использовать его замечательные свойства. Все знают, что WD-40 можно успешно использовать для смазки запоров и петель, откручивания прикипевших гаек, удаления ржавчины, размораживания замков. Но этим возможности этого универсального средства далеко не ограничиваются. Ниже вы найдете 13 способов, как WD-40 сможет выручить вас в самых разных ситуациях.

1. Разделение заклинивших стаканов

Что делать, если несколько стаканов намертво заклинили один в другом? Можно, разумеется, применить силу, но это может быть несколько осложнено в том случае, если стаканы из тонкого стекла. Поэтому просто прысните WD-40 и немного подождите, пока смазка проникнет в зазор. Затем потяните и легко освободите стаканы. Не забудьте потом хорошо помыть посуду.

2. Снятие застрявшего кольца

Наши тела имеют способность увеличиваться и уменьшаться, причем, чаще делают именно первое. Если в один прекрасный момент вы обнаружили, что привычное кольцо уже никак не хочет слезать с вашего пальца, то воспользуйтесь нашим волшебным средством. Пару капель для смазки, и кольцо легко соскользнет безо всяких заметных усилий и боли.

3. Уничтожение тараканов и отпугивание насекомых

Если вы безрезультатно перепробовали уже все средства в борьбе с домашними насекомыми, то почему бы не дать шанс WD-40? Просто распылите спрей на подоконники и рамы, вентиляционные решетки и дверные проемы. Будьте осторожны и не вдыхайте вещество, особую внимательность проявите, если у вас дома маленькие дети.

4. Удаление жевательной резинки с волос

Такая ситуация бывает не слишком часто, но, в случае возникновения, превращается в настоящий кошмар. Хорошо залипшую жвачку распутать сложно, а волосы резать нельзя, поэтому берем и наносим WD-40. Разумеется, при этом необходимо беречь глаза и органы дыхания. Спустя некоторое время посторонний предмет можно легко вычесать с помощью расчески.

5. Удаление царапин и потертостей с пола

Какой бы прочностью не обладало ваше напольное покрытие, на нем рано или поздно все равно образуются многочисленные царапины и отметины. Можно попробовать удалить их с помощью средства WD-40. Нанесите тонким слоем, подождите несколько минут, а потом зачистите нужные места с помощью щетки.

6. Удаление пятен чая

Чтобы удалить пятна чая со столешницы, нанесите немного вещества на губку или влажную ткань, и энергично потрите пятно до полного исчезновения.

7. Чистка унитазов

На полках хозяйственных магазинов стоят целые ряды различных средств для борьбы за белоснежность унитазов. Но настоящий победитель держится несколько в стороне. Опрыскайте жидкостью WD-40 поверхность, пройдитесь немного щеткой, а затем смойте. Никакого известкового налета и отложений солей.

8. Водоотталкивающая пропитка для обуви

Ваши зимние ботинки или сапоги можно сделать непромокаемыми, если нанести на них спрей WD-40. Он действует как барьер для проникновения воды, так что ваши ноги всегда будут сухими. Только учтите, что не каждое покрытие может правильно отреагировать на подобное обращение, поэтому лучше сначала поэкспериментировать на небольшом участке.

9. Очистка и восстановление номерных знаков

Номера машин довольно быстро начинают ржаветь и терять свой первоначальный вид. Поможет восстановить их все тот же замечательный спрей. Очистите номер от грязи, нанесите вэдэшку, хорошенько потрите, и он будет сверкать, как новенький. После такой обработки номерные знаки надолго будут защищены от появления ржавчины.

10. Предотвращение замерзания окон

Вы не можете повлиять на погоду и отменить зимние холода. Зато вам точно по силам нанести слой WD-40 на внешнюю поверхность стекол, и тогда ваши окна всегда будут чистыми и не будут замерзать.

11. Избавьтесь от осиных гнезд

Осы очень часто строят свои гнезда под карнизами крыши вашего дома. Такое опасное соседство не может не напрягать, поэтому лучше постараться заранее попрыскать WD-40 во все такие укромные уголки. Осы туда уже никогда не сунутся.

12. Удаление собачьих экскрементов

Есть много в жизни неприятных вещей, но очистка рифленой подошвы кроссовка или ботинка от последствий неудачного шага — это нечто. Мало того, что это ужасно пахнет, так оно еще и никак не хочет вычищаться. Остается только прибегнуть к помощи нашего универсального средства. Попрыскайте WD-40, оставьте на несколько минут в покое, а потом просто смойте под струей воды.

13. Удаление следов клея

Если вы не слишком аккуратно пользовались клеем и запачкали им окружающие поверхности или даже свои руки, то привести все в порядок можно с помощью жидкости WD-40. Она легко растворяет и удаляет даже очень сильные клеевые составы, практически без следа.

WD-40 универсальная смазка и ее применение

Жидкость WD-40 более известная как «вэдэшка» часто используется в обслуживании автомобилей. В данной статье рассмотрим основные способы применения данной смазки, ее состав и другие характеристики.

Для начала немного истории. Жидкость была изготовлена 1953 году, изначально ее назначение было обеспечить водоотталкивающие свойства и предотвращение коррозии. Но затем смазка получила широкое применение в быту, за счет своих свойств.

Что же обеспечивает такую функциональность данной жидкости?

Состав WD-40

Точная формула состава продукта находится в строгом секрете, поскольку продукт не запатентован и производители опасаются кражи и копирования технологии. Но общий состав все же известен. Главной составляющей частью wd-40 является уайт-спирит. Минеральные масла, содержащиеся в жидкости обеспечивают необходимую смазку и водоотталкивающий эффект. Определенный вид углеводородов позволяет использовать вэдэшку в виде спрея. В данным производителя продукта:

• Уайт-спирит составляет 50%;
• Вытеснитель влаги (на основе углеродов) составляет 25%;
• Минеральные масла 15%;
• Иные составляющие вещества, которые не оглашаются производителем 10%.

Способы применения смазки WD-40

Чаще всего жидкость WD-40 применяется для разъедания ржавчины в резьбовых механизмах автомобиля. Не для кого не секрет, что в автомобилях солидного срока службы не редкость увидеть прикипевшие, заржавевшие болты или гайки, которые не поддаются откручиванию. Более того, такие болты можно легко сорвать и тогда процесс выкручивания/извлечения будет гораздо сложнее. Чтобы этого избежать применяют жидкость wd-40 разъедающую ржавчину. Достаточно нанести спрей максимально на проблемный участок и подождать 10-15 минут. Примером решения проблемы с откручиванием прикипевших болтов смотрите в статье ремонт заднего суппорта. Под воздействием высоких температур болты крепления суппорта чаще всего прикипают и сложно поддаются выкручиванию.

Кроме коррозии, данное средство может устранять скрипы в салоне. Скрип чаще всего появляется из-за не плотно сидящих элементов обшивки, случается это со временем из-за попадания под обшивку пыли, грязи и других инородных предметов. WD-40 позволяет устранить скрип элементов салона, если нанести его в проблемное место (например, щель между элементами обшивки, для этого желательно точно определить источник скрипа).

Ранее мы уже писали о том, что скрип в салоне можно также устранять с помощью силиконовой смазки спрея.

Оценить публикацию

ПОХОЖИЕ СТАТЬИ

Легендарный WD-40. Мифы и реальность

   Ракеты собирали на заводе компании в калифорнийском городе Сан-Диего и для испытаний перевозили на полигон неподалеку, и за это время детали под действием влаги (особенно в зимнее время) подвергались коррозии, а конденсат приводил к нарушениям в работе электрических систем. Достичь абсолютной герметизации конструкции было невозможно, как и нанести слой смазки на все детали, и вездесущая влага делала свое черное дело. Химики компании разводили руками, но один из них все же обратился к своему приятелю Норму Ларсену – основателю небольшой фирмы с гордым названием Rocket Chemical Company («Ракетная химическая компания»).

    Ларсен вместе со всем персоналом фирмы (состоявшим из двух помощников) начал экспериментировать с различными смесями керосина, уайтспирита, минерального масла и других компонентов. Но успех никак не давался в руки – составы были либо слишком вязкими и плохо прилипали к влажному металлу, либо слишком жидкими и быстро высыхали. Из Convair приходили очередные рекламации, и процесс повторялся вновь и вновь. И вот наконец, на 40-й попытке, этот порочный круг был разрушен. К изумлению уже почти отчаявшихся конструкторов и химиков, гайка, обработанная новым составом, даже после длительного нахождения во влажной атмосфере блестела как новая. Недолго думая, Ларсен окрестил состав WD-40 (Water Displacement – вытеснитель воды). Кстати сказать: сороковая попытка в опытах это вообще ничто. По нашему можно назвать халявой или даже халтурой. Обычно, чтоб создать более менее толковый состав смазки или смеси с конкретно заданными  свойствами проводятся тысячи  опытов!!! Конструкторы Convair были очень довольны: WD-40 отлично выполнял свою задачу, причем не только в аэрокосмической отрасли – некоторые из сотрудников использовали состав для обработки автомобильных деталей. Это навело Ларсена на мысль не ограничиваться ракетами, и в 1958 году знаменитые аэрозольные баночки с WD-40 появились на прилавках магазинов. В 1961 году в состав было внесено маленькое изменение – добавлен ароматизатор, чтобы отбить запах нефти, а в 1969 году компания была переименована в WD-40 Company – по единственному на тот момент продукту, «чудодейственному эликсиру», который сейчас знаком практически каждому автомобилисту и механику.

 

 

 

Что внутри WD-40? Секретный соус Superlube

* Фото: Тим Моррис * Рецепт этого суперпродукта долгое время был строго охраняемым коммерческим секретом — до сих пор. Wired отправил банку в лабораторию и получил ингредиенты.

Минеральное масло
Серьезно. WD-40 — это в основном смесь детского масла, вазелина и гуся внутри самодельных лавовых ламп.

Декан
WD-40 содержит большое количество алканов — углеводородов, которые соответствуют формуле C _x H _{2x + 2} , обычно в длинной зигзагообразной цепочке.Этот, C ₁₀ H ₂₂ , который также является обычным ингредиентом бензина, помогает WD-40 оставаться жидкостью при низких температурах. Декан не замерзает до температуры около -21 градуса по Фаренгейту.

Нонан
Другой алкан. Одна из причин, по которой эти молекулы здесь так удобны: их атомы водорода не обладают зарядом, поэтому они не могут соединяться с водородом или кислородом в воде, что делает алканы водоотталкивающими. WD-40, в конце концов, означает «вытеснение воды, 40-я попытка».»

Наша лаборатория проанализировала WD-40 с помощью газовой хроматографии (ГХ) и масс-спектроскопии (МС). ГХ разделяет химические вещества в зависимости от размера, температуры кипения и других факторов, выделяя их одно за другим с течением времени. МС затем взрывает молекулы с помощью пучок электронов и сообщает, что по массе ионизированных фрагментов. Тридекан и ундекан
Устойчив к замораживанию? Проверить. Водоотталкивающий? Проверьте! Многие алканы вырабатываются естественным образом живыми существами.Присутствует ундекан, часть феромонного следа, оставленного тараканами и муравьями.

Тетрадекан
Другой алкан! Zzzzzz.

Диметилафталин
Вот в чем дело: этот материал (C ₁₂ H ₁₂ ) выпускается в 10 формах, называемых изомерами. Один из них — безвредный гормон, выделяемый картофелем. Другой используется в конструкционных пластмассах с высокими эксплуатационными характеристиками. Наш анализ не может определить, какие из них здесь присутствуют, но если вы используете его в качестве растворителя, как, вероятно, в случае с WD-40, все они работают нормально.

Циклогексан
Этот префикс цикло означает, что в отличие от стандартных алканов, которые входят в цепочки, это кольцо. Такая форма придает циклоалканам более высокую температуру плавления. И когда вы их обижаете, вы просто вырубаетесь. (По крайней мере, нам так говорят.)

Двуокись углерода
Компания WD-40 утверждает, что, используя этот газ в качестве пропеллента, она избегает использования более мелких газообразных алканов (возможно, бутана и пропана), которые могут быть опасны для среда. Как будто CO ₂ нет.

Начало Назад: Сопоставьте МакГаффина с фильмом Далее: Истина там, и за ней следят самые безумные ученые страны Что внутри: Бауш и Ломб ReNu

Что внутри Raid? Берегись, Китти!

Что внутри — трусы Downy Coats с конским жиром

Можно ли использовать WD40 в качестве смазки для подшипников?

«Другие сотрудники моей компании просят меня начать использовать WD40 в качестве смазки для подшипников. Я знаю, что это не лучшая практика, но мне нужно объяснить им, почему.Что-нибудь посоветуете? »

Чтобы понять, как WD40 может работать как смазка, нам нужно сначала понять его химический состав. На веб-сайте WD40 в маркетинговом ходу ингредиенты указаны как «секретные», но в паспорте безопасности материалов (MSDS) указано следующее: от 60 до 70 процентов нефтяных дистиллятов, от 15 до 25 процентов базового масла и от 2 до 3 процентов двуокиси углерода. . Таким образом, может показаться, что WD40 — это просто комбинация нефтепродуктов, смешанных с пропеллентом (CO2).

Чтобы понять эффективность WD40 в качестве смазки для подшипников, нам нужно сравнить, чем состав WD40 отличается от обычных смазочных материалов, предназначенных для использования с подшипниками качения.

Поскольку вы не упоминаете точный тип подшипника или область применения, трудно говорить конкретно; Однако можно сделать несколько общих замечаний, касающихся выбора смазочных материалов для подшипников качения:

Во-первых, смазка должна иметь хорошую стойкость к окислению, чтобы противостоять образованию шлама и нагара при рабочих температурах. Хотя в состав большинства смазочных материалов входят антиоксидантные присадки для обеспечения этой защиты, в дополнение к любой естественной защите, обеспечиваемой использованием синтетических базовых масел, из паспорта безопасности материалов следует, что WD40 не содержит таких присадок и, вероятно, будет довольно быстро разлагаться и образовывать шлам. при использовании даже при умеренных рабочих температурах.

Во-вторых, вы услышите, что «вязкость — это самое важное свойство при выборе смазки». Это особенно верно для смазки подшипников качения. Выбор вязкости зависит от ряда факторов, включая тип подшипника (шариковый, цилиндрический роликовый и т. Д.), Скорость, размер подшипника, нагрузку и рабочую температуру.

Обычно его выбирают путем расчета коэффициента скорости подшипника (dN) и предполагаемой рабочей температуры. Затем доступны стандартные диаграммы для выбора вязкости с учетом коэффициента dN и температуры.

Хотя точная вязкость нефтяных дистиллятов или базового масла в WD40 неизвестна, из опыта было определено, что оно не имеет особенно высокой вязкости. Таким образом, если это приложение не является особенно высокоскоростным, работающим при низких или умеренных температурах, маловероятно, что WD40 содержит масло с достаточно высокой вязкостью, чтобы обеспечить адекватную смазку для поверхности раздела тела качения / дорожки качения подшипника.

Еще один фактор, который следует учитывать, заключается в том, что в зависимости от конструкции подшипника поверхность раздела валок / сепаратор, вероятно, также будет работать в гидродинамических условиях.В этих условиях типичное практическое правило — минимальная вязкость 4 сантистокса (при рабочей температуре) для выдерживания нагрузки. Опять же, маловероятно, что WD40 будет соответствовать этим требованиям в качестве смазочного материала.

В-третьих, в зависимости от условий эксплуатации подшипник будет подвержен коррозии, особенно ржавчине. Почти все смазочные материалы содержат специальные присадки, называемые ингибиторами ржавчины, чтобы противодействовать этому. Опять же, в паспорте безопасности материалов нет никаких доказательств наличия таких добавок в WD40.

В-четвертых, в зависимости от конструкции подшипника и его применения может потребоваться использование противоизносных присадок, особенно в тех случаях, когда присутствуют тяжелые или ударные нагрузки или когда приложение требует возможной осевой нагрузки между концом тела качения и фланцами дорожки качения. Согласно паспорту безопасности, WD40 не содержит таких добавок, которые могут привести к усталости и / или адгезионному износу.

Имейте в виду, что WD40 производится и продается как бытовая смазка для «небольших работ» или как средство для удаления ржавчины.Для этих приложений он отлично справляется. Однако WD40 не продается и не должен использоваться в качестве замены надлежащим образом подобранной смазки для роликовых элементов на заводе — если, конечно, мы не говорим о вентиляторе в вашем компьютере.

Альтернативы маслу WD-40 — аргументы против WD-40

illuminea / Flickr

(Фото illuminea / Flickr)

Один из наиболее удручающих фактов потребительской жизни — то, что панацеи обычно не оправдывают своих обещаний. Конечно, иногда вы получаете пенициллин, продукт, который не нуждается в представлении, но в других случаях вы получаете реанимирующую солнечную настойку доктора Эбенизера Сибли, эликсир, который, как утверждается, восстанавливает жизнь в случае внезапной смерти.

А еще есть WD-40, предполагаемое средство для исправления всех проблем, которое может похвастаться широким спектром применения: от вытеснения влаги из затопленного двигателя до уничтожения тараканов, взлома бейсбольных перчаток и восстановления утонувших мобильных телефонов.Его поп-культурная вездесущность настолько велика, что он даже играет одну из главных ролей в известной апогеме разнорабочего: «Если он движется, а не должен, вам нужна клейкая лента. Если он не движется и должен двигаться, вам нужен WD- 40. »

Но действительно ли WD-40 пенициллин из набора инструментов? Или это змеиное масло смазок?

Чтобы выяснить это, мы отобрали различные продукты, рекомендованные для использования в пяти обычных домашних работах, и сравнили их с WD-40.

1. Ослабление заржавевшей гайки или болта

Устранение коррозии непокорной гайки — это нелегкая работа (для получения пошаговых инструкций щелкните здесь), для которой требуется не смазка, а проникающая жидкость — масло с очень низкой вязкостью.Есть много хороших продуктов на выбор — Kano Kroil, Liquid Wrench, CRC Freeze-Off, BG In-Force — но Боб Корнуэлл, менеджер ASE по разработке испытаний средних и тяжелых транспортных средств, и парень, который разбирается в нефти, как и инуиты, знают снег, рекомендует PB Blaster над всем остальным, включая WD-40.

PB Blaster состоит в основном из нафты и нефтяного масла и обладает сверхъестественной способностью проникать в крохотные пространства. Для достижения наилучших результатов осторожно нанесите один раз, подождите 10 минут, затем нанесите и подождите еще раз, прежде чем пытаться удалить.

И если вы не против небольшой миксологии, попробуйте приготовить самодельный коктейль из жидкости для автоматической коробки передач, смешанной в соотношении 1: 1 с ацетоном, который может быть в четыре раза — повторить четыре раза — эффективнее любого другого продукта.

МИР: 1

WD-40: 0

2. Освобождение ржавых компрессионных колец

«WD» в WD-40 означает «диспергирование воды.«Уменьшение количества влаги в цилиндре двигателя, безусловно, может помочь уменьшить трение и освободить компрессионные кольца, ржавые и замерзшие на стенках цилиндров. Но лучшим продуктом для реанимации упорно заклинившего двигателя является масло Marvel Mystery Oil, смесь нафтеновых углеводородов и минерального масла. Изобретено. созданный Бертом Пирсом после Первой мировой войны для лечения больных карбюраторов, он получил свое название от своего основателя, который отвечал на вопросы о его составе, застенчиво говоря: «Это загадка!»

Жак Гордон, ответственный редактор журнала Motor Age, говорит, что вам просто нужно снять свечи зажигания, впрыснуть немного масла Marvel Mystery Oil прямо в цилиндр, оставить его на ночь, а затем попытаться запустить на следующее утро.

Гордон отмечает, что у него есть и другие полезные качества: его паккард 1952 года с большим пробегом и шумными подъемниками был в таком плачевном состоянии, что его не стоило восстанавливать, поэтому он просто налил пинту масла Marvel Mystery Oil в бензобак и одну — в бензобак. картер. Автомобиль стал тише, плавнее и мощнее. Так он ездил на ней еще год.

МИР: 1

WD-40: 0

>

[ссылка href = ‘https: //www.popularmechanics.ru / cars / how-to / a6064 / wd-40-vs-the-world-of -ubricants / ‘link_updater_label =’ internal ‘] ПРОДОЛЖЕНИЕ >>>

3. Смазка и защита велосипедной цепи

Обработка велосипедной цепи средством WD-40 примерно так же прибыльна, как попытка тушить масляный пожар влажной пикшей. Поскольку его легкие смазывающие свойства недостаточны для того, чтобы справиться с крутящим моментом и скоростью, создаваемыми педалированием, WD-40 не сильно поможет.А поскольку рассеяние воды может ухудшить более тяжелые существующие смазки, это может даже ухудшить ситуацию.

Вместо этого рассмотрите масло на минеральной основе, разработанное специально для велосипедов. Масло Phil Wood Tenacious Oil — популярный выбор, но мы предлагаем Finish Line Cross Country, которое сохраняет свои смазывающие свойства даже в суровых условиях. Будьте осторожны, чтобы стереть излишки с цепи, чтобы уменьшить скопление песка, грязи и копоти.

Есть еще несколько вариантов. Вы можете попробовать смазку на основе воска, которая устойчива к грязи и пыли.Но воск по своей природе является плохой смазкой, и его нанесение может быть затруднительным. Некоторые велосипедисты на дальние дистанции предпочитают долговечный светильник Dumonde Tech BCL Light, который может прослужить до 1000 миль до повторного применения. И, в крайнем случае, вы можете использовать почтенное масло 3-в-1.

МИР: 1

WD-40: 0

4. Чистка и смазка огнестрельного оружия

Стрельба металлическим снарядом по металлическому стволу со скоростью более чем в два раза превышающей скорость звука, может вызвать более чем небольшое трение, которое, в свою очередь, вызывает износ, который может значительно снизить точность огнестрельного оружия.А когда вы часами сидите в скафандре Ghillie на враждебной территории, ожидая, чтобы выстрелить в цель за полмили от вас, это просто не годится.

Так же как и Staff Sgt. Тимоти Л. Келлнер, один из самых титулованных снайперов армии США, доверяет обслуживание своего оружия и, следовательно, своей жизни WD-40?

Ну да, иногда.

Он использовал WD-40 с хорошими краткосрочными результатами в некоторых своих ружьях, таких как его M14, когда других продуктов не было. Но он предпочел бы использовать выпущенный армией CLP или Strike-Hold, продукт, названный так потому, что его разработчик был бывшим членом 82-й воздушно-десантной дивизии, девизом подразделения которой было «Strike-Hold», и потому что он «поражает грязь и ржавчину. , но держит смазку.«

Когда дело доходит до очистки и смазки своей системы снайперского оружия M24, Келлнер выбирает Rem-Oil. Состоящий из алифатического нефтяного дистиллята, уайт-спирита и пропана, он является золотым стандартом для обслуживания оружия.

МИР: 1

WD-40: 0

5. Отключение звука петель для скрипящих дверей

Лучшим продуктом для смазки металл-металл является литиевая смазка.Хорошо переносит большие нагрузки — почти повсеместно используется на гаражных воротах. Он водостойкий и выдерживает температуру до 400 градусов по Фаренгейту, что означает, что он препятствует коррозии и не сгорит дверную петлю автомобиля даже при экваториальной жаре.

Тем не менее, она грязная, поэтому мы рекомендуем белую литиевую смазку, которая, как правило, не оставляет столь резких следов. Белая литиевая смазка Permatex является популярным выбором, но Gunk делает ее, как и CRC, 3-в-1, LPS, DuPont и другие.

МИР: 1

WD-40: 0

Итоговый подсчет

МИР: 5

WD-40: 0

Несмотря на окончательные итоги, WD-40 не является полным нулем.Недостаток профессионального мастерства компенсируется универсальной гибкостью. Помимо того, что он пригоден для выполнения широкого круга задач (Боб Корнуэлл использует его для удаления влаги из электрических разъемов между грузовиками и прицепами), он также хорош при очистке (Жак Гордон подтверждает, что он отлично справляется с удалением наклеек с бампера). Но его лучшая способность — препятствовать появлению ржавчины. В конце концов, он был впервые использован в 1950-х годах для предотвращения коррозии ракеты Атлас. Если этого достаточно для межконтинентальной баллистической ракеты, то и для садовых ножниц.

Этот контент создается и поддерживается третьей стороной и импортируется на эту страницу, чтобы помочь пользователям указать свои адреса электронной почты. Вы можете найти больше информации об этом и подобном контенте на сайте piano.io.

Когда не следует использовать WD-40?

WD-40 впервые был использован военными в 50-х годах для очистки частей ракет Atlas. Сегодня люди повсюду используют его, чтобы убрать практически все, что нуждается в просвете.Но не распыляйте материал куда-нибудь. WD-40 может причинить больше вреда, чем пользы определенным предметам домашнего обихода. Энтузиасты DIY на Stack Exchange звонят.

Фото Хорхе Барриос .

Вопрос:

Похоже, WD-40 можно использовать для смазки практически любых движущихся металлических деталей. Но так ли это? Бывают ли случаи, когда WD-40 может нанести вред?

— острый зуб (изначально задавался здесь)

Ответ: Держись…

WD-40 на самом деле не настоящая смазка. WD означает «вытеснение воды», и его основное применение — в качестве растворителя или растворителя ржавчины.

G / O Media может получить комиссию

Свойства смазки WD-40 зависят не от самого вещества, а от растворения компонентов. И эффект длится недолго.

WD-40 может быть хорошим средством для начала — он может помочь очистить ржавчину или другую грязь. Но в зависимости от того, с чем вы работаете, вам, вероятно, следует использовать WD-40 с использованием настоящей смазки, например, на основе силикона, смазки, тефлона или графита.

— Ответил Коди C

Принятый ответ: Огнестрельное оружие, приводные цепи и шестерни

Огнестрельное оружие — Вы никогда не должны использовать WD-40 для чистки или обслуживания огнестрельного оружия. WD-40 гигроскопичен и будет притягивать влагу к оружию, что приведет к образованию ржавчины.

Приводные цепи любого типа — Поскольку WD-40 не является смазкой, он действительно не будет работать с приводными цепями любого типа.

Зубчатые передачи любого типа — WD-40 не обладает достаточным смазывающим действием, чтобы быть полезным для любого типа зубчатой ​​передачи.В этом случае следует использовать только указанные трансмиссионные масла.

— Ответил nevadaexile

Ответ: дверные петли

Никогда не используйте WD-40 ПРОСТО на дверных петлях или на чем-нибудь, что вы хотите содержать в чистоте. Он притягивает грязь и пыль. Он сделает ваши шарнирные штифты черными.

— Ответил shirlock homes

Ответ: Велосипедные цепи

WD-40 может смывать грязь в велосипедную цепь, разрушая цепь и вынимая вместе с ней шестерни. Держитесь подальше, велосипедисты.

— Ответил Мэтью

Ответ: Музыкальные инструменты

Моя сестра работает в музыкальном магазине. Она сказала, что отец испортил кларнет своего ребенка за 800 долларов, применив WD-40 на «скрипучей части» — и нет, это не весь кларнет.

— Ответил AnonJr

Альтернативный ответ: кубики Рубика

Серьезные кубики смазывают свои кубики Jigaloo, силиконом CRC или даже вазелином. Они будут показывать пальцем и смеяться над новичками, использующими WD-40, который содержит нефтяные дистилляты (разбавитель для краски), которые могут плавиться и захватывать куб.Безумно, я знаю, но новички продолжают это делать.

— Ответил cidermonkey

Думаете, вы знаете, куда WD-40 никогда не должен идти? Оставьте свое предложение в комментариях или отправьте его на Stack Exchange , обмен экспертными знаниями по различным темам от программирования до циклического до научного скептицизма .

Значение микробиома кишечника пациентов с диабетом 2 типа из северного Китая

1.

Сюй, Ю. и др. . Распространенность и контроль диабета у взрослых китайцев. JAMA 310 , 948–959, https://doi.org/10.1001/jama.2013.168118 (2013).

CAS Статья PubMed Google ученый

2.

Чаттерджи, С., Кхунти, К. и Дэвис, М. Дж. Диабет 2 типа. Ланцет (2017).

3.

Чан, М. Растущая эпидемия смертности от диабета в Китае. Джама 317 , 264–266 (2017).

Артикул Google ученый

4.

Цзя, В. Исследования диабета в Китае: успехи. Ланцетный диабет и . Эндокринология 5 , 9–10 (2017).

Google ученый

5.

Хотамислигил Г.С. Воспаление и нарушения обмена веществ. Nature 444 , 860–867 (2006).

ADS CAS Статья Google ученый

6.

Веллен К. Э. и Хотамислигил Г. С. Воспаление, стресс и диабет. Журнал клинических исследований 115 , 1111–1119 (2005).

CAS Статья Google ученый

7.

Карлссон, Ф. Х. и др. . Метагеном кишечника у европейских женщин с нормальным, нарушенным и диабетическим контролем уровня глюкозы. Nature 498 , 99–103 (2013).

ADS CAS Статья Google ученый

8.

Ларсен, Н. и др. . Микробиота кишечника взрослых людей с диабетом 2 типа отличается от взрослых людей, не страдающих диабетом. Plos one 5 , e9085 (2010).

ADS Статья Google ученый

9.

Qin, J. et al. .Метагеномное ассоциативное исследование микробиоты кишечника при диабете 2 типа. Nature 490 , 55–60 (2012).

ADS CAS Статья Google ученый

10.

Zhou, W. et al. . Лонгитюдная множественность динамики микробов и хозяев при предиабете. Природа 569 , 663 (2019).

ADS CAS Статья Google ученый

11.

Тернбо, П. Дж. и др. . Основной микробиом кишечника у тучных и худых близнецов. Nature 457 , 480–484 (2009).

ADS CAS Статья Google ученый

12.

Лей, Р. Э. и др. . Ожирение изменяет микробную экологию кишечника. Proc. Natl. Акад. Sci. США 102 , 11070–11075 (2005).

ADS CAS Статья Google ученый

13.

Schwiertz, A. et al. . Микробиота и SCFA у худых и здоровых людей с избыточным весом. Ожирение 18 , 190–195 (2010).

Артикул Google ученый

14.

Ридаура, В. К. и др. . Микробиота кишечника близнецов, не согласных с ожирением, модулирует метаболизм у мышей. Наука 341 , 1241214 (2013).

Артикул Google ученый

15.

Капорасо, Дж. Г. и др. . QIIME позволяет анализировать данные секвенирования сообщества с высокой пропускной способностью. Nat. Методы 7 , 335–336 (2010).

CAS Статья Google ученый

16.

Уайт, Дж. Р., Нагараджан, Н. и Поп, М. Статистические методы обнаружения дифференциально распространенных признаков в клинических метагеномных образцах. PLoS Comp. Биол. 5 , e1000352 (2009).

ADS Статья Google ученый

17.

Чжан, Х. и др. . Микробиота кишечника человека при ожирении и после желудочного обходного анастомоза. Proc. Natl. Акад. Sci. США 106 , 2365–2370 (2009).

ADS CAS Статья Google ученый

18.

Тернбо, П. Дж. и др. . Микробиом кишечника, связанный с ожирением, с повышенной способностью собирать энергию. Nature 444 , 1027–1131 (2006).

ADS Статья Google ученый

19.

Аллегретти, Дж. Р. и др. . Рецидивирующая инфекция Clostridium difficile ассоциируется с различными профилями желчных кислот и микробиома. Пищевая фармакология и терапия 43 , 1142–1153 (2016).

CAS Статья Google ученый

20.

Дарзи Ю., Фалони Г., Виейра-Силва С. и Раес Дж. К анализу метаомических данных, специфичных для биомов. Журнал ISME 10 , 1025 (2016).

CAS Статья Google ученый

21.

Бербидж, Дж. Б., Маги, Л. и Робб, А. Л. Альтернативные преобразования для обработки экстремальных значений зависимой переменной. Журнал Американской статистической ассоциации 83 , 123–127 (1988).

MathSciNet Статья Google ученый

22.

Ле, К.-А. и др. . Изменения фекальных видов Lactobacillus и Bifidobacterium у пациентов с диабетом 2 типа в популяции Южного Китая. Границы физиологии 3 (2012).

23.

Ван, Ю. и др. . Анализ микробиома кишечника пациентов с сахарным диабетом 2 типа из этнических групп китайского меньшинства — уйгуров и казахов. Plos one 12 , e0172774 (2017).

Артикул Google ученый

24.

Бамола В. Д. и др. . Разнообразие кишечных микробов при здоровье и болезнях: опыт здоровых индийских субъектов, а также пациентов с карциномой толстой кишки и воспалительными заболеваниями кишечника. Microb. Ecol. Health Dis. 28 , 1322447 (2017).

Артикул Google ученый

25.

Боймлер А. Дж. И Сперандио В. Взаимодействие между микробиотой и патогенными бактериями в кишечнике. Природа 535 , 85 (2016).

ADS Статья Google ученый

26.

Lozupone, C. A., Stombaugh, J. I., Gordon, J.И., Янссон, Дж. К. и Найт, Р. Разнообразие, стабильность и устойчивость микробиоты кишечника человека. Природа 489 , 220–230 (2012).

ADS CAS Статья Google ученый

27.

Скотт К.П., Мартин, Дж. К., Дункан, С. Х. и Флинт, Х. Дж. Пребиотическая стимуляция бактерий и бифидобактерий, продуцирующих бутират толстой кишки человека, in vitro . FEMS Microbiol. Ecol. 87 , 30–40 (2014).

CAS Статья Google ученый

28.

Ривьер, А., Селак, М., Лантин, Д., Лерой, Ф. и де Вюист, Л. Бифидобактерии и бактерии толстой кишки, продуцирующие бутират: важность и стратегии их стимуляции в кишечнике человека. Границы микробиологии 7 (2016).

29.

Aydin, Ö., Nieuwdorp, M. & Gerdes, V. Микробиом кишечника как мишень для лечения диабета 2 типа. Текущие отчеты о диабете 18 , 55 (2018).

Артикул Google ученый

30.

Джонстон, Дж. Дж., Шривастава, А. и Макбрайд, М. Дж. Распутывание скользящей подвижности Flavobacterium johnsoniae и секреции белка. J. Bacteriol. 200 , e00362–00317 (2018).

CAS PubMed Google ученый

31.

Christensen, M.Х. и др. . Маркеры воспаления, триптофан-кинурениновый путь и статус витамина B после бариатрической хирургии. Plos one 13 , e0192169 (2018).

Артикул Google ученый

32.

Wu, P. et al. . Профили метилирования ДНК по всему геному матери при гестационном диабете демонстрируют характерные изменения, связанные с заболеванием, по сравнению с подобранными здоровыми беременностями. Эпигенетика 13 , 122–128 (2018).

Артикул Google ученый

33.

Варго, М. Дж., Сцверголд, Б. С. и Хоган, Д. А. Идентификация двух кластеров генов и регулятора транскрипции, необходимых для катаболизма глицин бетаина Pseudomonas aeruginosa. J. Bacteriol. 190 , 2690–2699 (2008).

CAS Статья Google ученый

34.

Adeva-Andany, M. et al. .Инсулинорезистентность и метаболизм глицина у человека. Аминокислоты 50 , 11–27 (2018).

CAS Статья Google ученый

35.

Габир М. М. и др. . Критерии гипергликемии в диагностике и прогнозировании диабета, разработанные Американской диабетической ассоциацией 1997 года и Всемирной организацией здравоохранения 1999 года. Уход за диабетом 23 , 1108–1112 (2000).

CAS Статья Google ученый

36.

Болджер А. М., Лозе М. и Усадель Б. Trimmomatic: гибкий триммер для данных последовательности Illumina. Биоинформатика , btu170 (2014).

37.

Aronesty, E. Сравнение служебных программ секвенирования. Открытая биоинформатика Журнал 7 (2013).

MathSciNet Статья Google ученый

38.

Эдгар Р. С. Поиск и кластеризация на порядки быстрее, чем BLAST. Биоинформатика 26 , 2460–2461 (2010).

CAS Статья Google ученый

39.

ДеСантис, Т. З. и др. . Greengenes, проверенная химерами база данных генов 16S рРНК и рабочая среда, совместимая с ARB. Заявл. Environ. Microbiol. 72 , 5069–5072 (2006).

CAS Статья Google ученый

40.

Kuang, Y.-S. и др. . Связь между микробиомом кишечника человека и гестационным сахарным диабетом. Gigascience 6 , gix058 (2017).

Артикул Google ученый

41.

Шеннон, П. и др. . Cytoscape: программная среда для интегрированных моделей сетей биомолекулярного взаимодействия. Genome Res. 13 , 2498–2504, https://doi.org/10.1101/gr.1239303 (2003).

CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

42.

Андерсон, М. Дж. Новый метод непараметрического многомерного дисперсионного анализа. Austral Ecol. 26 , 32–46 (2001).

Google ученый

43.

Коул, Дж. Р. и др. . Проект базы данных рибосом: улучшенное выравнивание и новые инструменты для анализа рРНК. Nucleic Acids Res. 37 , D141 – D145 (2009).

CAS Статья Google ученый

44.

Langille, M. G. et al. . Прогнозирующее функциональное профилирование микробных сообществ с использованием последовательностей маркерного гена 16S рРНК. Nat. Biotechnol. 31 , 814 (2013).

CAS Статья Google ученый

45.

Rohart, F., Gautier, B., Singh, A. & Le Cao, K.-A. mixOmics: пакет R для выбора функций omics и интеграции нескольких данных. PLoS Comp. Биол. 13 , e1005752 (2017).

Артикул Google ученый

46.

R Core Team (2014).

47.

Benjamini, Y. & Yekutieli, D. Контроль ложного обнаружения при множественном тестировании в зависимости. Анналы статистики , 1165–1188 (2001).

48.

Бенджамини, Ю. и Хохберг, Ю. Контроль уровня ложных открытий: практичный и эффективный подход к множественному тестированию. Журнал королевского статистического общества . Series B (Methodological) , 289–300 (1995).

49.

Найтс, Д., Костелло, Э. К. и Найт, Р. Классификация микробиоты человека под руководством. FEMS Microbiol. Ред. 35 , 343–359 (2011).

CAS Статья Google ученый

Химический состав и антиоксидантная способность околоплодника черного перца | Прикладная биологическая химия

Химические вещества и материалы

Фенольный реагент Фолина, 1,1-дифенил-2-пикрилгидразильный радикал (DPPH), 2,2′-азино-бис (3-этилбензотиазолин-6-сульфоновая кислота) (ABTS), 2,2′-азобис (2-амидинопропан) дигидрохлорид (AAPB), D-катехин, моногидрат галловой кислоты и этиловый спирт были получены компанией MilliporeSigma (St.Луис, Миссури, США). Азотная кислота (Dongwoo Fine-Chem, Иксан, Корея) и стандарты минералов (AccuStandard, Нью-Хейвен, Коннектикут, США, ) , а именно Ca, K, медь (Cu), железо (Fe), Mg, марганец (Mn) , натрий (Na) и цинк (Zn).

Образцы

Перец 5 кг был приготовлен из зрелых зерен перца, собранных в марте 2017 года компанией Ottogi Sesame Mills Co., Ltd (Ымсон, Чхунчхонпукто, Корея). После сбора урожая горошины перца отделяли от стеблей, а затем сушили на солнце в течение 7–10 дней для получения черного цвета.Наконец, околоплодник механически отделяли от перца на машине для удаления корней (Sinco Mechanical JSC, Вьетнам). Его измельчали ​​и просеивали через 60 меш, а затем хранили при комнатной температуре в темноте.

Подготовка образца

Образец 5 г измельченного околоплодника гомогенизировали с 80% этиловым спиртом объемом 100 мл с использованием KWG-150 производства Sunway Electric (Хешань, Китай). Смесь инкубировали в течение дня в инкубаторе со встряхиванием (DH.WIS 02011, Daihan Scientific Co., Ltd., Тэгу, Кёнбук, Корея) с последующим центрифугированием при 15000 об / мин в течение 10 минут (Mega21R, Hanil Scientific, Inc., Кимпхо, Дьенгги-до, Корея). Верхний слой отбирали и фильтровали через фильтр Minisart (размер пор 0,45 мкм, регенерированная целлюлоза), а затем концентрировали до 20 мл на роторном испарителе (N-1000, Eyela, Tokyo, Japan). Экстракт хранили при -80 ° C до анализа химических компонентов и антиоксидантной активности.

Биоактивные соединения и антиоксидантная активность околоплодника перца

Общее количество флавоноидов

Общее количество флавоноидов определяли с помощью колориметрического анализа [19, 20].1 мл экстракта пробы и дистиллированная вода (4 мл) помещали в пробирку емкостью 15 мл, затем в пробирку добавляли 0,3 мл 5% NaNO ₂ и оставляли смесь реагировать при комнатной температуре на 5 мл. мин. После добавления 0,3 мл 10% AlCl ₃ смесь оставляли для дальнейшей реакции при комнатной температуре в течение 6 минут перед добавлением 2 мл 1 н. NaOH. Добавляли дистиллированную воду, доводя общий объем до 10 мл. Оптическую плотность регистрировали на спектрофотометре (Optizen POP, Mecasys, Daejeon, Korea) при 510 нм.Катехин использовали в качестве стандарта для построения калибровочной кривой. Общее количество флавоноидов выражали в миллиграммах эквивалентов катехина (CE) / 100 г свежего веса (FW).

Суммарные фенолы

Суммарные фенолы анализировали колориметрическим методом Фолина – Чокальте [19, 20]. Реагент Фолина – Чокалтеу (0,2 мл) добавляли в пробирку объемом 15 мл, содержащую 0,2 мл экстракта пробы и 2,6 мл дистиллированной воды. Смесь оставляли при комнатной температуре на 6 минут, а затем добавляли 0,2 мл 7% Na ₂ CO ₃ с последующей инкубацией при комнатной температуре в течение 90 минут в темноте.Спектрофотометрическое поглощение определяли при 750 нм. Общее содержание фенола было показано в миллиграммах эквивалентов галловой кислоты (GAE) / 100 г FW путем оценки калибровочной кривой галловой кислоты.

Пиперин

Пиперин определяли, как описано Santosh et al. с некоторыми изменениями [21]. Коническая пробирка объемом 50 мл, содержащая 0,1 г экстракта образца и 50 мл метанола, экстрагировалась ультразвуком при 50 ° C в течение 20 мин. Экстрагированный образец охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через шприцевой фильтр Minisart (0.45 мкм, регенерированная целлюлоза). Пиперин детектировали с помощью аппарата для высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) (Agilent, Санта-Клара, Калифорния, США), оснащенного диодно-матричным детектором (340 нм) и колонкой Eclipse C18 Plus (4,6 × 150 мм, 5 мкм; Agilent). поддерживается при 25 ° C. В качестве подвижной фазы использовали ацетонитрил – 1% лимонную кислоту (45:55, об. / Об.) В изократическом режиме при скорости потока 1 мл / мин в течение 20 мин. Объем инъекции составлял 10 мкл. Идентифицирован пик пиперина и его спектры на хроматограмме ВЭЖХ (рис.1).

Рис. 1

ВЭЖХ-хроматограмма и спектр поглощения околоплодника черного перца

Активность по улавливанию радикалов DPPH

Активность по улавливанию радикалов DPPH анализировали методом, описанным Brand-Williams et al. с некоторыми изменениями [22]. Раствор DPPH (100 мкМ) разбавляли 80% метанолом до поглощения 0,65 ± 0,02 при длине волны 517 нм. Экстрагированный образец (50 мкл) смешивали с 2950 мкл DPPH, разведенного из 0,1 мМ раствора DPPH, и оставляли реакцию в течение 30 мин.Поглощение при 517 нм (спектрофотометр Optizen POP, Mecasys) было показано в миллиграммах эквивалентов витамина C (VCE) / 100 г FW.

Активность по улавливанию радикалов ABTS

Активность по улавливанию радикалов ABTS измеряли аналитическим методом, описанным Floegel et al. [23]. ABTS (137,175 мг) и AAPH (27,117 мг) получали в 100 мл фосфатного буфера с последующей реакцией на водяной бане при 70 ° C в течение 40 минут для получения радикалов ABTS и затем охлаждали при комнатной температуре.Рабочие растворы разбавляли раствором радикала ABTS физиологическим раствором с фосфатным буфером для получения оптической плотности при 734 нм от 0,63 до 0,67. Наконец, образец (20 мкл) и рабочий раствор (980 мкл) были смешаны и прореагировали при 37 ° C в течение 10 мин. Оптическую плотность раствора при 734 нм определяли на спектрофотометре (Optizen POP, Mecasys). Антиоксидантную активность раствора выражали в миллиграммах VCE / 100 г FW.

Ароматизирующие соединения методом газовой хроматографии / масс-спектрометрии (ГХ / МС)

Два грамма образца добавляли в янтарный флакон объемом 20 мл с ПТФЭ / силиконовыми перегородками и уравновешивали при 80 ° C в течение 30 минут с свободным пространством над головой. пробоотборник при перемешивании со скоростью 300 об / мин.ГХ / МС анализ выполняли с использованием системы 6890 ГХ / МС (Agilent Co., Санта-Клара, Калифорния, США), установленной с колонкой HP-INNOWax (60 м × 0,25 мм × 0,25 мкм; Agilent Co.) [24]. Образец (1 мл) вводили шприцем в режиме раздельного ввода (20: 1) при 230 ° C с гелием (чистота> 99,9%) в качестве газа-носителя при скорости потока 1 мл / мин. Духовку первоначально поддерживали при 40 ° C в течение 2 минут, затем нагревали со скоростью 5 ° C / мин до 230 ° C и выдерживали при этой температуре в течение 10 минут. Ароматизаторы идентифицировали путем сравнения полученных спектров с библиотекой (NIST 2005, John Wiley & Sons, Нью-Йорк, Нью-Йорк, США).На рис. 2 представлена ​​хроматограмма пиков ароматов в околоплоднике черного перца, полученная методом ГХ / МС.

Рис.2

Хроматограмма ГХ / МС летучих соединений в околоплоднике черного перца

Ароматизирующие соединения посредством электронного носа (электронный нос)

Электронный носитель типа GC (Heracles II, Alpha MOS, Тулуза, Франция) с двойной колонкой (неполярный MXT-5 и слабополярный MXT-1701, длина 10 м × диаметр 180 мкм; Restek, Lisses, Франция) и двойной пламенно-ионизационный детектор (FID) использовался для анализа профиля ароматических компонентов.Температуру печи увеличивали с 50 ° C (поддерживали в течение 2 с) до 260 ° C со скоростью 1 ° C / с. Образец (0,8 г) переносили во флакон объемом 20 мл и инкубировали при 50 ° C в течение 5 мин при перемешивании со скоростью 500 об / мин. Затем вводили 1000 мкл со скоростью 1 мл / мин и измеряли пять раз. Для идентификации пиков и анализа главных компонентов (PCA) использовались AroChemBase (база данных индекса удерживания NIST) и AlphaSoft (версия 17.0; Alpha MOS).

Минералы

Ca, Cu, Fe, K, Mg, Mn, Na и Zn были идентифицированы с помощью процедуры, разработанной Jung et al.[24]. Аликвоту образца массой 0,6 г готовили в тефлоновом сосуде для разложения с концентрированной азотной кислотой объемом 7 мл и обрабатывали в течение 40 мин при постепенно увеличивающемся нагревании под давлением при 1000 Вт. Перевариваемый образец разбавляли водой в колбах на 50 мл. для анализа минералов с использованием атомно-эмиссионного спектрометра с индуктивно связанной плазмой (ACTIVA-M, HORIBA Jobin – Yvon, Longjumeau, Франция) с устройством с зарядовой связью. Использовалась газовая плазма аргона (расход 13 л / мин, поток в оболочке 1.5 л / мин). Длины волн поглощения составляли 317,933, 324,754, 238,207, 766,490, 285,213, 275,610, 589,592 и 213,857 нм для Ca, Cu, Fe, K, Mg, Mn, Na и Zn соответственно. Для калибровки разбавляли стандартный многоэлементный раствор. Определенные концентрации представлены в миллиграммах / 100 г FW.

Статистический анализ

Все эксперименты проводили трижды. Данные были представлены в виде среднего значения ± стандартное отклонение с использованием Microsoft Office Excel 2010 (Microsoft Corporation, Редмонд, Вашингтон, США).Дисперсионный анализ выполняли с использованием SAS версии 9.4 (SAS Institute, Inc., Кэри, Северная Каролина, США) для статистического анализа каждого эксперимента. Достоверность определялась с помощью теста множественных диапазонов Дункана с p <0,05.

Состав микробиоты кожи человека влияет на привлекательность для малярийных комаров

Abstract

Африканский малярийный комар Anopheles gambiae sensu stricto продолжает играть важную роль в передаче малярии, которая усугубляется высокой степенью антропофилии, что делает его одним из основных переносчиков этой болезни.В текущем исследовании мы намеревались раскрыть прочную связь между этим видом комаров и людьми, поскольку она определяется запахами, исходящими от кожи человека. Сообщества микробов на коже играют ключевую роль в создании запаха человеческого тела. Мы демонстрируем, что состав микробиоты кожи влияет на степень привлекательности человека для этого вида комаров. Подсчет бактериальных пластинок и секвенирование 16S рРНК показали, что особи, которые очень привлекательны для An.gambiae s.s. имеют значительно более высокую численность, но меньшее разнообразие бактерий на коже, чем люди с низкой привлекательностью. Выявлены роды бактерий, которые коррелируют с относительной степенью привлекательности для комаров. Обнаружение связи между популяциями микробов кожи и привлекательностью для комаров может привести к разработке новых аттрактантов комаров и персонализированных методов защиты от переносчиков малярии и других инфекционных заболеваний.

Образец цитирования: Verhulst NO, Qiu YT, Beijleveld H, Maliepaard C, Knights D, Schulz S, et al. (2011) Состав микробиоты кожи человека влияет на привлекательность малярийных комаров. PLoS ONE 6 (12): e28991. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0028991

Редактор: Брэдли С. Шнайдер, Глобальная инициатива по прогнозированию вирусов, Соединенные Штаты Америки

Поступила: 20 сентября 2011 г .; Принята к печати: 17 ноября 2011 г .; Опубликовано: 28 декабря 2011 г.

Авторские права: © 2011 Verhulst et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Финансирование: Это исследование финансировалось за счет гранта Фонда национальных институтов здравоохранения в рамках инициативы «Грандиозные вызовы в области глобального здравоохранения» (GCGH # 121), а также гранта Фонда наук о Земле и жизни Нидерландской организации. для научных исследований.Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Введение

Расположение хозяина у самок комаров опосредуется физическими и химическими сигналами хозяина. Физические сигналы включают тепло, влажность и визуальные сигналы и играют роль во время ориентации и приземления [1], [2], [3]. Химические сигналы считаются наиболее важными для ориентации и приземления, особенно для ночных комаров [4], [5], и люди могут быть оценены по привлекательности для комаров путем тестирования эманации, испускаемой их кожей [6], [7], [8] , [9].Комар Anopheles gambiae Giles sensu stricto (далее An. Gambiae ), ночной, высокоантропофильный вид, является одним из наиболее важных переносчиков малярии в Африке [5]. Летучие вещества, выделяемые из кожи человека, являются важными сигналами, которые направляют этот вид комаров к своему хозяину [4], [5].

Кожные бактерии играют важную роль в создании запаха человеческого тела, и без бактерий человеческий пот не имеет запаха для человеческого носа [10]. Кожные бактерии превращают нелетучие соединения в летучие соединения с характерным запахом.Запах тела отдельных людей коррелирует с присутствием конкретных микроорганизмов [11], [12], [13] и с подробными микробными профилями кожи, которые оцениваются с помощью анализа денатурирующего градиентного гель-электрофореза (DGGE) [14]. Однако взаимодействие между кожными микробами и человеком-хозяином все еще плохо изучено [15], а влияние микробного состава кожи на переносчиков болезней остается в значительной степени неизвестным [16].

Эккринный пот человека более привлекателен для An.gambiae после инкубации с кожными бактериями в течение одного или двух дней [17] и мытье ног бактерицидным мылом значительно изменяет выбор места укуса на An. gambiae [18]. Недавно было показано, что летучие вещества, продуцируемые кожными бактериями человека, выращенными in vitro , привлекательны для самок An. gambiae при тестировании в ольфактометре или с ловушками для комаров [19], [20].

Здесь мы исследовали in vivo , как состав микробиоты кожи влияет на привлекательность человека для комаров, оценивая привлекательность 48 человек мужского пола по отношению к An.gambiae и анализируя бактериальные сообщества их кожи. Впоследствии мы сопоставили наблюдаемые эффекты с численностью и составом микробов.

Методы

Комары

Колония Anopheles gambiae Giles sensu stricto происходит из Суакоко, Либерия. Комаров выращивали по методикам, описанным ранее [9].

Волонтеры

Привлекательность 48 взрослых мужчин в возрасте от 20 до 64 лет до Ан.gambiae . 46 мужчин были кавказского происхождения, один — выходцем из Азии, а другой — латиноамериканцем. Голландский комитет по медицинской этике (METC, номер проекта ABR NL16928.081.07 с поправками 2007 г.) одобрил исследование, и до участия всех субъектов было получено письменное информированное согласие. Добровольцев попросили воздерживаться от употребления алкоголя [21], употребления чеснока, лука или острой пищи, принятия душа, использования парфюмированной косметики и их попросили надеть нейлоновые носки, предоставленные исследовательской группой, в течение суток до отбора проб.Добровольцы не страдали хроническими заболеваниями и не принимали на регулярной основе никаких лекарств. Перед использованием носки, предоставленные исследовательской группой (100% полиамид, 40 денье, Hans Textiel, Нидерланды), дважды промывали 70% этанолом и сушили в вентилируемой печи при 80 ° C. Добровольцев проинструктировали не использовать мыло в последний раз, когда они принимали душ перед экспериментом.

Биоанализ на олфактометре

Кожные эманации каждого человека собирали дважды в три разных дня, протирая шесть стеклянных шариков [9] (диаметром 15 мм, содержащихся в тефлоновом держателе, рис. S1) в течение 10 мин.против нижней части левой стопы. Ноги производят летучие вещества, привлекательные для An. gambiae , и есть свидетельства того, что эта часть тела вырабатывает летучие вещества, которые влияют на выбор места укуса этим видом комаров [18]. Бусы с кожными эманациями были проверены на привлекательность для женщин An. gambiae в ольфактометре двойного выбора (1,60 × 0,66 × 0,43 м) против стандартной концентрации аммиака 136 ppm всего шесть раз: два последовательных анализа в каждое из трех утра [9].Выпуск тестовых стимулов чередовался между левым и правым портами улавливающих устройств ольфактометра, чтобы исключить любые позиционные эффекты. Скорость воздуха в портах составляла 0,21 ± 0,01 м / с. В экспериментальной комнате поддерживалась температура 27,9 ± 0,7 ° C и относительная влажность 62,3 ± 5,8%. Температура внутри полетной камеры составляла 27,9 ± 1,7 ° С, влажность 69,0 ± 4,6%. Влажность воздуха, подаваемого в улавливающие устройства, поддерживалась выше 80%, а его температура составляла 28,0 ± 1,5 ° C. После использования улавливающие устройства были промыты в посудомоечной машине при 45 ° C с использованием биологического мыла (вкладки Sonnett, Sonnet OHG, Германия).Стеклянные шарики очищали путем ополаскивания в растворе 10% чистящего концентрата Helmanex® II (Hellma GmbG & Co KG, Германия) в воде, затем в дистиллированной воде и, наконец, в этаноле (чистота 99,8%; Merck, Германия). Промытые шарики сушили в печи при 200 ° C в течение не менее одного часа. Между экспериментами тефлоновый держатель очищали 70% этанолом и быстро сушили с помощью теплового пистолета (Ferm B.V., Нидерланды).

Бактериальное разнообразие кожи

Бактериальный состав кожи на ногах людей определяли селективным и неселективным подсчетом в чашках и секвенированием гена 16S рРНК.Связывание селективных и неселективных подсчетов на планшете с относительной привлекательностью летучих веществ кожи дало первое указание на то, влияет ли микробиота кожи на привлекательность излучений кожи человека для An. gambiae . Гены 16S рРНК содержат гипервариабельные области, последовательности которых могут обеспечить детальную сигнатуру микробиоты на ноге человека.

Сбор образцов.

В каждый день эксперимента образец бактерий брали с подошвы левой ступни каждого человека после оценки привлекательности этого человека для комаров в ходе двух последовательных экспериментов на ольфактометре.Бактериальные образцы были взяты с использованием кольца для отбора проб и промывочного буфера, как описано ранее [12], [19]. Семьсот мкл образца добавляли к 300 мкл глицерина (87%, Merck, Германия) и хранили при -80 ° C для последующей идентификации с помощью секвенирования 16S рРНК. Оставшуюся часть образца использовали для подсчета на планшетах на селективных и неселективных средах.

Селективный и неизбирательный подсчет на чашках.

В течение трех часов после взятия бактериального образца 100 мкл каждого образца разбавляли в десятичной степени, наносили на чашки с колумбийским (овечьем) кровяным агаром (Tritium, Нидерланды) и инкубировали при температуре кожи (34 ° C) для определения плотности бактерий с помощью подсчет колониеобразующих единиц (КОЕ).Ряд селективных сред был использован для определения разнообразия образцов микробиоты кожи человека в соответствии с методом, описанным ранее [8] (Таблица S1). Среды были либо селективными в отношении стафилококков, аэробных коринебактерий, микрококков, либо пропионибактерий (Tritium, Нидерланды).

Бактериальные гены 16S рРНК.

Всего было собрано 144 бактериальных образца; по три образца от каждого добровольца в разное утро. Микробную ДНК выделяли из 41 бактериального образца с помощью почвенного набора FastPrepDNA (MP Biomedicals, США).Из них 13 образцов не дали достаточного количества ДНК и поэтому были исключены из дальнейшего анализа. Остальные 116 образцов были экстрагированы с помощью набора Mo-Bio Power Soil (MO BIO Laboratories, Inc., США). Результаты двух методов экстракции не различались, и данные были объединены для окончательного анализа.

ПЦР-амплификацию области V2 бактериальных генов 16S рРНК, количественную оценку ампликонов, объединение и пиросеквенирование проводили, как описано ранее [22]. Последовательности были отправлены в базу данных MG-RAST (http: // metagenomics.anl.gov/) под номером исследования qiime: 814.

Последующая обработка результатов пиросеквенирования была выполнена с помощью программного пакета QIIME [23]. Первое соответствующее шумоподавление на выходе пиросеквенирования 454 было выполнено с использованием алгоритма PyroNoise [24]. Затем программное обеспечение UCLUST (http://www.drive5.com/usearch/usearch.pdf) использовалось для выбора кластеров операционных таксономических единиц (OTU) на уровне сходства 97%. Программное обеспечение классификатора Ribosomal Database Project (RDP) [25] с обучающей таксономией по умолчанию присвоило таксономические метки результирующим OTU.Наконец, OTU были помещены в филогенетическое дерево de novo с помощью FastTree 2 [26].

Статистический анализ

Данные олфактометра.

GLM (Обобщенная линейная модель; биномиальная, логит-функция связи, оценка дисперсии, Genstat версия 13.2) использовалась для исследования различий в относительной привлекательности между людьми, выраженной как доля москитов, пойманных в ловушку, наживленную с помощью высвобождающихся стеклянных шариков. запах испытуемого, разделенный на общее количество комаров, пойманных вместе в двух ловушках [9].После GLM был проведен тест t для расчета попарных различий между средними значениями. Люди были классифицированы как очень привлекательные (HA), когда их средняя относительная привлекательность была значительно выше, чем средняя относительная привлекательность каждого человека в группе, классифицированной как плохо привлекательная (PA), что означает, что стандартная ошибка оценки параметра GLM не перекрывалась. Эффекты считались значимыми при p <0,05 [9].

Бактериальное разнообразие кожи.

Влияние средней плотности бактерий, выраженное как логарифм подсчета КОЕ на селективных и неизбирательных чашках, на относительную привлекательность особей было проанализировано с использованием GLM (биномиальная, логит-функция связи, оценка дисперсии, Genstat версия 13.2).

Результаты последовательности 16S рРНК были использованы для определения разнообразия кожных бактериальных сообществ людей. Тест филогенетического разнообразия (PD) [27] использовался для сравнения длины ветвей частей филогенетического дерева, охваченных образцами.Чтобы контролировать усилия по секвенированию, были выполнены множественные анализы разрежения [28] для всех образцов на разной глубине секвенирования (1000 образцов разрежения на каждой глубине секвенирования от 500 до 3000 с интервалами 500). Тест t (среда программирования R, http://www.R-project.org) использовался для проверки значительного различия микробного разнообразия между группами PA и HA на разных глубинах отбора проб. Статистические данные о разнообразии на глубинах последовательностей более 1500 не проводились, поскольку выборки некоторых особей не содержали более 1500 последовательностей.

Основываясь на предыдущих результатах экспериментов in vitro , был проведен тест ANOVA (среда программирования R), чтобы определить, была ли наблюдаемая дисперсия в относительной численности пяти конкретных родов [20] разделена в соответствии с группами PA и HA. Данные контролировались с точки зрения усилий по секвенированию. Тысячи стохастических разрежений данных использовались при моделируемой глубине секвенирования 1500. ANOVA был выполнен для каждой из этих разреженных OTU-таблиц и определено медианное значение P .

Относительная численность родов, идентифицированных в образцах кожных бактерий у людей с PA и HA, была проанализирована многомерным дискриминантным анализом частичных наименьших квадратов (PLS-DA; SIMCA-P 12.0, Umetrics, Швеция) [29], [30]. Данные были преобразованы в логарифм и масштабированы до единичной дисперсии. Количество значимых компонентов PLS определялось перекрестной проверкой, а модель проверялась перестановочным тестированием [29], [31]. Чтобы избежать чрезмерной параметризации модели, роды с незначительным вкладом в различение двух групп в первом PLS-DA были исключены из окончательной модели (влияние переменных на значение проекции <1 [26], [28]).

Результаты

Относительная привлекательность особей до Ан. gambiae значительно отличался ( P <0,001; GLM). Девять из 48 человек были значительно более привлекательными (высокая привлекательность, группа HA, рис. 1), чем семь других лиц (плохо привлекательные, группа PA, p <0,05; GLM, рис. 1).

Рисунок 1. Относительная привлекательность к An. gambiae из 48 человек.

Столбцы показывают результаты оценки параметров привлекательности с помощью Обобщенной линейной модели (GLM), используемой для исследования относительной привлекательности [9] каждого человека по отношению к An.gambiae . Лица были классифицированы как очень привлекательные (HA, синие столбцы), когда их средняя относительная привлекательность была значительно выше, чем средняя относительная привлекательность каждого человека в группе, классифицированной как плохо привлекательная (PA, красные столбцы) (GLM, p <0,05) . Планки погрешностей представляют собой стандартную ошибку среднего для шести повторений.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0028991.g001

Неселективный подсчет на чашках показал, что в среднем 5.8 × 10 ⁵ культивируемых бактерий присутствовало на ² см на подошве стопы человека, как определено путем подсчета колониеобразующих единиц (КОЕ) на чашках с кровяным агаром. Среднее количество бактерий на см ² на подошве стопы положительно коррелировало с относительной привлекательностью особей по отношению к An. gambiae ( p = 0,003; GLM; рисунок 2). Численность Staphylococcus spp. также положительно коррелировала с относительной привлекательностью особей к An.gambiae ( p = 0,01; GLM; рисунок S2). Число бактерий на см ² , как определено подсчетом КОЕ на чашках с кровяным агаром и числом колоний на см ² на чашках, селективных в отношении Staphylococcus spp. сильно коррелировали, предполагая, что многие из бактериальных колоний, обнаруженных на чашках с кровяным агаром, были Staphylococcus spp. Численность Corynebacteria spp., Micrococcus spp. и Propionibacteria spp.не показали корреляции с относительной привлекательностью индивидов ( p = 0,085, p = 0,28 и p = 0,41, соответственно; GLM).

Рис. 2. Обилие бактерий в коже и относительная привлекательность для An. gambiae .

Корреляция между количеством бактерий (log), определенным подсчетом колониеобразующих единиц (КОЕ) на неизбирательных чашках, и относительной привлекательностью особей. Относительная привлекательность выражается как количество комаров, пойманных в ловушку, испускающую запах испытуемого, деленное на общее количество комаров, пойманных в ловушку в обоих ловушках [9].Красная линия указывает подобранные отношения согласно Обобщенной линейной модели (GLM).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0028991.g002

Результаты анализа последовательности 16S рРНК показали, что показатели филогенетического разнообразия (PD) [27] индивидов HA и индивидов PA значительно различались. PD-баллы сообществ на индивидуумах PA были значительно выше, чем на индивидуумах HA на смоделированной глубине 500 и 1000 последовательностей и незначительно значимы на глубине секвенирования 1500 последовательностей ( p = 0.032, P = 0,043 и p = 0,057 соответственно; т -тест; Рисунок 3). При глубине последовательности 1000, PD-оценки бактериальных сообществ на коже людей с PA были на 38% выше, чем PD-оценки бактериальных сообществ на коже людей с HA.

Рис. 3. Кривые разрежения, показывающие среднее бактериальное разнообразие от мало привлекательных (PA,) и очень привлекательных (HA) особей.

P -значение разницы в оценке разнообразия между особями PA (пунктирная красная линия) и HA (сплошная синяя линия) дается на трех глубинах выборки (не рассчитывается для большего количества последовательностей, потому что выборки от некоторых особей не дает более 1500 последовательностей).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0028991.g003

Относительная численность OTU, идентифицированных с помощью процедуры пиросеквенирования и отнесенных к родам Staphylococcus и Pseudomonas , значительно различалась между HA и PA индивидуумами ( p = 0,024 и p = 0,005 соответственно; t-критерий). Численность Staphylococcus spp. была в 2,62 раза выше в группе HA, чем в группе PA, а численность Pseudomonas spp.В 3,11 раза выше в группе PA, чем в группе HA. Численность Brevibacterium spp. и Corynebacterium spp. достоверно не различалась между группами PA и HA ( p = 0,52 и p = 0,26, соответственно; t-критерий). Влияние численности Bacillus spp. на привлекательность не тестировалась, поскольку они присутствовали лишь в ограниченном количестве образцов.

Дополнительные роды, коррелирующие с человеческой привлекательностью с An.gambiae были идентифицированы с помощью PLS-DA [29], [30], [31]. Модель дифференцировала группы PA и HA на основе относительной численности бактериальных родов (три значимые латентные переменные, R ² X _кум = 0,544, R ² Y _кум = 0,993, Q ² _кум = 0,823). Коэффициенты регрессии PLS были определены для определения родов, наиболее характерных для каждой группы (рисунок S3). Variovorax spp.и Pseudomonas spp. были значительно коррелированы с индивидуумами ПА на основании их высоких коэффициентов регрессии PLS (95% доверительный интервал, рисунок 4 и рисунок S3). Leptotrichia spp., Delftia spp. и Actinobacteria Gp3 spp. были значительно коррелированы с людьми с HA (Рисунок 4 и Рисунок S3).

Рис. 4. Многомерный анализ данных бактериальных профилей плохо привлекательных (PA) и очень привлекательных (HA) лиц.

Нагрузочный график частичного дискриминантного анализа наименьших квадратов (PLS-DA), основанный на относительной численности бактериальных родов в профилях микробиоты плохо привлекательных (PA) и очень привлекательных (HA) лиц. Бактериальные роды, близкие к HA или PA на графике, более тесно коррелируют с индивидуумами HA или PA. PLS 1 ( R ² X = 0,370, R ² Y = 0,682, Q ² = 0,553) и PLS 2 ( R ² X = 0.102, R ² Y = 0,260, Q ² = 0,424). Роды, которые вносят значительный вклад в прогнозирование модели, обозначены синим (люди с HA) и красным (люди с PA) (на основе 95% доверительных интервалов, рисунок S3). Некоторые последовательности можно было идентифицировать только по разделу (D), классу (C), порядку (O) или семейству (F).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0028991.g004

Обсуждение

В этом исследовании мы продемонстрировали, что состав и численность микробиоты кожи человека влияет на относительную степень привлекательности человека для малярийного комара An.gambiae . Лица с более высоким микробным разнообразием были менее привлекательны для комаров, и было идентифицировано несколько родов бактерий, которые коррелировали с особями HA или PA. Идентификация летучих веществ, продуцируемых этими видами, вероятно, приведет к разработке новых аттрактантов или репеллентов комаров [20].

Лишь небольшая часть бактерий, обнаруженных на коже человека, подлежит культивированию [32], и поэтому важным подтверждением было то, что результаты нашего исследования in vivo подтвердили предыдущие исследования in vitro , в которых летучие вещества выделялись стафилококком . epidermidis были привлекательными для An.gambiae самок [19], [20] и летучие из Pseudomonas aeruginosa непривлекательны [20]. Ненаправленный поиск PLS-DA в этом исследовании привел к идентификации нескольких новых родов, которые коррелируют с относительной степенью привлекательности человека для An. gambiae .

Корреляция между Pseudomonas spp. и ПА в соответствии с экспериментами in vitro , показывающими, что смесь соединений, продуцируемых P.aeruginosa привлекательна для An. gambiae (в отличие от летучих веществ, продуцируемых четырьмя другими видами бактерий, которые обычно встречаются на коже человека) [20]. Наши результаты показывают, что Pseudomonas spp. и, возможно, Variovorax spp. а) преобразовывать некоторые из привлекательных соединений, продуцируемых другими бактериями, б) передавать сигналы другим бактериям таким образом, чтобы они не выделяли эти привлекательные соединения, в) производили соединения, которые отталкивают An. gambiae , или d) маскирует эффект привлекательных летучих веществ, исходящих из кожи человека.Более гетерогенные микробиоты могут включать больше видов бактерий, которые продуцируют летучие вещества, снижающие привлекательность особей PA для комаров, и могут объяснять интерференционный эффект, описанный для комара желтой лихорадки Aedes aegypti (L). [7]: было обнаружено, что более высокие уровни специфических летучих соединений ответственны за снижение привлекательности людей до Ae. Аегипти . Мы предполагаем, что более низкая привлекательность для комаров вызвана отборной группой микробиоты кожи, которая выделяет соединения, которые препятствуют привлечению комаров к их человеческим хозяевам и, таким образом, функционируют как встроенная система защиты [33].Было показано, что гены главного комплекса гистосовместимости (MHC) влияют на запах тела [34], [35], [36] и могут оказывать это влияние, изменяя состав микробиоты кожи и, следовательно, летучие вещества, продуцируемые этими бактериями и / или человеческий хозяин [16], [37].

Текущее исследование показывает, что микробиота кожи может играть важную роль в этой встроенной системе защиты и, следовательно, может влиять на передачу паразитов малярии [16], [38]. Особи с более высоким микробным разнообразием и более высокой численностью Pseudomonas spp.или Variovorax spp. менее привлекательны для комаров и поэтому могут подвергаться меньшему количеству укусов. Будущие исследования должны подтвердить, имеют ли люди с определенным составом микробиоты более низкий риск заражения паразитами и, следовательно, более высокую вероятность выживания.

Соединения, подавляющие микробное производство запаха человека [13], или изменение состава микробиоты кожи могут снизить привлекательность человека для комаров. Анализ летучих бактерий, привлекательных для комаров, продуцируемых Leptotrichia spp., Delftia spp. и Actinobacteria Gp3 spp. Бактерии, идентифицированные в этом исследовании [20], также будут способствовать разработке аттрактантов, которые будут использоваться в ловушках для мониторинга популяций малярийных комаров или стратегий «приманить и убить» [39].

Результаты, представленные в этом исследовании, способствуют нашему фундаментальному пониманию поведенческой экологии комаров. Специализация Ан. gambiae s.s. о человеческих запахах, опосредованных составом человеческого бактериального сообщества, может объяснять высокую степень антропофилии An.gambiae s.s . Интересно, что два близкородственных вида-родственников An. quadriannulatus и An. arabiensis , имеют более широкий круг хозяев, более зоофильных [40], [41], [42] или оппортунистических [43], [44] соответственно. Бактериальные сообщества других видов позвоночных могут отличаться от сообществ людей и могут играть важную роль в определении круга хозяев комаров [45].

Вспомогательная информация

Рисунок S2.

Staphylococcus spp.-селективный подсчет планшетов и относительная привлекательность до Ан. gambiae . Корреляция между численностью Staphylococcus spp. бактерий (log), определяемого подсчетом колониеобразующих единиц (КОЕ) на Staphylococcus spp. селективные тарелки и средняя относительная привлекательность людей. Относительная привлекательность выражается как количество комаров, пойманных в ловушку, испускающую запах испытуемого, деленное на общее количество комаров, пойманных в ловушку в обоих ловушках.Красная линия указывает подобранные отношения согласно Обобщенной линейной модели (GLM).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0028991.s002

(TIF)

Рисунок S3.

График коэффициентов бактериальных профилей плохо привлекательных (PA) и очень привлекательных (HA) индивидуумов. График коэффициентов частичного дискриминантного анализа методом наименьших квадратов (PLS-DA), основанный на относительной численности бактериальных родов в профилях микробиоты лиц с PA и HA.Роды со значительно положительными (> 0) или отрицательными (<0) коэффициентами регрессии PLS (т. Е. Без перекрытия между указанным 95% доверительным интервалом и горизонтальной осью) вносят значительный вклад в прогнозирование лиц с НА (синие столбцы) или лиц с ПА ( красные полосы) соответственно. Коэффициенты масштабировались и центрировались. Некоторые последовательности можно было идентифицировать только по разделу (D), классу (C), порядку (O) или семейству (F).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0028991.s003

(TIF)

Благодарности

Благодарим всех волонтеров за участие и Ф.К. М. ван Аггелен, А. Дж. Гиддинг и Л. Купман о выращивании комаров. Мы благодарим Дж. Лендерса за создание устройства для отбора образцов кожных эманаций, Х. Хейлига за помощь в извлечении ДНК и С. Накелни, М. Кос и Дж. Хагемана за помощь в анализе данных секвенирования.

Вклад авторов

Задумал и спроектировал эксперименты: NOV YTQ HB CM HJB JJAvL WT RCS. Проведены эксперименты: NOV YTQ HB DB-L CLL WV RCS. Проанализированы данные: NOV YTQ HB CM DK SS DB-L CLL WV GWH RM FHJC RK RCS.Написал статью: NOV CM DK DB-L MD JJAvL WT RK RCS.

Список литературы

1. 1. Хан А.А., Майбах Х.И., Штраус В.Г. (1968) Роль конвекционных потоков в привлечении комаров к коже человека. Mosquito News 28: 462–464.
2. 2. Cardé RT, Gibson G (2010) Обнаружение хозяина самками комаров: механизмы ориентации на запахи хозяина и другие сигналы. В: Takken W, Knols BGJ, редакторы. Обоняние во взаимодействиях вектор-хозяин. Вагенинген: Академические издательства Вагенингена.С. 115–140.
3. 3. Аллан С.А., Дэй Дж. Ф., Эдман Дж. Д. (1987) Визуальная экология кусающих мух. Ежегодный обзор энтомологии 32: 297–316.
4. 4. Olanga E, Okal M, Mbadi P, Kokwaro E, Mukabana W (2010) Привлечение Anopheles gambiae к ароматным приманкам, усиленным теплом и влагой. Журнал малярии 9: 6.
5. 5. Takken W, Knols BGJ (1999) Опосредованное запахом поведение афротропических малярийных комаров. Ежегодный обзор энтомологии 44: 131–157.
6. 6. Knols BGJ, De Jong R, Takken W (1995) Дифференциальная привлекательность изолированных людей для комаров в Танзании. Труды Королевского общества тропической медицины и гигиены 89: 604–606.
7. 7. Логан Дж. Г., Биркетт М. А., Кларк С. Дж., Пауэрс С., Сил Нью-Джерси и др. (2008) Идентификация летучих химических веществ человеческого происхождения, которые мешают привлечению осаров Aedes aegypti m . Журнал химической экологии 34: 308–322.
8. 8.Бернье У. Р., Бут М. М., Йост Р. А. (1999) Анализ эманаций кожи человека с помощью газовой хроматографии / масс-спектрометрии. 1.Тепловая десорбция аттрактантов комара желтой лихорадки ( Aedes aegypti ) с обработанных стеклянных шариков. Аналитическая химия 71: 1–7.
9. 9. Qiu YT, Smallegange RC, van Loon JJA, Ter Braak CJF, Takken W. (2006) Индивидуальные различия в привлекательности человеческих запахов для малярийного комара Anopheles gambiae s.s. Медицинская и ветеринарная энтомология 20: 280–287.
10. 10. Shelley WWB, Hurley HHJ Jr, Nichols AAC (1953) Подмышечный запах; экспериментальное исследование роли бактерий, апокринного пота и дезодорантов. A M A Архив дерматологии и сифилологии 68: 430–446.
11. 11. Rennie PJ, Gower DB, Holland KT (1991) In-vitro и in-vivo исследования запаха из подмышечных впадин человека и кожной микрофлоры. Британский журнал дерматологии 124: 596–602.
12. 12. Тейлор Д., Даулби А., Гримшоу С., Джеймс Дж., Мерсер Дж. И др.(2003) Характеристика микрофлоры подмышечной впадины человека. Международный журнал косметической науки 25: 137–145.
13. 13. Ара К., Хама М., Акиба С., Койке К., Окисака К. и др. (2006) Запах ног из-за микробного метаболизма и его контроля. Канадский журнал микробиологии 52: 357–364.
14. 14. Xu Y, Dixon S, Brereton R, Soini H, Novotny M, et al. (2007) Сравнение профилей запаха из подмышечных впадин человека, полученных с помощью газовой хроматографии / масс-спектрометрии, и микробных профилей кожи, полученных с помощью денатурирующего градиентного гель-электрофореза с использованием многомерного распознавания образов.Метаболомика 3: 427–437.
15. 15. Tims S, van Wamel W, Endtz HP, van Belkum A, Kayser M (2010) Дактилоскопия микробной ДНК человеческих отпечатков пальцев: динамическая колонизация микрофлоры кончиков пальцев бросает вызов выводам человеческого хозяина для судебно-медицинских целей. Международный журнал судебной медицины 124: 477–481.
16. 16. Verhulst NO, Takken W, Dicke M, Schraa G, Smallegange RC (2010) Химическая экология взаимодействий между микробиотой кожи человека и комарами. FEMS Microbiology Ecology 74: 1–9.
17. 17. Braks MAH, Takken W (1999) Инкубированный человеческий пот, но не свежий пот, привлекает малярийных комаров Anopheles gambiae sensu stricto . Журнал химической экологии 25: 663–672.
18. 18. de Jong R, Knols BGJ (1995) Выбор мест укуса человека двумя видами малярийных комаров. Experientia 51: 80–84.
19. 19. Verhulst NO, Beijleveld H, Knols BGJ, Takken W., Schraa G, et al. (2009) Культивированная микробиота кожи привлекает малярийных комаров.Журнал малярии 8: 302.
20. 20. Verhulst NO, Andriessen R, Groenhagen U, Bukovinszkiné Kiss G, Schulz S и др. (2010) Различное притяжение малярийных комаров к летучим смесям, продуцируемым кожными бактериями человека. PLoS ONE 5: e15829.
21. 21. Lefèvre T, Gouagna L-C, Dabiré KR, Elguero E, Fontenille D и др. (2010) Потребление пива увеличивает привлекательность человека для малярийных комаров. PLoS ONE 5: e9546.
22. 22. Костелло Е.К., Лаубер С.Л., Хамади М., Фирер Н., Гордон Дж. И. и др.(2009) Изменчивость бактериального сообщества в среде обитания человеческого тела в пространстве и времени. Science 326: 1694–1697.
23. 23. Caporaso JG, Kuczynski J, Stombaugh J, Bittinger K, Bushman FD, et al. (2010) QIIME позволяет анализировать данные секвенирования сообщества с высокой пропускной способностью. Природные методы 7: 335–336.
24. 24. Айва С., Ланзен А., Кертис Т.П., Давенпорт Р.Дж., Холл Н. и др. (2009) Точное определение микробного разнообразия по 454 данным пиросеквенирования. Природные методы 6: 639–641.
25. 25. Ван Кью, Гаррити Дж. М., Тидже Дж. М., Коул Дж. Р. (2007) Наивный байесовский классификатор для быстрого отнесения последовательностей рРНК к новой бактериальной таксономии. Прикладная и экологическая микробиология 73: 5261–5267.
26. 26. Прайс М.Н., Дехал П.С., Аркин А.П. (2010) FastTree 2 — деревья приблизительно максимального правдоподобия для больших трасс. PLoS ONE 5: e9490.
27. 27. Вера Д.П. (1992) Оценка сохранения и филогенетическое разнообразие. Биологическая охрана 61: 1–10.
28. 28. Gotelli NJ, Colwell RK (2001) Количественная оценка биоразнообразия: процедуры и подводные камни измерения и сравнения видового богатства. Письма по экологии 4: 379–391.
29. 29. Eriksson L, Johansson E, Kettaneh-Wold N, Trygg J, Wikström C и др. (2006) Анализ многомерных и многомерных данных. Умео, Швеция: Umetrics AB. 425 с.
30. 30. Bruinsma M, van Broekhoven S, Poelman E, Posthumus M, Müller M и др. (2010) Ингибирование липоксигеназы влияет на индукцию как прямой, так и косвенной защиты растений от травоядных насекомых.Oecologia 162: 393–404.
31. 31. Pérez-Enciso M, Tenenhaus M (2003) Прогнозирование клинического исхода с помощью данных микроматрицы: подход частичного дискриминантного анализа наименьших квадратов (PLS-DA). Генетика человека 112: 581–592.
32. 32. Gao Z, Tseng C-h, Pei Z, Blaser MJ (2007) Молекулярный анализ бактериальной биоты поверхностной кожи предплечья человека. Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки 104: 2927–2932.
33. 33. Логан Дж. Г. (2008) Почему комары «предпочитают» кусать одних людей больше, чем других? Перспективы борьбы с вредителями 19: 280–283.
34. 34. Ямазаки К., Бойз Э.А., Талер М.Г., Мэтисон Б.Дж., Эбботт Дж. И др. (1976) Контроль предпочтений спаривания у мышей с помощью генов главного комплекса гистосовместимости. Журнал экспериментальной медицины 144: 1324–1335.
35. 35. Wedekind C, Furi S (1997) Предпочтения запаха тела у мужчин и женщин: стремятся ли они к определенным комбинациям MHC или просто к гетерозиготности? Труды Королевского общества биологических наук, серия B 264: 1471–1479.
36. 36.Савельев С.У., Энтони-Бабу С., Робертс С.К., Ван Х., Клэр А.С. и др. (2008) Индивидуальные вариации 3-метилбутаналя: предполагаемая связь между лейкоцитарным антигеном человека и микрофлорой кожи. Журнал химической экологии 34: 1253–1257.
37. 37. Пенн Д., Поттс В.К. (1998) Как гены основных комплексов гистосовместимости влияют на запах и предпочтения при спаривании? Успехи в иммунологии 69: 411–436.
38. 38. Braks MAH, Anderson RA, Knols BGJ (1999) Инфохимические вещества в выборе хозяина-комара: микрофлора кожи человека и паразиты Plasmodium .Паразитология сегодня 15: 409–413.
39. 39. Okumu FO, Govella NJ, Moore SJ, Chitnis N, Killeen GF (2010) Потенциальные преимущества, ограничения и целевые профили продуктов противомоскитных ловушек с запахом для борьбы с малярией в Африке. PLoS ONE 5: e11573.
40. 40. White GB, Tessfaye F, Boreham PFL, Lemma G (1980) Емкость переносчика малярии Anopheles arabiensis и An. quadriannulatus в Эфиопии: интерпретация хромосом после 6 лет хранения полевых препаратов.Труды Королевского общества тропической медицины и гигиены 74: 683–684.
41. 41. Hunt RH, Coetzee M, Fettene M (1998) Комплекс Anopheles gambiae : новый вид из Эфиопии. Труды Королевского общества тропической медицины и гигиены 92: 231–235.
42. 42. Torr SJ, della Torre A, Calzetta M, Costantini C, Vale GA (2008) На пути к более полному пониманию поведения комаров: использование электрических сеток для сравнения ориентированных на запах ответов Anopheles arabiensis и An.quadriannulatus в поле. Медицинская и ветеринарная энтомология 22: 93–108.
43. 43. Костантини С., Саньон Н., делла Торре А., Диалло М., Брэди Дж. И др. (1998) Опосредованные запахом предпочтения хозяев западноафриканских комаров, с особым упором на переносчиков малярии. Американский журнал тропической медицины и гигиены 58: ​​56–63.
44. 44. Костантини С., Гибсон Дж., Саньон Н., делла Торре А., Брэди Дж. И др. (1996) Реакция комаров на углекислый газ в саванне в Западной Африке в Судане.Медицинская и ветеринарная энтомология 10: 220–227.